int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Activitatea plasminogenului

Pret 370.00 MDL

Основная информация

Плазминоген является неактивным предшественником плазмина, первичного катализатора деградации фибрина. Плазминоген синтезируется в печени и присутствует в различных тканях и жидкостях, включая слюну, слезную секрецию, сперму, секрет простаты. Период полураспада в кровотоке составляет ~ 2 дня, что может быть резко сокращено в условиях, связанных с активацией фибринолитической системы. Молекула плазминогена представляет собой гликопротеин, состоящий из одной полипептидной цепи из 791 аминокислоты с относительной молекулярной массой 88 кДа с содержанием углеводов 2%. В зависимости от содержания углеводов в плазме циркулирует 2 основных варианта плазминогена в почти равных количествах, отличающихся функционально. Существует также неоднородность в первичной последовательности плазминогена, что отражает существование двух полиморфизмов с высокой заболеваемостью и нескольких других с низкой заболеваемостью в человеческой популяции. Плазминоген, выделяемый в кровь, содержит глутаминовую кислоту на N-конце, называемую Glu-плазминогеном; После протеолиза плазмином образуется деградированная форма плазминогена, наиболее распространенным из которых является лиз-плазминоген. Основным местом образования Lys-плазминогена является фибриновый сгусток, а период его полураспада короче (0,8 дня); эта конформационно модифицированная форма зимогена связывает фибрин быстрее, имеет в 2–3 раза большую авидность к клеточным рецепторам и активируется в 10–20 раз быстрее.
Глу-плазминоген преобразуется активаторами плазминогена, u-PA или t-PA, либо в плазме, либо в фибриновом сгустке, в Glu-плазмин, который содержит каталитическую триаду, специфичную для сериновых протеаз (His-Asp-Ser), и который разлагается фибриноген, фибрин и другие молекулы-мишени. Глу-плазмин может самостоятельно перевариваться, чаще всего лиз-плазмин. Плазмин ингибируется α2-антиплазмином, который обладает более эффективным действием вне фибринового сгустка.
Описан врожденный дефицит плазминогена, который может быть типом I или гипоплазминогенемией, соответственно дефицит антигена и активности, или тип II или дисплазминогенемия, с нормальным антигеном и сниженной активностью. Количественные дефекты наследуются как аутосомно-доминантное заболевание, тогда как качественные дефекты обычно наследуются аутосомно-рецессивно. Дисплазминогенемия чаще встречается у японцев, при этом единственная мутация присутствует в более чем 90% случаев. Клиническими проявлениями, связанными с гомозиготным дефицитом, являются тромбофилия и конъюнктивит, но по сравнению с другими тромбофильными состояниями риск тромбоза не так высок. Оба типа дефицита были описаны у пациентов с венозным тромбозом (особенно в Японии), но другие исследования не смогли определить, что изолированный дефицит плазминогена является фактором риска венозного тромбоза. Риск усугубляется в сочетании с другими наследственными или приобретенными причинами тромбофилии. Тяжелый дефицит плазминогена с уровнями 5-6% от нормы является редким явлением, которое проявляется как псевдомембранозное заболевание, поражающее слизистые оболочки (например, древесный конъюнктивит в глазу), но, что удивительно, не при венозном тромбозе. Значение гетерозиготного дефицита остается спорным.
Приобретенный дефицит плазминогена, который может возникать при заболеваниях печени, сепсисе, тромболитической терапии (с t-PA, u-PA или стрептокиназой), CID / системный фибринолиз, аргентинская геморрагическая лихорадка, лейкемия, возникающая в результате снижения синтеза или увеличения катаболизма, был связанные с тромботической окклюзией сосудов.

Рекомендации по тестированию: оценка пациентов с тромбозом в анамнезе и отрицательных тестов на общие факторы риска тромбоза ,оценка пациентов с древесным конъюнктивитом; оценка фибринолиза (в сочетании с другими компонентами фибринолитической системы: фибриноген, PAI-1, D-димеры); мониторинг тромболитической терапии.

Подготовка пациента – натощак. Следует избегать лечения пероральными антикоагулянтами за 2 недели до и гепарином за два дня до тестирования.

Собранный образец – венозная кровь.

Контейнер для сбора материала – вакутейнер с 0,105 М цитратом Na (цитрат натрия – соотношение крови = 1/9). Давление, оказываемое жгутом, должно находиться между значением систолического давления и диастолического давления и не должно превышать 1 минуты. Если венозная пункция не удалась, новая попытка в том же месте может быть сделана только через 10 минут.

Собранное количество образца: насколько позволяет вакуум.Чтобы предотвратить частичную коагуляцию образца, правильное смешивание крови с антикоагулянтом будет обеспечиваться инверсионными движениями пробирки.

Обработка, необходимая после сбора материала: образец будет центрифугирован в течение 15 минут при 2500, сразу же после отделения плазмы и замораживания; образцы, собранные вне лаборатории, будут транспортироваться в контейнер, предназначенный для замороженных образцов.

