int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Citomegalovirus – Anticorpi IgG

Pret 200.00 MDL

Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВ)

Этиология. Цитомегаловирусная инфекция — широко распространенная вирусная инфекция, относится к группе TORCH-инфекций, поэтому важное значение имеет при планировании и ведении беременной. Возбудитель — цитомегаловирус (ЦМВ), является ДНК-содержащим вирусом, относится к семейству Herpesviridae, подсемейству βherpesvirinae.

Эпидемиология. Источником инфекции для человека является только человек — больной или носитель. Основные пути передачи вируса: контактно-бытовой, трансплацентарный, трансфузионный (вирус находится в лейкоцитах), интранатальный, половой, воздушно-капельный. Инфицирование происходит только при тесном и неоднократном контакте с больным, выделения которого (слюна, слезы, моча, цервикальный и вагинальный секреты, грудное молоко, сперма) содержат вирус.

Инфицирование вирусом и формирование иммунной защиты происходит уже в первые годы жизни, с возрастом процент инфицированного населения постепенно растет и к 50 годам практически все становятся серопозитивными (выявляются IgG) к данному вирусу. Вирус начинает выделяться через 4-6 недель после инфицирования и продолжается от нескольких месяцев до нескольких лет. Инфицирование вирусом, в большинстве случаев, не приводит к заболеванию благодаря вырабатывающимся антителам, однако полной элиминации вируса из организма не происходит — он продолжает персистировать в клетках организма (в первую очередь, клетках крови — лейкоцитах, макрофагах) и может выделяться с мочой, слюной, грудным молоком, генитальными выделениями, обеспечивая контагиозность человека для окружающих. Длительность данного выделения широко варьирует. К сожалению, наличие антител не обеспечивает полную защиту от реактивации и реинфекции. При ослаблении иммунных механизмов защиты (длительная иммуносупрессивная терапия, инфицирование ВИЧ, другие) вирус может реактивироваться и привести к поражению органов и систем с соответствующей клинической картиной.

Клинические проявления

У иммунокомпетентных людей ЦМВ инфекция в большинстве случаев протекает бессимптомно, однако это не исключает возможности выделения вируса с различными биологическими жидкостями. У небольшого процента может отмечаться длительная лихорадка с мононуклеозоподобным синдромом, изменениями со стороны печени (увеличение уровня трансаминаз), возможно развитие полирадикулоневрита.

В редких случаях через 3-5 недель после массивных трансфузий может развиваться посттрансфузионный мононуклеозоподобный синдром.

Беременность и ЦМВ инфекция. Первичное инфицирование ЦМВ во время беременности в 40-50% случаев приводит к инфицированию плода, тогда как при реактивации — только в 1% (по разным литературным источникам, до 8%). При этом тяжелые поражения плода при реактивации практически не встречаются. У 90-95% новорожденных врожденная цитомегаловирусная инфекция протекает бессимптомно и не вызывает развития пороков развития, 5-10% детей имеют клинические проявления врожденной инфекции (желтуха, гепатоспленомегалия, хориоретинит, тромбоцитопения, микроцефалия, перивентрикулярные кальцинаты, глухота). Внутриутробное инфицирование плода может произойти в любой период беременности при первичном инфицировании беременной и при реактивации хронической инфекции. Наибольший риск для ребенка — в третьем триместре. Трансплацентарному (гематогенному) инфицированию способствует недостаточность барьерной функции плаценты, длительная вирусемия и хронический характер инфекции.

Диагностика ЦМВ инфекции. Лабораторная диагностика основывается на выявлении серологических маркеров (иммуноглобулинов IgМ, IgG и авидности IgG) и молекулярных методах (выявление методом ПЦР вируса в различных биологических жидкостях).

Серологическая диагностика. Оценка серологических маркеров относится к непрямым методам диагностики инфекций — она позволяет оценить наличие иммунного ответа организма на внедрение возбудителя в организм.

