int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Klebsiella pneumoniae-Anticorpi IgG, IgM, IgA

Pret 1670.00 MDL

Klebsiella pneumoniae (Friedlander bacillus) представляет собой грамотрицательную, неподвижную инкапсулированную лактозо-положительную палочку, которая обнаруживается в нормальной флоре полости рта, кожи и желудочно-кишечного тракта. Представители рода Klebsiella экспрессируют 2 типа антигенов на поверхности: антиген O, который представляет собой липополисахарид, и антиген K, капсульный полисахарид, оба из которых способствуют патогенности.
Они являются оппортунистическими патогенами, основной резервуар инфекции представлен желудочно-кишечным трактом пациентов и руками медицинского персонала в больницах 3.
Эти бактерии обычно вызывают внебольничные пневмонии, но часто могут быстро распространяться, что часто приводит к внутрибольничным вспышкам. Спектр клинических синдромов, вызываемых этим патогеном, включает пневмонию, бактериемию, тромбофлебит, инфекции мочевыводящих путей (ИМП), верхние дыхательные пути, раны, холецистит, холангит, диарею, эндокардит, остеомиелит, эндофтальмит и менингит. Наличие инвазивных устройств, загрязнение оборудования для респираторной поддержки, использование мочевых катетеров, плохое состояние здоровья и лечение в отделении интенсивной терапии являются факторами, повышающими риск внутрибольничной инфекции видами клебсиелл. Широкое использование антибиотиков широкого спектра действия у госпитализированных пациентов привело к увеличению портежей Klebsiella и, как следствие, к разработке штаммов с множественной лекарственной устойчивостью, которые продуцируют β-лактамазы широкого спектра действия. Эти штаммы чрезвычайно вирулентны, имеют капсульный антиген К55 и обладают необычайной способностью распространяться. Инфекции, вызываемые этими видами, стали основной проблемой в большинстве больниц из-за множественной устойчивости к антибиотикам 1; 3.
Кроме того, одним из наиболее интересных аспектов патогенности Klebsiella pneumoniae является роль этого микроорганизма в этиопатологии ревматических заболеваний, связанных с HLA-B27 (анкилозирующий спондилит-AS). Связь между Klebsiella, HLA-B27 и AS неясна.
Первые сообщения появились в конце 1970-х годов, которые предполагали возможную связь между Klebsiella и AS, но только недавно была продемонстрирована связь между некоторыми энтеробактериями и ревматоидными заболеваниями. Хорошо документированные исследования, в которых анализируется связь между реактивным артритом и острыми инфекциями энтеробактерий (Yersinia enterocolitica, Shigella, Salmonella, Klebsiella), привели к гипотезе о том, что АС может быть следствием инфекции кишечными микроорганизмами 1.
В 1978 году Ebringer et al. и позже другие исследователи сообщили об увеличении колонизации кишечника клебсиеллой во время активной фазы заболевания у пациентов с АС.
В исследовании, направленном на выявление антибактериальных антител в сыворотке крови пациентов с АС, Trull et al. (в 1983 г.) показали, что титры антител против Klebsiella IgA были значительно увеличены в сыворотке пациентов с активными формами заболевания по сравнению с сывороткой неактивных пациентов или здоровых контрольных пациентов.
Различные теории были разработаны, чтобы объяснить связь между HLA-B27, Klebsiella и этиопатогенезом AS.
Теория молекулярной мимикрии, впервые предложенная Ebringer et al., Включает перекрестную реактивность между антигенами Klebsiella и некоторыми эпитопами в молекуле HLA-B27. Эта теория подтверждается наблюдениями, что анти-Klebsiella антитела связываются с HLA-B27-позитивными клетками, а анти-HLA-B27-антитела с антигенами Klebsiella. Кроме того, последовательность из шести аминокислот (QTDRED) была обнаружена как в Klebsiella, так и в структуре HLA-B * 2705, а антитела, специфичные к этому гексапептиду, были обнаружены в сыворотке пациентов с AS.
