int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Cancer colorectal non-polipozic ereditar tip 1(HNPCC)-mutatii MSH2

Pret 29720.00 MDL

Синдром наследственного неполипозного колоректального рака (HNPCC), также известный как синдром Линча, основан на генетической предрасположенности к развитию колоректального рака, рака матки (эндометрия) или других типов рака.
HNPCC ответственен за 1-3% случаев рака толстой кишки и 0,8-1,4% случаев рака эндометрия; имеет заболеваемость 1 на 1000 в общей популяции. HNPCC характеризуется 80% -ным риском развития колоректального рака в возрасте 70 лет и 60% -ным раком эндометрия у женщин. Этот синдром включает злокачественные опухоли с множественными локализациями: толстой кишки, прямой кишки, эндометрия, желудка, яичника, поджелудочной железы, мочеточника, почечной лоханки, желчного протока, головного мозга (глиобластома), кожи (сальная аденома) или тонкой кишки.
HNPCC является аутосомно-доминантным заболеванием, вызванным мутацией в зародышевой линии в генах, которые участвуют в исправлении ошибок в генетическом материале в процессе репликации – MMR (MMR – «несоответствующие гены восстановления»). Функция MMR состоит в устранении ошибок спаривания оснований и оснований и петель вставки-делеции, которые появляются в результате явления «скольжения» ДНК-полимеразы во время репликации ДНК. Существенным следствием изменения функции этих генов является появление нуклеотидных замен (например, G-T) или вставка или удаление коротких повторяющихся единиц (тип CA) из состава микросателлитов, сегменты ДНК, состоящие из последовательностей, содержащих 1-5 пар нуклеотидов. повторяется в тандеме и находится в кодирующих или некодирующих областях некоторых генов), это явление называется микросателлитной нестабильностью – MSI.
Исследователи определили 7 различных генов MMR, которые вызывают рак неполипозной кишки:
hMLH1 на полосе 3р22;
hMSH2 и hMSH6 в полосе 2p16;
hPMS1 на полосе 3р32;
hPMS2 в полосе 7q22;
hMSH3 в полосе 5q14.1;
EXO1 на 1q43 band1; 3; 5: 6; 7.
Генетические аномалии в генах MLH1 и MSH2 представляют почти 90% мутаций MMR в HNNPC, 7-10% связаны с повреждением гена MSH6, и <2% являются мутациями в гене PMS2.
Генетические аномалии в генах PMS1, MSH3, EXO1, TGFβR2 не тестируются, их клиническое значение еще не определено.
Функция этих генов может быть нарушена делециями, вставками или большими геномными перестройками.
Мутация, которая инактивирует ген MMR, приводит к накоплению клеточных мутаций и значительно увеличивает вероятность злокачественной трансформации.
Поскольку проникновение мутаций является неполным, эти генетические аномалии предрасполагают людей к раку, но не у всех, кто их наследует, развиваются опухоли.
Мутации часто наследуются, но могут возникать и в новом поколении. Эти пациенты часто идентифицируются только после развития раннего рака толстой кишки. Передача является аутосомно-доминантной, что означает, что 50% детей больного человека наследуют мутантный аллель.
Нет четко определенных генотип-фенотипических корреляций, хотя мутации MSH2, по-видимому, чаще связаны с экстраколониальными проявлениями, чем мутации MLH1. Мутации MSH6 также чаще всего связаны с поздним началом, повышенной частотой возникновения рака эндометрия и меньшей степенью нестабильности микросателлитов1; 3; 5: 6; 7.
У людей с синдромом Мьюир-Торре чаще встречаются мутации в гене MSH2, а мутации в гене PMS2 чаще встречаются в семьях с синдромом Турко.
Ген MLH1 состоит из 19 экзонов, которые кодируют белок из 756 аминокислот. На этом уровне было зарегистрировано более 200 различных мутаций.
Продукт гена MLH1, белок Mlh, образует гетеродимеры с белками hMLH3, hPMS2 или hPMS1, образованные таким образом комплексы играют роль в координации присоединения других полипептидов, участвующих в процессе репарации ДНК, которые включают геликазы, белок, кодируемый EXO1, антиген пролиферации ядер. (PCNA), белок, который связывает одноцепочечную ДНК (RPA) и ДНК-полимеразу.
Более 170 мутаций были описаны в гене MSH2, который имеет 16 экзонов и кодирует 934 аминокислотных белка. Высокая доля повторяющихся областей Alu может способствовать более высокой частоте геномных перестроек в MSH2, чем в MLH1.
Чтобы распознать ошибки, белок MSH2 образует гетеродимер с MSH6 (в случае неправильных пар оснований-оснований) или с MSH3 (в случае петель вставки-делеции). Эти белковые комплексы распознают и связываются с любой неправильной нуклеотидной последовательностью, которая может возникнуть во время репликации ДНК. Присоединение комплекса вызывает рекрутирование других белков, которые обрезают неправильную дочернюю последовательность и заменяют ее на правильную, используя родительский компонент в качестве матрицы.