Определение IgМ — появляются первыми (через 5-7 дней) в ответ на внедрение или реактивацию (практически одновременно с активацией вируса) возбудителя, поэтому позволяют выявить острую стадию первичной инфекции (когда еще нет IgG) или реактивацию хронической (на фоне выявления IgG). Данные антитела не обладают высокой специфичностью и поэтому могут быть ложноположительными (за счет перекрестной реакции с другими представителями из группы герпесвирусов), особенно во время беременности. Это необходимо учитывать при интерпретации положительного результата. В данных случаях наиболее оптимально использовать динамику IgG (четырехкратное нарастание будет свидетельствовать в пользу активности процесса). Длительность периода выявления в крови при первичной инфекции, в среднем, составляет до 3 месяцев, при реактивации – от нескольких дней до нескольких недель. Данный период зависит от степени напряженности иммунитета организма и активности процесса. В период новорожденности особенности формирования иммунной системы могут привести к отсутствию выработки данных антител при наличии инфекции, поэтому однозначно интерпретировать отрицательные результаты как отсутствие инфекции невозможно: в данных случаях молекулярные методы диагностики (ПЦР) позволяют выявить вирус в различных биологических жидкостях (наиболее оптимально — исследование мочи).

Определение IgG – данные антитела появляются через 2-3 недели после инфицирования, являются строго специфичными для возбудителя, сохраняются пожизненно, уровень не отражает активности процесса. Выявление иммуноглобулинов данного класса позволяет оценить наличие иммунной памяти организма к вирусу. Наличие данных антител до беременности позволяет прогнозировать низкий риск внутриутробного инфицирования, поэтому наиболее оптимальным сроком для обследования является период планирования беременности. Выявление данных антител во время беременности не позволяет исключить первичное инфицирование во время беременности. В данных ситуациях необходимо обследование дополнять определением авидности IgG, позволяющего определить давность инфицирования и проводить тестирование в парной сыворотке (определение IgG) через 2-3 недели для выявления и подтверждения острой стадии инфекционного процесса (реактивации или реинфекции). Нарастание уровня антител класса IgG будет свидетельствовать об активности процесса и необходимости решения вопроса о тактике ведения (дополнительное обследование, лечение). Данное тестирование необходимо в ситуациях, когда IgМ положительны для исключения возможных ложноположительных результатов выявления данных антител и в ситуациях, когда IgМ отрицательны для подтверждения отсутствия реактивации инфекционного процесса.

Определение авидности IgG – данный тест позволяет оценить давность инфицирования: низкоавидные антитела циркулируют на протяжении 3-4 месяцев после первичного инфицирования и затем сменяются высокоавидными антителами. Выявление низкоавидных антител будет свидетельствовать о первичном инфицировании в течение 3-4 предыдущих месяцев, высокоавидных — наоборот, о том, что инфицирование произошло за 3-4 месяца до обследования. Эти данные наиболее актуальны при обследовании беременных, которые не обследованы до наступления беременности — выявление IgG не позволяет ответить на вопрос о сроке инфицирования (не дает возможность исключить первичное инфицирование во время беременности и, следовательно, высокие риски инфицирования плода).

Серологические маркеры цитомегаловирусной инфекции:

Цитомегаловирус, антитела IgG

Цитомегаловирус, авидность антител IgG

Цитомегаловирус, антитела IgM

Показатель Характеристика
Материал Венозная кровь
Правила подготовки пациента Cтандартные
Транспортная среда, пробирка Вакутайнер с/без антикоагулянта с/без гелевой фазы
Правила и условия транспортировки, стабильность пробы Стандартные

Цитомегаловирус, антитела IgM

Показания к назначению
Маркер острой стадии инфекционного процесса (первичного инфицирования или реактивации)

· Дифференциальная диагностика этиологии инфекционного процесса при: клинике синдрома мононуклеоза, лихорадке неясного

генеза, пневмонии, гепатите, энцефалите, менингоэнцефалите, миелите, нейропатии, перикардите, миокардите, колите, увеите,

ретините (часто развивается у ВИЧ-инфицированных), клинике синдрома Гийена-Барр, тромбоцитопении, гемолитической анемии;

· оценка активности вируса во время беременности;

· контроль первичного инфицирования серонегативных по ЦМВ беременных;

· диагностика врожденной ЦМВ инфекции

Интерпретация результатов
В случае получения сомнительного результата необходимо определение IgG. Повторить в парной сыворотке через 2 недели

определение IgМ и IgG

Положительный результат Отрицательный результат
· Острая стадия первичной ЦМВ инфекции;

· реактивация ЦМВ инфекции;

· врожденная ЦМВ (у новорожденных);

· ложноположительный результат

· Отсутствие инфицирования ЦМВ;

· ранний инкубационный период инфицирования ЦМВ;

· отсутствие острой стадии при первичном инфицировании или реактивации;