Теория рецепторов, разработанная Зинкернагелем и Доэрти, основана на гипотезе о том, что основной комплекс гистосовместимости класса I имеет вирусные и бактериальные антигены. Было высказано предположение, что HLA-B27 действует как рецептор для обработанных артритом полипептидов, вероятно, происходящих из Klebsiella. В результате цитотоксические Т-клетки, направленные против этих пептидов, также атакуют структурно сходные белки в суставах, представленные молекулами HLA-B27 1.
Несмотря на интенсивные исследования в этой области, связь между клебсиеллой и ревматическими заболеваниями остается неизвестной, поскольку упомянутые выше теории были частично опровергнуты противоречивыми результатами различных групп исследователей.
Недавние исследования ответа антител на капсульные полисахариды из клебсиелл в сыворотке пациентов с АС или другими ревматическими заболеваниями впервые проанализировали все 77 серотипов. Сыворотка пациентов с AS и HLA-B27-положительными показала высокие титры IgG в ответ на капсульные полисахариды серотипов K26, K36, K50 по сравнению с уровнем IgG у HLA-B27-отрицательных лиц.
Следует отметить, что все три типа капсульных антигенов (типы K26, K36 и K50) содержат полисахариды, распознаваемые макрофагами по лектиновому механизму. Этот тип связывания может играть начальную роль в патогенезе АС. Из 77 известных серотипов клебсиелл только 16 капсульных типов содержат последовательности, которые позволяют специфически взаимодействовать с маннозным рецептором макрофагов. Не исключено, что упомянутые выше серотипы содержат специфические антигены, возможно, пептиды, которые вызывают артритогенную активность после проглатывания и разрушения бактерии макрофагами. Процессинг и презентация этого антигена могут активировать специфический, но пока неизвестный иммунологический каскад, который вызывает реактивный артрит. Тем не менее, необходимы дальнейшие исследования, чтобы выяснить взаимодействие между этими серотипами и соответствующими клетками пациентов с AS и HLA-B27-позитивными 1.
Рекомендации по определению антител против Klebsiella pneumoniae – полезны при диагностике реактивного артрита, анкилозирующего спондилита 1; 2; 3.
Подготовка пациента – желательно натощак 2.
Материал – венозная кровь 2.
Транспортная среда, пробирка – вакуумный без антикоагулянта с / без гелевого сепаратора 2.
Необходимая обработка после сбора материала- отделение сыворотки центрифугированием 2.
Объем образца – минимум 2 мл сыворотки 2.
Причины отказа от пробы – сильно гемолизированный, гемолитический или бактериально загрязненный образец 2.
Стабильность образца – 2 недели при 2-8 ° С; длительное время при -20 ° С; Избегайте повторного оттаивания / повторного замораживания 2.
Метод – непрямая иммунофлюоресценция 2.
Референтные значения
Klebsiella pneumoniae IgG: отрицательный
Klebsiella pneumoniae IgM: отрицательный
Klebsiella pneumoniae IgA: отрицательный 2
Результаты выражены качественно отрицательно / положительно / неоднозначно 2.
Библиография
1. Hany Sahly, Rainer Podschun. Clinical, Bacteriological, and Serological Aspects of Klebsiella Infections and Their
Spondylarthropathic Sequelae. In Clinical And Diagnostic Laboratory Immunology, 393–399, 1997.
2. Лаборатория Synevo. Конкретные ссылки на технологии работы использованы 2010. Ref Type: Catalog.
3. Obiamiwe Umeh, Leonard B Berkowitz. Klebsiella Infections, www.emedicine.medscape.com. Ref Type: Internet Communication