Причины отбраковывания образца : вакутейнер, который не заполнен; образец гемолизированной или коагулированной крови; плазма, которая не была заморожена в лаборатории.

Стабильность образца – отдельная плазма стабильна в течение 4 недель при – 20ºC.

Метод – хромогенный тест (плазма пациента смешивается с избытком стрептокиназы в присутствии фибриногена с образованием комплекса плазминоген-стрептокиназа, который превращает хромогенный субстрат; ферментативная активность комплекса не ингибируется ингибиторами плазмы) .

Контрольные значения – 80,2-132,5% 4.

Интерпретация результатов
Этот тест идентифицирует оба типа I и II дефицита плазминогена.
Наследственный дефицит очень редок. Снижение активности плазминогена может представлять врожденный дефицит, если можно исключить приобретенный дефицит, который встречается гораздо чаще.

Пределы и ограничения
Уровень плазминогена низок при рождении, ~ 50% от уровня взрослого, даже ниже у недоношенных детей и достигает уровня взрослого через 6 месяцев. Значения могут заметно возрасти во втором и третьем триместрах беременности.

SKU: HE56 Durata 28 zile sânge venos

Informaţii generale

Plasminogenul este precursorul inactiv al plasminei, catalizatorul primar al degradării fibrinei. Plasminogenul este sintetizat în ficat şi este prezent în diferite ţesuturi şi fluide, incluzând saliva, secreţia lacrimală, lichidul seminal, secreţia prostatică. Timpul de înjumătăţire în circulaţie este de ~2 zile, acesta putându-se scurta dramatic în condiţii asociate cu activarea sistemului fibrinolitic. Molecula de plasminogen este o glicoproteină formată dintr-un singur lanţ polipeptidic de 791 aminoacizi, cu o greutate moleculară relativă de 88kD, cu un conţinut carbohidrat de 2%. In funcţie de conţinutul de carbohidrat, în plasmă circulă 2 variante majore de plasminogen în cantităţi aproape egale, diferite funcţional. De asemenea există o heterogenitate în secvenţa primară a plasminogenului, reflectand existenţa a două polimorfisme cu incidenţă crescută şi a altor câteva cu incidenţă scăzută în populaţia umană. Plasminogenul secretat în sânge are un acid glutamic la capătul N-terminal, fiind denumit Glu-plasminogen; în urma proteolizei de către plasmină în unul din mai multe situsuri posibile rezultă o forma degradată de plasminogen, produsul cel mai frecvent fiind Lys-plasminogen. Situsul primar de formare a Lys-plasminogen este cheagul de fibrină, iar timpul său de înjumătăţire este mai scurt (0.8 zile); această formă modificată conformaţional a zimogenului leagă mai rapid fibrina, prezintă o aviditate de 2-3 ori mai mare pentru receptorii celulari şi este activată de 10-20 ori mai rapid. Molecula de plasminogen conţine 5 domenii kringle (K1-K5), de 78-80 aminoacizi, domeniile K1 şi K4 conţinand situsurile care reglează legarea plasminogenului la fibrina, α2-antiplasmina, glicoproteine bogate în histidină, kininogeni, trombospondină şi receptori celulari de suprafaţă; aceste situsuri leagă reziduuri de lizină de la nivelul moleculelor ţintă.

Glu-plasminogenul este convertit de către activatorii plasminogenului, u-PA sau t-PA, fie în plasmă sau la nivelul cheagului de fibrină, în Glu-plasmină, care conţine triada catalitică specifică serin proteazelor (His-Asp-Ser) şi care degradează fibrinogenul, fibrina şi alte molecule ţintă. Glu-plasmina se poate autodigera, cel mai frecvent la Lys-plasmina. Plasmina este inhibată de către α2-antiplasmina care are o acţiune mai eficientă în afara cheagului de fibrină1;3.

A fost descrisă deficienţa congenitală a plasminogenului, ce poate fi de tipul I sau hipoplasminogenemia, respectiv deficienţa antigenului şi activităţii, ori tipul II sau displasminogenemia, cu antigen normal şi activitate redusă. Deficienţele cantitative sunt moştenite ca o boală autosomal dominantă, în timp ce defectele calitative sunt de obicei moştenite autosomal recesiv. Displasminogenemia este mai comună la japonezi, cu o singură mutaţie prezentă în peste 90% din cazuri2. Manifestările clinice asociate cu deficienţă homozigotă sunt trombofilia şi conjunctivita lemnoasă, dar comparativ cu alte condiţii trombofilice riscul de tromboză nu este atât de mare1;3;6. Ambele tipuri de deficienţă au fost descrise la pacienţi cu tromboză venoasă (în particular în Japonia), dar alte studii nu au putut determina faptul că deficienţa izolată de plasminogen este un factor de risc pentru tromboza venoasă. Riscul este agravat când se combină cu alte cauze moştenie sau dobândite de trombofilie6. Deficienţa severă de plasminogen cu nivele de 5-6% din normal este o entitate rară care se manifestă ca o boală pseudomembranoasă afectând membranele mucoase (de ex. conjunctivita lemnoasă la nivelul ochiului), dar surprinzător nu cu tromboza venoasă7. Semnificaţia deficienţei heterozigote ramâne disputată1;5;6.