· нельзя исключить врожденную ЦМВ инфекцию (у 10-30% новорожденных не синтезируются);

· инфицирование ЦМВ в прошлом

Цитомегаловирус, антитела IgG

Показания к назначению
Маркер наличия иммунной памяти к цитомегаловирусу

· Оценка риска внутриутробного инфицирования плода при планировании беременности, во время беременности;

· дифференциальная диагностика этиологии инфекционного процесса при: клинике синдрома мононуклеоза, лихорадке неясного генеза,

пневмонии, гепатите, энцефалите, менингоэнцефалите, миелите, нейропатии, перикардите, миокардите, колите, увеите, ретините (часто

развивается у ВИЧ-инфицированных), клинике синдрома Гийена-Барр, тромбоцитопении, гемолитической анемии

Интерпретация результатов
В случае получения сомнительного результата необходимо повторить определение IgG в парной сыворотке через 2 недели,

определение IgМ

Положительный результат Отрицательный результат
· Наличие инфицирования вирусом;

· при динамике нарастания в 4 и более раз через 2 недели — подтверждение активности процесса

· Нет инфицирования вирусом;

· ранняя стадия первичного инфицирования (до 2-3 недели) — контроль в динамике через 2 недели, определение IgМ

Цитомегаловирус, авидность антител IgG

Показания к назначению
Маркер давности инфицирования вирусом

· Оценка давности инфицирования вирусом в случае выявления IgG к ЦМВ;

· дифференциальная диагностика первичного инфицирования цитомегаловирусом во время беременности (при выявлении

положительных результатов IgG)

Интерпретация результатов
Исследование проводится только после предварительного выявления IgG. В случае получения средней авидности необходимо

дополнительное обследование для исключения первичного инфицирования: определение IgМ, IgG в парной сыворотке,

молекулярные методы выявления вируса (методом ПЦР)

Низкая авидность Высокая авидность
· Инфицирование цитомегаловирусом за 3-4 месяца до тестирования · Инфицирование цитомегаловирусом более чем за 3-4 месяца до тестирования

Informatii generale si recomandari

Virusul citomegalic face parte din aceeasi familie cu virusul herpes simplex si virusul varicelo-zosterian. Pe langa virusul uman exista si virusuri citomegalice ale animalelor, complet distincte de cel uman2.

Virusul citomegalic a fost izolat in 1956 si denumit astfel datorita efectului citopatic caracteristic: celulele infectate cu virus se hipertrofiaza si contin incluzii intranucleare eozinofilice voluminoase, cu aspect de “ochi de bufnita”2;6.

Infectia cu virusul citomegalic este extrem de raspandita, in timp ce boala clinica constituie o consecinta mai rara a acestei infectii comune (80-100% din populatia adulta prezinta anticorpi specifici, ca rezultat predominant al infectiilor asimptomatice).

In prezent, infectia citomegalica este considerata o problema importanta de sanatate publica, din urmatoarele motive: frecventa crescuta a infectiilor congenitale, caracterul de infectie virala persistenta, cu posibilitati de reactivare mai ales la persoanele imunodeprimate si la cele cu transplant de organe si implicarea virusului in patologia postransfuzionala (sindromul posttransfuzional, hepatita citomegalica posttransfuzionala).

Omul este singurul rezervor natural de virus citomegalic uman (virusurile citomegalice ale animalelor nu sunt infectante pentru om). Modul de transmitere a infectiei este variat. Virusul se gaseste in urina si saliva persoanelor infectate ca si in secretia vaginala, sperma si lapte matern. Fatul poate fi infectat in utero; mai frecvent insa infectia se produce perinatal, prin contactul nou-nascutului cu secretiile cervicale pline de mucus, sau postnatal prin contactul infectant cu produse de la mama (saliva, lapte, etc.). O alta modalitate frecventa (peste 50% din infectii) se realizeaza prin sarut si contact sexual. Sunt posibile si caile de transmitere iatrogena, prin transfuzii de sange (virusul fiind prezent in leucocite) sau prin grefe de organ (ex: rinichi) de la persoane aparent sanatoase4.