Ген MSH6 состоит из 10 экзонов и кодирует 1360 аминокислотных белков. Более 30 мутаций были идентифицированы в MSH6. Белок Msh6 также участвует в исправлении ошибок репликации ДНК, но не является абсолютно необходимым в процессе исправления генетического материала. В отсутствие Msh6 белок Msh3 может частично заменять свою функцию и может быть защитным фактором против накопления ошибок репликации.
Мутации в гене PMS2, состоящем из 15 экзонов, редки. Это пунктуальные мутации или большие перестановки. Продукт гена PMS2, аминокислотный белок 862, димеризуется с белком Mlh1 с образованием комплекса, который играет роль в присоединении других белков, участвующих в процессе репарации ДНК1; 3; 5: 6; 7.
Клинический диагноз наследственного не полипозного рака толстой кишки может быть поставлен на основании амстердамских клинических критериев или генетического тестирования.
В 1990 году, после конференции в Амстердаме, Международная совместная группа (ICG) разработала клинические критерии для выявления пациентов с риском развития HNPCC. Эти критерии, теперь известные как Амстердамские критерии, основаны на определении точного семейного анамнеза колоректального рака.
Амстердамские критерии (Амстердам I)
-3 или более члена семьи с определенным диагнозом HNPCC, один из которых является родственником первой степени двух других;
-2 последовательных поколения;
– 1 или более человек с диагнозом злокачественные опухоли толстой кишки в возрасте до 50 лет.
В 1999 году критерии Амстердама I были пересмотрены с учетом экстраколониального рака, и они известны как критерии Амстердама II.
Измененные Амстердамские критерии (Амстердам II)
-3 или более членов семьи, у которых диагностированы HNPCC-ассоциированные раковые заболевания (колоректальный, эндометриальный, тонкий кишечник, мочеточник или почка, желудок, таз яичника, опухоли головного мозга – синдром Туркота – и аденомы сальной железы или кератоакантомы – синдром Мьюра Торре), один из которых является родственником первой степени двух других;
-привязанность должна включать не менее двух поколений;
-1 или более человек с диагнозом злокачественные опухоли толстой кишки в возрасте до 50 лет;
-семейный аденоматозный полипоз должен быть исключен3; 5; 7.
Точность диагностики на основе клинических критериев зависит от точности данных, предоставленных семейным анамнезом; проверка гистопатологических результатов бюллетеней и выписки билетов из хирургических отделений имеют важное значение для документирования случаев. Сообщалось о чувствительности 61% и специфичности 67% амстердамских критериев для выявления мутации MMR в генах MSH2 и MLH1.
Более поздние исследования, сравнивающие риск рака в семьях, отвечающих амстердамским критериям и у которых опухоли выражают микросателлитную нестабильность, с опухолями в семье, отвечающей амстердамским критериям, но не показывающими MSI, позволяют предположить, что эти критерии скорее идентифицируют семьи с различными этиологиями. генетический, а не только HNPCC. Таким образом, критерии, основанные исключительно на семейном анамнезе, могут не проводить различия между случаями, вызванными мутациями MMR, и случаями, возникающими в результате еще не идентифицированных предрасполагающих генов. По этой причине включение данных молекулярного исследования (исследование MSI в опухолевой ткани и идентификация мутаций MMR) необходимо для установления правильного диагноза HNPCC.
В качестве диагностической стратегии рекомендуется сначала проверить MSI в опухолях, после чего в случае положительного результата мы прибегнем к идентификации мутации MMR на уровне зародышевой линии.
Критерии Bethesda были разработаны (1997) для выявления лиц, опухоли которых являются кандидатами на тестирование MSI. Сообщалось, что эти критерии имеют чувствительность 94%, но их специфичность низкая (25%); Согласно исследованиям, изменение этих критериев путем включения пациентов с диагнозом рак толстой кишки в возрасте до 50 лет может повысить специфичность.
Пересмотренные критерии Bethesda (2004):
Колоректальный рак диагностируется у пациента моложе 50 лет;
Наличие синхронного или метахронного колоректального рака или других опухолей, связанных с HNPCC, независимо от возраста;
Колоректальный рак с положительной гистологией MSI, диагностированной у пациента в возрасте до 60 лет;
