int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Piruvat-kinaza eritrocitara

Pret 200.00 MDL

Общая информация

Пируваткиназа (PK) – это фермент гликолитического пути, который катализирует превращение фосфоенола в пируват (PEP) в пируват, одну из двух реакций, которые приводят к выработке ATP1.
Дефицит PK занимает второе место по частоте после дефицита G-6-P DH, который обнаруживается в основном в Европе, США и Японии; наследуется рецессивно-аутосомно-рецессивно-1 и обладает эффектом снижения метаболизма глюкозы, снижения концентрации АТФ в эритроцитах и ​​возникновения хронической гемолитической анемии, несфероцитарной, различной степени тяжести5.

Снижение синтеза АТФ влияет на клеточную мембрану, чаще всего с участием ретикулоцитов и молодых эритроцитов3.

Метаболизм эритроцитов
Зрелые эритроциты представляют собой неядерные клетки (неспособные к клеточному делению), лишенные рибосом (не показывают синтеза белка) и митохондрий (неспособные к окислительному фосфорилированию).
Продолжительность жизни циркулирующих эритроцитов составляет 100-120 дней, их основной функцией является транспортировка кислорода в ткани1.
Глюкоза, основной метаболический субстрат эритроцитов, метаболизируется двумя важными путями: 90% – гликолитическим путем (продуцент энергии), а остальная часть (5 – 10%) – гексозо-монофосфатом.
(HMP) с защитной ролью от окислительного стресса. При определенных условиях, которые усиливают окислительный стресс, доля глюкозы, поступающей в путь HMP, также увеличивается.
генетика

Пируваткиназа представляет собой тетрамерный белок с молекулярной массой 230 кДа. Есть два гена (PKM2 и PKLR), которые кодируют четыре изофермента PK.
Ген PKM2 расположен в хромосоме 15 (15q 22) и кодирует изоферменты PK-M2 и PK-M1. PK-M2 обнаруживается во время жизни плода во всех тканях, затем, по мере созревания тела, PK-M2 сохраняется в качестве преобладающего изофермента в зрелых лейкоцитах, тромбоцитах, легких, почках, селезенке, жировой ткани. Это также основной фермент в эритроидных предшественниках. PK-M1 является изоферментом, присутствующим в мышечной и мозговой ткани.
Ген PKLR обнаружен в хромосоме 1 (1q 21) и кодирует изоферменты PZ-L и PK-R.
PK – L является преобладающим изоферментом в печени, а PK – R является изоферментом, присутствующим в зрелых эритроцитах.

Гемолитическая анемия, связанная с дефицитом PK, является результатом мутаций (было идентифицировано около 200), которые происходят в гене PKLR. Большинство вариантов PK представляют собой аномальные белки, которые отличаются друг от друга физико-химическими и кинетическими свойствами.

Собранный образец – венозная кровь3.

Контейнер для сбора урожая – Vacutainer с EDTA K33.

Собранное количество – столько, сколько позволяет вакуум3.

Обработка требуется после сбора урожая – образец цельной крови немедленно охлаждается.

Стабильность образца – цельная кровь стабильна в течение 7 дней при 2–8 ° C2;

Метод – фотометрический (ферментативный) 3.

Контрольные значения – 5,3 – 17,3 U / г Hb3

Коэффициенты пересчета: U / gHb x 0,34 = U / мл эритроцитов2.

Интерпретация результатов и клинических последствий

ПК низок в:
● врожденный дефицит ФК – несфероцитарная гемолитическая анемия, длительная желтуха новорожденных;
● приобретенный дефицит ПК – при миелодиспластических синдромах, острых лейкозах и других анемиях2; 5.
В случае врожденного дефицита ФК внутрисосудистый гемолиз может усиливаться во время беременности или после лечения оральными контрацептивами

Список используемой литературы
1. Бертиль Глейдер. Наследственные гемолитические анемии из-за ферментных расстройств эритроцитов. В клинической гематологии Wintrobe. Филадельфия, изд. 2009, 933-949.
2. Фрэнсис Фишбах. Обзор основных гематологических и коагуляционных тестов крови. В пособии лабораторных и диагностических исследований. изд.8, 2009, 115-116.
3. Kohne E. Ферменты эритроцитов. В Lothar Thomas Clinical Laboratory Diagnostics, 1998, 494-496.
4. Синевская лаборатория. Конкретные ссылки на используемые технологии работы. 2010. Тип ссылки: Каталог.
5. Марк Дж. Энзимопатии эритроцитов. В трактате по внутренней медицине-гематологии – часть I, Бухарест, изд. 1997, 819-821.

Informatii generale

Piruvatkinaza (PK) este enzima caii glicolitice ce catalizeaza conversia fosfoenol piruvatului (PEP) in piruvat, una din cele doua reactii ce au ca rezultat producerea de ATP1.