Virusul persista in organism in stare latenta o perioada indelungata. Infectia nu confera o imunitate solida, virusul continuand sa fie eliminat din organism si in prezenta anticorpilor specifici. Atunci cand apare o scadere a rezistentei organismului (terapie imunosupresiva prelungita, boli casectizante, inclusiv SIDA) infectia latenta poate deveni clinic manifesta (hepatita, pneumonie, encefalita), uneori avand consecinte letale. Perioada de contagiozitate dureaza (cu intermitente) luni, ani, sau toata viata, virusul fiind eliminat prin urina sau saliva de 5% din copii, 1-2% din adulti si 10% din gravide2.

Infectia primara la adult este in majoritatea cazurilor asimptomatica; atunci cand devine manifesta, tablourile clinice sunt variate: stare febrila de etiologie neprecizata, tablou de mononucleoza infectioasa cu anticorpi heterofili negativi, hepatita cu icter2;4.

Gravidele prezinta o susceptibilitate crescuta fata de infectia citomegalica (de 6 ori mai mare, comparativ cu restul populatiei adulte). Infectia se transmite pe cale sexuala, prin transfuzii de sange sau se poate produce prin reactivarea unei infectii latente. In infectia primara a gravidei (circa 10-60% sunt receptive la varsta adulta), riscul infectiei fetale este maxim (pana la 50%)3. Transmiterea verticala a infectiei in cursul primelor 4 luni de sarcina are consecintele cele mai grave (hepatita, surditate, microcefalie)1. In cazurile de reactivare a unei infectii latente (0.7-0.9% din gravide) riscul de infectie fetala este foarte redus sau chiar absent (copiii respectivi raman neafectati sau fac infectii subclinice)3;6.

Sindromul posttransfuzional apare la un interval de 3-6% dupa o transfuzie de sange si se manifesta prin stare febrila, adenopatii, hepato-splenomegalie, eruptii si modificari imunopatologice (factor reumatoid, anticorpi antinucleari, aglutinine la rece, crioglobuline, test Coombs pozitiv). Pacientii prezinta un titru crescut de anticorpi specifici pentru infectia citomegalica, confirmand astfel o boala citomegalica transmisa prin sangele transfuzat2.

Raspunsul imun fata de virusul citomegalic implica sinteza de anticorpi specifici din clasa IgM la cateva saptamani de la contractarea infectiei , urmata o saptamana mai tarziu de aparitia anticorpilor IgG. Nivelurile de anticorpi IgM ating un maxim dupa cateva saptamani, dupa care scad in decurs de 4-6 luni. Ocazional, acestia pot persista mai multi ani.

Determinarea anticorpilor de tip IgM constituie un instrument important in diagnosticul infectiei citomegalice acute. Totusi, este dificil sa se faca distinctia intre infectia primara si cea secundara, deoarece reactivarea poate induce sinteza variabila de IgM la persoanele imunodeprimate.

Determinarea anticorpilor IgG este utila in screening-ul statusului imun, permitand identificarea indivizilor seronegativi, la care pot fi aplicate masuri profilactice. De asemenea, monitorizarea in dinamica a nivelului anticorpilor IgG constituie o modalitate importanta de depistare a infectiei acute2;5;6.

Pregatire pacient – testele nu necesita o pregatire prealabila5.

Specimen recoltat – sange venos5.

Recipient de recoltare – vacutainer fara anticoagulant cu/fara gel separator5.

Prelucrare necesara dupa recoltare – se separa serul prin centrifugare5.

Volum proba – minim 1mL ser (pentru determinarea ambelor tipuri de anticorpi)5.

Cauze de respingere a probei – specimen hemolizat5.

Stabilitate proba – serul separat este stabil 3 zile la 2-8ºC; 6 luni la –20ºC; evitati  congelare/decongelare repetata5.

Metode

În laboratorul Synevo sunt utilizate următoarele metode de lucru:

  1. imunochimică prin tehnica ELFA (enzyme-linked immunofluorescence assay)
  2. imunochimică cu detecţie prin electrochemiluminiscenţă (ECLIA)5.

Valori de referinţă -.diferă în funcţie de metoda de lucru5:

CMV-IgG

1. ELFA

<4  AU/mL  : Negativ

4 – 6 AU/mL: Echivoc

≥6 AU/mL :   Pozitiv

2. ECLIA

<0.5  U/mL  : Negativ

0.5 – 1 U/mL: Echivoc

≥1U/mL:        Pozitiv

 

CMV-IgM

1. ELFA

<0.70   Index      : Negativ

0.70 – 0.90 Index: Echivoc

≥0.90 Index    :     Pozitiv

2. ECLIA

<0.70 Index      : Negativ

0.70 – 1: Index:   Echivoc

≥1 Index:            Pozitiv.

