int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Borrelia burgdorferi ADN (in sange, LCR, lichid articular, biopsie cutanata)

Pret 1752.00 MDL

Болезнь Лайма – это мультисистемная болезнь, вызванная укусом клеща, зараженным Borrelia burgdorferi. Изучение антигенных различий между штаммами, выделенными в Америке и Европе, позволило выявить причастность к патологии человека трех генотипов, которые составляют комплекс Borrelia burgdorferi sensu lato: Borrelia burgdorferi sensu stricto (который включает в себя все штаммы, выделенные в Северной Америке), B. garinii и B. afzelii. Все три генотипа циркулируют в Европе, но преобладают B. garinii и B. afzelii1; 2; 3; 6; 7.
Молекулярные методы являются альтернативой в диагностике болезни Лайма и основаны на усилении определенной области бактериального генома. Они применимы ко всем патологическим продуктам, собранным на разных стадиях инфекции, но рекомендуется использовать только у пациентов, которые имеют положительный или сомнительный результат в серологических тестах6.
Рекомендации по определению боррелий – ДНК – диагностика болезни Лайма; astfel1:
I стадия – биопсия кожи от мигрирующей эритемы;
II стадия – биопсия кожи диссеминированной мигрирующей эритемы или CSF при нейроборелиозе;
III стадия- биопсия кожи при хроническом атрофическом ахромодерматите, синовиальной жидкости при артрите Лайма или CSF при нейроборелиозе.
Техника ПЦР имеет более высокую чувствительность, чем культура, в случае образцов биопсии, крови и суставной жидкости, в отличие от CSF и мочи, где результаты не были удовлетворительными 1; 7.
Исследования, выполненные методом ПЦР-анализа суставной жидкости у пациентов с артритом Лайма, продемонстрировали превосходную чувствительность и специфичность (Nocton, 1994; Dumler, 2001). Напротив, исследования CSF пациентов с острым или хроническим нейроборрелиозом показали минимальное улучшение чувствительности по сравнению с культурой.
В таблице ниже показана чувствительность метода ПЦР – ДНК боррелий в зависимости от исследуемого патологического продукта и стадии инфекции6:

Есть лаборатории, которые используют эту технику для извлечения генетического материала Боррелии непосредственно из клеща, вызвавшего укус, с указанием, был ли он инфицирован или нет4.
Обучение пациентов – не требуется4.
Собранный образец – а) биопсия кожи; б) спинномозговая жидкость, собранная при люмбальной пункции; в) синовиальная жидкость; г) кровь придет; е) моча; е) клещ, извлеченный из места жала4.
Контейнер для сбора – вакуумный контейнер, содержащий ЭДТА в качестве антикоагулянта для отбора проб венозной крови и стерильный контейнер для других биологических продуктов4.
Собранное количество – а) фрагмент кожи; б) 2 мл; в) 2 мл; г) 3 мл; д) 10 мл4.
Обработка требуется после сбора – образцы не будут центрифугироваться4.
Причины отклонения образца – недостаточное количество; старые, коагулированные, гемолизированные образцы; использование гепарина в качестве антикоагулянта4.
Стабильность образца – образцы крови, продукт поражения, CSF, моча, суставная жидкость стабильны в течение 48 часов при температуре 2-4 ° C до экстракции нуклеиновой кислоты4.
Метод – ПЦР Light-Cycler в режиме реального времени: реакция цепной полимеризации с детекцией накопленного продукта ПЦР в режиме реального времени путем измерения испускаемой флуоресценции (качественный тест) 4.
Справочные значения
Боррелии – ДНК: необнаружимые4.
Предел обнаружения – 276 копий / мл4.
Интерпретация результатов
Положительный результат указывает на присутствие ДНК Borrelia в собранном образце6.
Пределы и помехи
Отрицательный результат не исключает инфекции Borrelia, в то время как положительный результат вне клинического контекста не подтверждает диагноз 3; 6; 7.
ПЦР-тест следует использовать в качестве метода, который расширяет спектр исследований при болезни Лайма и не может заменить другие методы. Полученные результаты будут обязательно соотнесены с серологическими, клиническими и эпидемиологическими данными пациентов.
Список используемой литературы
1. Беттина Вильске, Барбара Дж. Б. Джонсон и Мартин Э. Шрифер. Borrelia In: Patrick R. Murray et al. – «Руководство по клинической микробиологии, 9-е изд. 2007, 62: 971-986.
2. Бетти А. Форбс, Даниэль С. Сам, Алиса С. Вайсфельд. Спирохеты. В диагностической микробиологии, двенадцатое издание, 2007, 48: 533–541.
3. Конемана, Спирохетальные инфекции. В цветном атласе и учебнике диагностической микробиологии, шестое издание, 2006, 20: 1125-1150.
4. Синевская лаборатория. Конкретные ссылки на рабочую технологию, использованную в 2010 году. Тип ссылки: Каталог.
5. Клиника Майо. Медицинские лаборатории Майо. Каталог тестов: болезнь Лайма (Borrelia burgdorferi), молекулярная диагностика, ПЦР. www.mayomedicallaboratories.com. Тип ссылки: Интернет-связь.
6. Фолькер фон Баер, Криста Либенталь, Брита Гайда, Франк-Петер Шмидт, Рудигер фон Баер и Ганс-Дитер Волк. Оценка диагностической значимости теста пролиферации лимфоцитов у пациентов с боррелиозом Лайма. В J Lab Med, 2007; 31 (3).
7. П. Рокко Ла Сала, Майкл Б. Смит. Инфекции спирохет. В «Генерической диагностике и управлении Генри лабораторными методами», двадцать первое издание, 2007, 58, 1059-1074.

SKU: BM50 Durata 10 zile produse diverse: sânge venos, biopsie leziune cutantă, lichid recoltat prin puncție articulară

Informatii generale

Boala Lyme este o afectiune multisistemica aparuta dupa muscatura de capusa infectata cu Borrelia burgdorferi. Studiul diferentelor antigenice dintre tulpinile izolate in America si Europa a permis recunoasterea implicarii in patologia umana a trei genospecii care alcatuiesc complexul Borrelia burgdorferi sensu lato: Borrelia burgdorferi sensu stricto (ce cuprinde toate tulpinile izolate in America de Nord), B. garinii si B. afzelii. In Europa circula toate cele trei genospecii, dar predomina B. garinii si B. afzelii1;2;3;6;7

Tehnicile moleculare reprezinta o alternativa in diagnosticul bolii Lyme  si se bazeaza pe amplificarea unei regiuni specifice a genomului bacterian. Acestea au aplicabilitate pentru toate  produsele  patologice recoltate in diferite stadii ale infectiei, dar se recomanda a fi utilizate doar la pacientii care au un rezultat pozitiv sau echivoc la testele serologice6.

Recomandari pentru determinarea Borrelia – ADN – diagnosticul bolii Lyme; astfel1:

Stadiul I – biopsie cutanata din eritemul migrator;

Stadiul II – biopsie cutanata din eritemul migrator diseminat sau LCR in caz de neuroborelioza;

Stadiul III – biopsie cutanata in acromodermatita cronica atrofica, lichid sinovial in artrita Lyme sau LCR in neuroborelioza.

Tehnica PCR are  o sensibilitate mai mare decat cultura in cazul prelevatelor bioptice, a sangelui si a lichidului articular, spre deosebire de LCR si urina unde rezultatele  nu au fost satisfacatoare 1;7.

Studii efectuate prin analiza PCR a lichidului articular provenit de la pacienti cu artrita Lyme au demonstrat o sensibilitate si specificitate excelenta (Nocton, 1994; Dumler, 2001). Spre deosebire de acestea, studiile efectuate pe LCR provenit de la pacienti cu neuroborelioza acuta sau cronica au demonstrat o imbunatatire minima a sensibilitatii, in comparatie cu cultura.