Informații generale

Klebsiella pneumoniae (bacilul Friedlander) este un bacil Gram-negativ, imobil, incapsulat, lactozo-pozitiv, ce se gaseste in flora normala a cavitații bucale, tegument si tract gastrointestinal. Membrii genului Klebsiella exprima 2 tipuri de antigene pe suprafața: antigenul O, care este un lipopolizaharid, si antigenul K, un polizaharid capsular, ambele contribuind la patogenitate.

Sunt patogeni oportunisti, principalul rezervor de infecție fiind reprezentat de tractul gastro-intestinal al pacienților si mainile personalului medical din spitale3.

Aceste bacterii determina, in general, pneumonii dobandite in comunitate, dar frecvent se pot raspandi rapid, conducand adesea la apariția unor focare nosocomiale. Spectrul de sindroame clinice determinate de acest agent patogen include pneumonie, bacteriemie, tromboflebita, infecții ale tractului urinar (ITU), respirator superior, plagilor, colecistita, colangita, diaree, osteomielita endocardita, endoftalmita si meningita. Prezența dispozitivelor invazive, contaminarea echipamentului de suport respirator, utilizarea de catetere urinare, starea precara de sanatate si tratamentul intr-o unitate de terapie intensiva sunt factori care cresc riscul de infecție nosocomiala cu specii de Klebsiella. Folosirea pe scara larga de antibiotice cu spectru larg la pacienții spitalizați a condus la cresterea portajului de Klebsiella si, ulterior, dezvoltarea unor tulpini multirezistente care produc β-lactamaze cu spectru extins. Aceste tulpini sunt extrem de virulente, prezinta antigen capsular de tip K55 si au o capacitate extraordinara de a se raspandi. Infecțiile determinate de aceste specii au devenit o problema majora in majoritatea spitalelor din cauza rezistenței multiple la antibiotice1;3.

Mai mult decat atat, unul dintre aspectele cele mai interesante al patogenitații Klebsiellei pneumoniae este rolul acestui microorganism in etiopatologia afecțiunilor reumatice asociate cu HLA-B27 (spondilita anchilozanta-AS). Modul de asociere dintre Klebsiella, HLA-B27 si AS este neclar.

La sfarsitul anilor 1970 au aparut primele rapoarte care au sugerat o posibila legatura intre Klebsiella si AS, insa doar recent s-a demonstrat conexiunea dintre anumite Enterobacteriaceae si afecțiunile reumatoide. Studii bine documentate care au analizat asociația dintre artrita reactiva si infecțiile acute cu enterobacterii (Yersinia enterocolitica, Shigella, Salmonella, Klebsiella) au condus la ipoteza ca AS ar putea fi o sechela a infecției cu microorganismele enterice1.

In 1978, Ebringer et al. si mai tarziu si alți cercetatori au raportat o crestere a colonizarii intestinului cu Klebsiella in timpul fazei active a bolii la pacienții cu AS.

Intr-un studiu care vizeaza detectarea anticorpilor anti-bacterieni in serul pacienților cu AS, Trull et al. (in 1983) au aratat ca titrurile de anticorpi IgA anti-Klebsiella au fost semnificativ crescute in serul pacienților cu forme active de boala comparativ cu serul pacienților cu forma inactiva sau martorii sanatosi.

Diverse teorii au fost dezvoltate pentru a explica modul de asociere intre HLA-B27, Klebsiella si etiopatogenia AS.

Teoria mimetismului molecular, propus pentru prima data de Ebringer et al., implica reactivitatea incrucisata intre antigenele Klebsiellei si anumiți epitopi de la nivelul moleculei de HLA-B27. Aceasta teorie este susținuta de observațiile conform carora anticorpi anti-Klebsiella se leaga de celulele HLA-B27 pozitive si anticorpii anti-HLA-B27 la antigenele Klebsiella. In plus, o secvența de sase aminoacizi (QTDRED) a fost detectata atat la nivelul Klebsiellei cat si in structura HLA-B* 2705, iar anticorpi specifici pentru acest hexapeptid au fost detectați in serul pacienților cu AS.