Колоректальный рак, диагностированный у одного или нескольких родственников первой степени, пораженных опухолями, ассоциированными с HNPCC, с раком, диагностированным в возрасте до 50 лет;
Колоректальный рак диагностируется у 2 или более родственников первой или второй степени, независимо от возраста3; 5; 7.
Раки толстой кишки, которые развиваются при HNPCC, отличаются от спорадических по нескольким признакам: начало наступает раньше (средний возраст составляет менее 45 лет), преобладающее расположение в правом полушарике (60-70% случаев), повышенный риск развитие одновременного множественного рака толстой кишки (первичные опухоли, диагностированные в течение 6 месяцев друг от друга) или метахронного (первичные опухоли, которые появляются с интервалом более 6 месяцев), увеличение частоты коллоидного рака с обильным лимфоцитарным инфильтратом , лучший прогноз.
У индивидуума с мутацией HNPCC, который не подвергается частичной или полной колэктомии после первого образования опухоли, диагностированного как злокачественное, риск развития метахронной опухоли составляет около 30-40% в течение 10 лет и 50% – через 15 лет. , В общей популяции риск составляет 3% через 10 лет и 5% через 15 лет3; 7.
Женщины с HNPCC имеют риск развития рака эндометрия на 20-60%, при этом средний возраст диагноза заболевания составляет 46-62 года. Как и в случае рака толстой кишки, выживаемость женщин с опухолями эндометрия хорошая. Из женщин с HNPCC, у которых развивается рак толстой кишки и эндометрия, около 50% сначала диагностируются с опухолями эндометрия.
При HNPCC средний возраст диагностики рака желудка составляет 56 лет, при этом наиболее распространенной гистопатологической формой является аденокарцинома кишечника.
Для рака яичников, ассоциированного с HNPCC, средний возраст при постановке диагноза составляет 42,5 года, причем приблизительно 30% случаев подтверждены до достижения возраста 40 лет.
Опухоли мочевыводящих путей, специфически связанные с HNPCC, представляют собой преходящие карциномы мочеточника и почечной лоханки.
Наиболее распространенным типом злокачественной опухоли центральной нервной системы является глиобластома.
Рак молочной железы, гортани или гематологический рак также были зарегистрированы в семьях с HNPCC, но не было выявлено четких связей между этими опухолями.
Синдром Турко считается расстройством, которое клинически характеризуется множественными колоректальными аденомами и первичными опухолями головного мозга. В 1995 году Гамильтон и др. Продемонстрировали, что эта связь может быть результатом по крайней мере двух различных типов мутаций: мутации в гене АРС (что составляет две трети случаев и отвечает за семейный аденоматозный полипоз) и мутации в гене PMS2, или MLH1 (представляющий треть случаев). Медуллобластома чаще связана с мутациями APC, а глиобластома связана с мутациями гена MMR.
Синдром Муир-Торре, вариант HNPCC, вызван мутацией в генах MSH2 и MLH1. Он составляет менее 1% всех случаев наследственного колоректального рака и характеризуется типичными проявлениями HNPCC, связанными с опухолями сальных желез (сальные аденомы, сальные эпителиомы, сальные карциномы) и кератоакантомами.
Люди, гомозиготные по мутациям в генах MLH1, MSH2 и PMS2, имеют ранние формы рака толстой кишки, которые появились до второго десятилетия жизни, а также развивают гематологические или опухоли головного мозга3; 7.
В целом, генетическое тестирование должно проводиться, когда соблюдены клинические критерии неполипозного наследственного колоректального рака. Общепринято, что пациенты, которые соответствуют критериям Амстердама или Бетесды, являются идеальными кандидатами для молекулярного тестирования. Однако 30% потенциальных носителей генетических аномалий, которые соответствуют амстердамским критериям, не идентифицированы с мутациями.
Поскольку 95% случаев рака толстой кишки, развившихся в HNPCC, имеют нестабильность микросателлитов, тестирование этого фенотипа должно проводиться до генетического тестирования, чтобы идентифицировать мутации гена MMR у всех пациентов, которые соответствуют клиническим диагностическим критериям3; 7.
Если клинический и семейный анамнез не может определить, от какого родителя была унаследована мутация в гене MMR, молекулярное тестирование должно быть выполнено для обоих родителей.
Для тестирования бессимптомных взрослых на риск, тесты для выявления мутаций в генах MLH1, MSH2, MSH6 и PMS2 доступны в нашей лаборатории. Такие тесты бесполезны для оценки возраста начала, тяжести, типа симптомов или прогрессирования заболевания.