In tabelul de mai jos este prezentata sensibilitatea metodei PCR – ADN Borrelia,  in functie de produsul patologic examinat si de stadiul infectiei6:

PRODUS   PATOLOGIC

       SENSIBILITATE % 

Biopsie cutanata (EM si ACA)

                  50-70

LCR

Stadiul  I      60

Stadiul  II     30

Biopsie  articulara

                   50-70

Sange

                  < 10

Exista laboratoare (inclusiv Synevo) care folosesc aceasta tehnica pentru a extrage materialul  genetic al Borreliei direct din capusa care a determinat muscatura, precizand daca aceasta a fost infectata sau nu4.

Pregatire pacient – nu este necesara4.

Specimen recoltat – a) biopsie cutanata (fragment in tampon fosfat salin); b) lichid cefalorahidian recoltat prin punctie lombara; c) lichid sinovial; d) sange venos; e) capusa extrasa de la locul intepaturii4.

Recipient de recoltare – vacutainer ce contine EDTA ca anticoagulant pentru proba de sange venos si recipient steril pentru celelalte produse biologice4.

Cantitate recoltata – b) 2 mL; c) 2 mL; d) 3 mL.

Prelucrare necesara dupa recoltare – probele nu vor fi centrifugate4.

Cauze de respingere a probei – cantitate insuficienta; probe vechi, coagulate, hemolizate; folosirea heparinei ca anticoagulant4.

Stabilitate proba – probele de sange, produs din leziune, LCR, lichid articular sunt stabile 3 zile la 2-4°C4.

MetodaReal-time PCR Light-Cycler: reactie de polimerizare in lant cu detectie in timp real a produsului PCR  acumulat, prin masurarea fluorescentei emise (test calitativ)4.

Valori de referinta

Borrelia – ADN: nedetectabil4.

Limita de detectie – 276 copii/ mL4.

Interpretarea rezultatelor

Un rezultat pozitiv indica prezenta de ADN Borrelia in proba recoltata6.

Limite si interferente

Un rezultat negativ nu exclude infectia cu Borrelia, in timp ce un rezultat pozitiv in afara contextului clinic, nu confirma diagnosticul 3;6;7.

Testul PCR trebuie folosit ca o metoda care imbogateste paleta de investigatii in boala Lyme si nu poate inlocui celelalte metode. Rezultatele obtinute vor fi corelate obligatoriu cu serologia, datele clinice si epidemiologice ale pacientilor6.

 

Bibliografie

 1. Bettina Wilske, Barbara J. B. Johnson, and Martin E. Schriefer. Borrelia In:Patrick R. Murray et al. – “Manual of Clinical Microbiology, 9th ed. , 2007 , 62: 971- 986.

2. Betty A. Forbes, Daniel S. Sahm, Alice S. Weissfeld. The Spirochetes.In Diagnostic Microbiology, Twelfth Edition, 2007, 48: 533–541.

3. Koneman’s, Spirochetal infections. In Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, Sixth Edition, 2006, 20: 1125-1150.

4. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2015. Ref Type: Catalog.

5. Mayo Clinic. Mayo Medical Laboratories. Test Catalog: Lyme Disease (Borrelia burgdorferi), Molecular Detection, PCR. www.mayomedicallaboratories.com. Ref Type: Internet Communication.

6. Volker von Baehr, Christa Liebenthal, Brita Gaida, Frank- Peter Schmidt, Rudiger von Baehr und Hans-Dieter Volk. Evaluation of the diagnostic significance of the lymphocyte proliferation test in patients with Lyme borreliosis. In J Lab Med, 2007; 31(3).

7. P. Rocco La Sala, Michael B. Smith. Spirochete Infections. In Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Twenty-First Edition, 2007, 58, 1059- 1074.

< inapoi la lista

Pret 1752.00 MDL