Interpretarea rezultatelor

Determinarea statusului imun:

CMV IgG :

negativ – expunere absenta; in cazul pacientelor gravide se va repeta recoltarea pentru  determinarea anticorpilor IgG in luna a 4-a de sarcina6;

echivoc – se recomanda repetarea determinarii dupa o saptamana;

pozitiv – indica expunere in antecedente la virusul citomegalic; se recomanda efectuarea anticorpilor IgM din acelasi ser; obtinerea unui rezultat negativ exclude infectia primara (la pacientele gravide se considera ca exista un risc minim de infectie congenitala si nu sunt necesare investigatii ulterioare)5;6.

Diagnosticul infectiei acute

Demonstrarea unei seroconversii a anticorpilor IgG (negativ→pozitiv) sau a unei cresteri de doua ori a nivelului anticorpilor IgG in seruri perechi obtinute la interval de 14-21 zile confirma infectia recenta5.

Un rezultat pozitiv pentru anticorpii IgM este de asemenea sugestiv pentru infectia recenta, dar instituirea masurilor clinice nu trebuie sa se faca pe baza unei singure determinari. Un rezultat pozitiv pentru CMV – IgM trebuie confirmat intotdeuna printr-o alta metoda de lucru1.

In laboratorul Synevo, un rezultat pozitiv pentru CMV-IgM este confirmat prin cel putin doua metode de lucru, iar aceasta mentiune apare pe buletinul final de rezultate5.

Diagnosticul infectiei congenitale

Evidentierea anticorpilor IgM in prima saptamana de viata poate reprezenta un instrument util in diagnosticul infectiei citomegalice congenitale3;5.

Limite şi interferenţe

În stadiile precoce ale infecţiei acute cu virusul citomegalic se poate obţine un rezultat negativ pentru anticorpii IgG.

La pacienţii imunodeprimaţi rezultatele obţinute trebuie interpretate cu prudenţă. Pentru diagnosticul infecţiei reactivate la imunodeprimaţi sunt utile tehnicile moleculare (PCR)5;6.

Probele care conţin anticorpi antinucleari sau alte tipuri de anticorpi anti-tisulari pot da rezultate pozitive nespecifice.

O creştere a nivelului de anticorpi anti-Citomegalovirus IgG şi IgM a fost constatată şi la pacienţii infectaţi cu virusul rujeolic, herpetic sau varicelo-zosterian, datorită unei reactivităţi încrucişate în cadrul  familiei herpesvirusurilor. De asemenea pacienţii având infecţie acută cu virusul Epstein-Barr sunt  susceptibili de a prezenta o reacţie încrucişată cu virusul citomegalic2;4;5.

Serologia maternă nu are valoare predictivă în ceea ce priveşte probabilitatea infecţiei in utero.

Folosirea tehnicii PCR de detectare a genomului viral în lichidul amniotic poate fi utilă pentru diagnosticul infecţiei fetale după săptămâna 21 de sarcină1.

Absenţa anticorpilor IgM nu exclude posibilitatea unei infecţii congenitale (10-30% din nou-născuţii infectaţi nu dezvoltă anticorpi IgM specifici), de aceea izolarea virusului din urină în cursul primei săptămâni de viaţă rămâne cea mai bună modalitate de diagnostic al infecţiei congenitale5;6.

 

Bibliografie:

1. Ann M. Gronowski. Prenatal Screening and Diagnosis of Congenital Infections. In Handbook of Clinical Laboratory Testing During Pregnancy, Humana Press, Totowa, New Jersey, 2004, 254-255.

2. Drew WL. Herpesviridae: Cytomegalovirus. In Laboratory Diagnosis of Infectious Disease; Principles and Practice, New York, Springer-Verlag, 1988, 247-260.

3. Gaytant MA et al. Congenital Cytomegalovirus Infection: Review of the Epidemiology and Outcome. In Obstet. Gynecol Surv, 2002; 57(4): 245-256.

4. Ho M. Characteristics of Cytomegalovirus. In Cytomegalovirus Biology and Infection: current topics in Infectious Disease, New York: Plenum, 1982: 9-32.

5. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog

6. Lothar Thomas. Pregnancy. Viral Disease. In Clinical Laboratory Diagnostics, 1998: 1117, 1232-1233.

< inapoi la lista

Pret 200.00 MDL