Тестирование бессимптомных лиц, подвергающихся риску, проводится только на людях, у которых член семьи затронут мутацией, вызывающей заболевание, и обычно включает в себя предтестовые интервью, в которых требуются причины для тестирования, индивидуальные знания пациента о форме с раннее начало, возможное влияние положительных или отрицательных результатов теста. Желающим пройти тестирование следует сообщать о любых проблемах, с которыми они могут столкнуться, связанных со здоровьем, инвалидностью, образованием, дискриминацией, социальным и семейным взаимодействием.
Генетическое тестирование на HNPCC обычно не рекомендуется для людей в возрасте до 18 лет, если только возраст члена семьи, у которого диагностирован рак, не был меньше 28 лет. Поскольку есть люди с HNPCC, диагностированным в очень молодом возрасте, рекомендуется начинать скрининг за 10 лет до самого раннего возраста возникновения рака в этой семье. Таким образом, в некоторых семьях скрининг может начинаться до 18 лет.
Пренатальная диагностика у беременных женщин с высоким риском мутаций в генах MLH1, MSH2, MSH6 и PMS2 возможна путем анализа ДНК, извлеченной из эмбриональных клеток, полученных с помощью амниоцентеза, обычно выполняемых приблизительно через 15-18 недель беременности или биопсии ворсин хориона, в около 10-12 недель беременности. Вызывающие заболевание мутации должны быть выявлены до пренатального тестирования у затронутого члена семьи7.
Собранный образец – венозная кровь4.
Контейнер для сбора урожая – вакуумный контейнер, содержащий ЭДТА в качестве антикоагулянта4.
Собранное количество – 5 мл крови4.
Причины отторжения образца – использование гепарина в качестве антикоагулянта; коагулированные или гемолизированные образцы4.
Стабильность образца – 7 дней при 2-8ºC4.
Метод – секвенирование генов MLH1, MSH2, MSH6 и PMS24.
Отчетность и интерпретация результатов
Мутации, обнаруженные в генах MLH1, MSH2, MSH6 и PMS2 и соответствующем генотипе 4, будут сообщены.
HNPCC передается аутосомно-доминантно. Каждый ребенок человека с раком толстой кишки имеет 50% риск наследования мутации.
У большинства людей мутация, предрасполагающая к наследственному неполипозному раку толстой кишки, наследуется от одного из родителей.
Из-за увеличения проникновения мутаций, вызывающих заболевание, бессимптомные люди, несущие эти мутации, будут включены в программу первичной профилактики или периодического мониторинга4.
Рекомендуется обследовать людей в этих семьях на различные виды рака. Таким образом, колоноскопию следует начинать через 20-25 лет и проводить каждые 1-3 года. Скрининг рака эндометрия состоит из цитологического анализа аспиратов эндометрия или трансвагинальной ультрасонографии и должен начинаться через 25-35 лет с повторением каждые 1-2 года. Скрининг на рак желудка или мочевыводящих путей следует рекомендовать только в семьях, у которых были такие случаи, и состоит из гастроскопии, УЗИ и анализов мочи, проводимых каждые 1-2 года с 30-35 лет. Вариант профилактической колэктомии следует рассматривать при выявлении аденом толстой кишки или при диагностировании первого рака толстой кишки. Кроме того, двусторонняя гистеросальпингооофорэктомия может быть выполнена профилактически, особенно потому, что риск развития рака эндометрия у этих женщин превышает риск развития рака толстой кишки7
Список используемой литературы
1. Фэй Кастринос и Сапна Сингал. Недавно выявленная предрасположенность к раку толстой кишки: мутации MYH и MSH6. В Семин Онкол. Октябрь 2007 года; 34 (5): 418–424.
2. И. Рогоз, Сюзана Рогоз, Амелия Добреску, Ф. Бурада Роль динамических мутаций в патогенезе наследственных заболеваний, In Craiova Medicala, том 8, № 1, 2006.
3. Хуан Карлос Муньос, Луи Р. Ламбиас, Наследственный колоректальный рак, www.emedicine.medscape.com, Тип ссылки: Интернет-коммуникации.
4. Синевская лаборатория. Конкретные ссылки на рабочую технологию, использованную в 2010 году. Тип ссылки: Каталог.
5. Квест Диагностика. Колоректальный рак. Лабораторное обеспечение диагностики и управления. Клинический Фокус. www.questdiagnostics.com. Тип ссылки: Интернет-связь.
6. Р. Дж. Митчелл, С. М. Фаррингтон, М. Г. Данлоп и Х. Кэмпбелл. Несовпадающие гены восстановления hMLH1 и hMSH2 и колоректальный рак: огромный обзор. В Am J Epidemiol; 156: 885–902, 2002.
7. Венди Колманн, Стивен Б. Грубер, Наследственный не полипозный рак толстой кишки, Gene Reviews, 2006. www.ncbi.nlm.nih.gov. Тип ссылки: Интернет-связь.

