Page 504 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

19.4.6 Coprocultura

InformaŃii generale
Sindromul diareic este, ca frecvenŃă, al treilea sindrom întâlnit în practica medicală.
Deşi majoritatea pacienŃilor prezintă o infecŃie autolimitantă, există şi forme severe, caracterizate prin scaune frecvente
(3-40/zi), de consistenŃă redusă (uneori apoasă), cu pierderi lichidiene mari, ce pot duce la dezechilibru hidroelectrolitic
însoŃit de tulburări hemodinamice grave (colaps cardiovascular) cauzatoare de deces.
Etiologie

Parazitară Giardia lamblia, Cryptosporidium parvum, Entamoeba histolytica
1;3
Bacteriană - Enterobateriaceae patogene: Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia coli
aerobă enteropatogen, enterotoxigen, enterohemoragic, enteroinvaziv, enteroaderent,
enteroagregativ, Yersinia enterocolitica
1;3
- Enterobacteriaceae condiŃionat patogene: Klebsiella spp. (sindromul diareic al noului
născut), Serratia marcescens (“sindromul scutecului roşu” - prin colonizare anormală cu
această bacterie la nou născuŃi)
- Vibrio cholerae, Vibrio parahaemoliticus
- AlŃi bacili Gram negativi: Aeromonas, Alcaligenes, Plesiomonas
1;3
- Coci Gram pozitivi: Staphylococcus aureus
Bacteriană Bacillus cereus, Clostridium difficile (enterocolită pseudomembranoasă post
1;3
anaerobă antibioterapie), Clostridium perfringens, Clostridium botulinum
3
Microaerofilă Campylobacter spp
3
Micotică Candida albicans
Virală Norwalk virus, Rotavirus, Adenovirus
1;3
Recoltarea şi transportul probelor
Prelevarea trebuie făcută cât mai aproape de debutul bolii şi înaintea instituirii oricărui tratament antimicrobian.
• Prelevarea din scaun emis spontan - este de preferat şi se indică în toate formele de diaree acută când emisia de
materii fecale este frecventă.
• Pentru examinări bacteriene şi parazitare, prelevarea se face cu “linguriŃa” coprorecoltorului, vizând porŃiunile lichide
şi, mai ales, cele mucoase şi/sau sangvinolente, dacă există. Volumul recoltei trebuie să fie de minim 5 ml sau 3-5 cm
3
3
dacă scaunul este format .
• Pentru izolări sau examene virusologice se prelevă 5-10 cm materii fecale sau minim 5 ml dacă scaunul nu este
3
3
format .
• Prelevarea rectală – este recomandată în:
- shigelozele cronice, unde raclarea mucoasei rectale cu sonda ori tamponul oferă şanse mai mari izolării;
- investigarea purtătorilor de Shigella şi Salmonella, cu excepŃia celor de S. Typhi.
Pentru acest tip de prelevare se folosesc sonde Nelaton (nr.14-16) ori tampoane adecvate, astfel: cu tamponul,
umectat în soluŃie salină izotonă (a nu se folosi geluri lubrefiante), se penetrează sfincterul anal prin rotire lentă,
introducându-se intrarectal aprox. 15 cm. Se va proceda identic şi cu sonda Nelaton, la care se adaptează o seringă
(10 ml) cu care se fac 1-2 aspiraŃii. După prelevare, sondele şi tampoanele se introduc în recipiente sterile ce conŃin
3
mediu de conservare, se etichetează corespunzător şi se trimit la laborator .
Transportul probelor şi prelucrarea lor se face în max. 2 h dacă au fost recoltate în recipiente fără mediu de transport,
sau pot fi păstrate până la 24 h la temperatura camerei, dacă s-au recoltat în recipiente ce conŃin mediu de transport
Cary-Blair, ce asigură o bună viabilitate a patogenilor intestinali bacterieni. ExcepŃie de la aceste reguli fac probele
recoltate în suspiciunea de infecŃie cu Shigella spp, bacterie foarte sensibilă, ce necesită însămânŃare pe mediile de
cultură imediat după prelevare .
3;4
Pentru etiologia virală, probele care nu se prelucrează imediat trebuie păstrate la - 70°C .
3
Izolarea bacteriilor aerobe
• Se însămânŃează proba pe două medii de cultură, unul slab selectiv (Mac Conkey) şi unul moderat selectiv (ADCL) şi
se incubează 24 h la 35-37ºC, urmărindu-se culturile la 24 şi 48 h pentru apariŃia coloniilor caracteristice. Pentru genul
Vibrio, mediul selectiv recomandat este BSA (agar săruri biliare), iar pentru levuri- mediul Sabouraud cu Cloramfenicol.
• Pentru a creşte şansele de izolare, proba este subcultivată pe medii de îmbogăŃire ce favorizează multiplicarea
patogenilor (e.g., bulion selenit acid de sodiu pentru Salmonella spp., apă peptonată alcalină sau bulion cu taurocolat
şi peptonă la pH=8,0-9,0 pentru Vibrio de unde, după incubare, se pot efectua frotiuri şi culturi din partea superioară a
mediului). Se incubează 24 h la 35-37°C, apoi se fac treceri pe mediile de cultură.