Teoria receptorului dezvoltata de Zinkernagel si Doherty se bazeaza pe ipoteza conform careia complexul major de histocompatibilitate clasa I prezinta antigene virale si bacteriene. S-a sugerat ca HLA-B27 se comporta ca un receptor pentru polipeptidele prelucrate artritogenic, probabil derivate din Klebsiella. Ca urmare, celulele T citotoxice indreptate impotriva acestor peptide ataca, de asemenea, proteine similare structural, de la nivelul articulațiilor, prezentate de moleculele de HLA-B271.

In ciuda cercetarii intensive in acest domeniu, legatura dintre Klebsiella si bolile reumatoide ramane necunoscuta, deoarece teoriile menționate mai sus au fost parțial infirmate de rezultatele contradictorii ale diferitor grupuri de cercetatori.

Studii recente legate de raspunsul anticorpilor la polizaharide capsulare provenite de la Klebsiella in serul pacienților cu AS sau cu alte afecțiuni reumatice au analizat pentru prima oara toate cele 77 serotipuri. Serul pacienților cu AS si HLA-B27-pozitiv a prezentat titruri ridicate de IgG ca raspuns la polizaharidele capsulare ale serotipurilor K26, K36, K50 in comparație cu nivelul IgG al persoanelor HLA-B27-negative.

Este de remarcat faptul ca toate cele trei tipuri de antigene capsulare (tipuri de K26, K36 si K50) conțin polizaharide recunoscute de macrofage printr-un mecanism lectinic. Acest tip de legare ar putea juca un rol inițial in patogeneza AS. Dintre cele 77 de serotipuri cunoscute de Klebsiella, doar 16 tipuri capsulare conțin secvențe care permit o interacțiune specifica cu receptorul manozic al macrofagelor. Nu este exclus ca serotipurile menționate mai sus sa conțina antigene specifice, probabil peptide, care sa induca activitatea artritogenica dupa ingestia si distrugerea bacteriei de catre macrofage. Prelucrarea si prezentarea acestui antigen ar putea activa o cascada imunologica specifica, dar inca necunoscuta, ce determina apariția artritei reactive. Cu toate acestea, sunt necesare studii suplimentare care vizeaza elucidarea interacțiunii dintre aceste serotipuri si celule relevante ale pacienților cu AS si HLA-B27-pozitiv1.

Recomandari pentru determinarea anticorpilor anti-Klebsiella pneumoniae utilitate in diagnosticul artritelor reactive, spondilita ankilopoietica1;2;3.

Pregatire pacient – preferabil à jeun (pe nemancate)2.

Specimen recoltat – sange venos2.

Recipient de recoltare – vacutainer fara anticoagulant cu/fara gel separator2.

Prelucrare necesara dupa recoltare – se separa serul prin centrifugare2.

Volum proba – minim 2 mL ser2.

Cauze de respingere a probei –  specimen intens hemolizat, hemolitic sau contaminat bacterian2.

Stabilitate proba 2 saptamani la 2-8°C; timp indelungat la –20°C; evitați decongelarea/recongelarea repetata2.

Metoda imunofluorescența indirecta2. 

Valori de referința 

Klebsiella pneumoniae IgG: negativ
Klebsiella pneumoniae IgM: negativ
Klebsiella pneumoniae IgA:  negativ2

Rezultatele se exprima calitativ negativ/pozitiv/echivoc2.

 

Bibliografie

1. Hany Sahly, Rainer Podschun. Clinical, Bacteriological, and Serological Aspects of Klebsiella Infections and Their
Spondylarthropathic Sequelae. In Clinical And Diagnostic Laboratory Immunology, 393–399, 1997.
2. Laborator Synevo. Referințele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.
3. Obiamiwe Umeh, Leonard B Berkowitz. Klebsiella Infections, www.emedicine.medscape.com. Ref Type: Internet Communication.
< inapoi la lista

Pret 1670.00 MDL