Deficitul de PK ocupa locul doi ca frecventa dupa deficitul de G-6-P DH, fiind intalnit mai ales in Europa, SUA si Japonia; se transmite ereditar autosomal recesiv1 si are ca efect reducerea capacitatii de metabolizare a glucozei, scaderea concentratiei de ATP din eritrocite si aparitia unei anemii hemolitice cronice, non-sferocitare, de severitate variabila5.

Scaderea sintezei ATP afecteaza membrana celulara, cel mai frecvent fiind implicate reticulocitele si eritrocitele tinere3.

Metabolismul eritrocitar

Eritrocitele mature sunt celule anucleate (incapabile de diviziune celulara),  lipsite de ribozomi (nu prezinta sinteza proteica) si de mitocondrii (incapabile de fosforilare oxidativa).

Durata de viata a eritrocitelor in circulatie este de 100 – 120 zile, functia lor de baza fiind transportul de oxigen catre tesuturi1.

Glucoza, principalul substrat metabolic al hematiei, este metabolizata pe doua cai importante: 90% pe calea glicolitica (producatoare de energie), iar restul (5 – 10%) pe calea suntului hexozo-monofosfatului

(HMP) cu rol protector fata de stress-ul oxidativ.  In anumite conditii care cresc stress-ul oxidativ, creste si fractia de glucoza ce intra pe calea HMP1.

Genetica

Piruvatkinaza este o proteina tetramerica cu greutate moleculara de 230 KD. Exista doua gene (PKM2 si PKLR) ce codifica patru izoenzime PK..  

Gena PKM2 se afla pe cromozomul 15 (15q 22) si codifica izoenzimele PK – M2 si PK – M1. PK – M2 se gaseste in cursul vietii fetale in toate  tesuturile, apoi, pe masura ce organismul se maturizeaza, PK – M2 persista ca izoenzima predominant in leucocitele mature, trombocite, plamani, rinichi, splina, tesut adipos. De asemenea, este enzima majoritara in precursorii eritroizi. PK – M1 este izoenzima prezenta in tesutul muscular si creier.

Gena PKLR se gaseste pe cromozomul 1 (1q 21) si codifica izoenzimele PK – L si PK – R.

PK – L este izoenzima predominanta la nivel hepatic, iar PK – R este izoenzima prezenta in eritrocitele mature.

Anemia hemolitica asociata cu deficitul de PK este rezultatul mutatiilor (au fost identificate aproximativ 200) ce apar la nivelul genei PKLR. Cele mai multe variante de PK sunt proteine anormale ce difera intre ele prin proprietati fizico-chimice si kinetice1.

Caracteristici enzimatice si modificari hematologice asociate deficitului de PK3

– Anemie hemolitica de severitate variabila (forme usoare, compensate; forme moderate; forme severe ); hepatosplenomegalie, macrocitoza, poichilocitoza, relativ putine reticulocite.

-Deficit enzimatic homozigot;

-Activitate enzimatica reziduala variabila a diferitelor tipuri enzimatice patologice;

– Tipuri speciale: dublu heterozigoti pentru doua variante enzimatice.

-Forme silentioase din punct de vedere clinic, cu exceptia nou-nascutilor care pot prezenta hiperbilirubinemie.

-Deficit enzimatic heterozigot cu activitate enzimatica de 50%.

Specimen recoltat – sange venos3.

Recipient de recoltare – vacutainer cu EDTA K33.

Cantitate recoltata – cat permite vacuumul3.

Prelucrare necesara dupa recoltare – proba de sange integral se refrigereaza imediat2;3.

Stabilitate proba – sangele integral este stabil 7 zile la 2–8°C2;3.

Metoda fotometrica (enzimatica)3.

Valori de referinta – 5.3 – 17.3 U/g Hb3

Factori de conversie : U/gHb x 0.34 = U/ml de eritrocite2.

Interpretarea rezultatelor si implicatii clinice

PK este scazuta in: 

● deficitul congenital de PK – anemie hemolitica non-sferocitara, icter neo-natal prelungit;

● deficitul dobandit de PK – in sindroame mielodisplazice, leucemii acute si alte anemii2;5.

In cazul deficitului congenital de PK, hemoliza intravasculara poate fi accentuata pe perioada sarcinii sau in urma tratamentului cu contraceptive orale2.

 

Bibliografie

1. Bertil Glader. Hereditary Hemolytic Anemias Due to Red Blood Cell Enzyme Disorders. In Wintrobe’s Clinical Hematology. Philadelphia, ed.2009, 933-949.

2. Frances Fischbach. Overwiew of Basic Blood Hematology and Coagulation Tests. In A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests. ed.8, 2009, 115-116.

3. Kohne E.Erytrocyte enzymes.In Lothar Thomas Clinical Laboratory Diagnostics, 1998, 494-496.

4. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate. 2010. Ref Type: Catalog.

5. Marcu J. Enzimopatiile eritrocitare. In Tratat de medicina interna-Hematologie – partea I, Bucuresti, ed.1997, 819-821.

< inapoi la lista

Pret 200.00 MDL