Deficienţa dobândită de plasminogen, care poate apărea în boli hepatice, sepsis, terapia trombolitică (cu t-PA, u-PA sau streptokinaza), CID/fibrinoliza sistemică, febra hemoragică argentiniană, leucemie, rezultând din scăderea sintezei sau creşterea catabolismului, a fost asociată cu ocluzii vasculare trombotice3;6.

Recomandări pentru efectuarea testelor – evaluarea pacienţilor cu istoric de tromboză şi cu teste negative pentru factorii de risc trombotic comuni; evaluarea pacienţilor cu conjunctivită lemnoasă; evaluarea fibrinolizei (în combinaţie cu alte componente ale sistemului fibrinolitic: fibrinogen, PAI-1, D-dimeri); monitorizarea terapiei trombolitice5;6.

Pregătire pacient à jeun (pe nemâncate)4. Se va evita tratamentul cu anticoagulante orale cu 2 săptămâni înainte, iar cu heparina cu doua zile înaintea testării; nu se va recolta de pe un cateter heparinizat5.

Specimen recoltat sânge venos4.

Recipient de recoltare – vacutainer cu citrat de Na 0.105M (raport citrat de sodiu – sânge=1/9). Presiunea realizată de garou trebuie să fie între valoarea presiunii sistolice şi cea a presiunii diastolice şi nu trebuie să depăşească 1 minut. Dacă puncţia venoasă a eşuat, o nouă tentativă pe aceeaşi venă nu se poate face decât după 10 minute4.

Cantitate recoltată – cât permite vacuumul; pentru a preveni coagularea parţială a probei se va asigura amestecul corect al sângelui cu anticoagulantul, prin mişcări de inversiune a tubului4.

Prelucrare necesară după recoltare – proba va fi centrifugată 15 minute la 2500g, urmată imediat de separarea plasmei şi congelarea acesteia; probele recoltate în afara laboratorului vor fi transportate în recipientul destinat probelor congelate4.

Cauze de respingere a probei vacutainer care nu este plin; proba de sânge hemolizată sau coagulată; plasma care nu a ajuns congelată la laborator4.

Stabilitate probă – plasma separată este stabilă 4 săptămâni la  – 20ºC.4 

Metodătest cromogenic (plasma pacientului este mixată cu un exces de streptokinaza în prezenţa fibrinogenului cu formarea complexului plasminogen-streptokinază care converteşte un substrat cromogenic; activitatea enzimatică a complexului nu este inhibată de inhibitorii plasmatici).5,6

Valori de referinţă – 80.2-132.5%4.

Interpretarea rezultatelor

Acest test identifică ambele tipuri, I şi II, de deficienţă a plasminogenului.

Deficienţa ereditară este foarte rară; o reducere a activităţii plasminogenului poate reprezenta o deficienţă congenitală, dacă poate fi exclusă deficienţa dobândită, care este mult mai frecventă6.

Limite şi intreferenţe

Nivelul de plasminogen este scăzut la naştere, ~50% din nivelul de la adult, chiar mai mici la prematuri, şi atinge nivelul de la adult la 6 luni4;5. Valorile pot creşte marcat în trimestrele II şi III de sarcină5.

 

Bibliografie

1. Brummel-Ziedins K, Orfeo T, et al. “Blood Coagulation and Fibrinolysis”. In Wintrobe`s Clinical Hematology, Greer J, Foerster J, Lukens J, Rodgers G, Pareskevas F, Glader B, 11th ed, Lippincott Williams & Wilkins, 2004, 573-5.
2. Deitcher S, Rodgers G. „Thrombosis and Antithrombotic Therapy”. In Wintrobe`s Clinical Hematology, Greer J, Foerster J, Lukens J, Rodgers G, Pareskevas F, Glader B, 11th ed, Lippincott Williams & Wilkins, 2004, 1476.
3. Hajjar K, Francis C. „Fibrinolysis and Thrombolysis”. In Williams Hematology, Lichtman M, Beutler E, Kipps T, Seligsohn U, Kaushansky K, Prchal J., 7th ed, McGraw-Hill Medical, 2006, 2089-97.
4. Laborator Synevo. Referinţele specifice tehnologiei de lucru utilizate, 2010. Ref Type: Catalog.
5. Laboratory Corporation of America. Directory of Services and Interpretive Guide. Plasminogen Activity. www.labcorp.com. 2010. Ref Type: Internet Communication.
6. Mayo Clinic, Mayo Medical Laboratories. Reference Laboratory Services for Health Care Organizations. Plasminogen Activity, Plasma. www.mayomedicallaboratories.com. 2010. Ref Type: Internet Communication.
7. Seligsohn U, Griffin J. „Hereditary Thrombophilia”. In Williams Hematology, Lichtman M, Beutler E, Kipps T, Seligsohn U, Kaushansky K, Prchal J., 7th ed, McGraw-Hill Medical, 2006, 1990.
< inapoi la lista

Pret 370.00 MDL