SKU: BM69 Durata 28 zile sânge venos

Informatii generale si recomandari pentru testarea genetica

Sindromul cancerului colorectal nonpolipozic ereditar (HNPCC), cunoscut si sub denumirea de sindromul Lynch, are la baza o predispozitie genetica de a dezvolta cancer colorectal, uterin (de endometru) sau alte tipuri de neoplazii.

HNPCC este responsabil de 1-3% din cancerele de colon si 0.8-1.4% din cancerele de endometru; are o incidenta de 1 la 1000 in populatia generala. HNPCC este caracterizat printr-un risc cumulat de 80% de dezvoltare a cancerului colorectal pana la varsta de 70 ani si de 60% pentru cancerul endometrial la femei. In acest sindrom sunt incluse cancere cu localizari multiple: colon, rect, endometru, stomac, ovar, pancreas, ureter, pelvis renal, canal biliar, creier (glioblastom), piele (adenom sebaceu) sau intestin subtire1;2;3;5:6;7.

Cancer

Riscul in populatia generala

HNPCC 

Risc

Varsta medie de debut

Colon

5.5%

80%

44 ani

Endometru

2.7%

20%-60%

46 ani

Stomac

<1%

11%-19%

56 ani

Ovar

1.6%

9%-12%

42.5 ani

Tract hepatobiliar

<1%

2%-7%

necunoscuta

Tract urinar

<1%

4%-5%

~55 ani

Intestine subtire

<1%

1%-4%

49 ani

Sistem nervos central

<1%

1%-3%

~50 ani

HNPCC este o afectiune autozomal dominanta cauzata de o mutatie a liniei germinative la nivelul genelor care intervin in repararea erorilor aparute la nivelul materialului genetic in timpul procesului de replicare – MMR (MMR – “mismatch repair genes”). Functia MMR consta in eliminarea greselilor de imperechere baza-baza si a buclelor de insertie-deletie care apar ca urmare a fenomenului de “derapaj” a ADN-polimerazei in cursul replicarii ADN. Alterarea functiei acestor gene are drept consecinta esentiala aparitia unor substitutii nucleotidice (de exemplu G – T) ori insertia sau deletia unor scurte unitati repetitive (tip CA) din constitutia microsatelitilor, (segmente de ADN alcatuite din secvente care cuprind 1-5 perechi de nucleotide, repetate in tandem si localizate in regiunile codificatoare sau necodificatoare ale unor gene), fenomen denumit instabilitatea microsatelitilor – MSI.

Cercetatorii au identificat 7 gene distincte MMR, care determina aparitia cancerului nonpolipozic colonic:

  • hMLH1 pe banda 3p22;
  • hMSH2 si hMSH6 pe banda 2p16;
  • hPMS1 pe banda 3p32;
  • hPMS2 pe banda 7q22;
  • hMSH3 pe banda 5q14.1;
  • EXO1 pe 1q43 banda1;3;5:6;7.

Gena

Cromozomul

Frecventa

MSH2

2p16

45-50%

MLH1

3p22.3/A>

20%

MSH6

2p16

7-10%

PMS2

7p22.1

< 2%

PMS1

2q32.2

Rara

MSH3

5q14.1

Rara

EXO1

1q43

Rara

Anomaliile genetice de la nivelul genelor MLH1 si MSH2 reprezinta aproape 90% din mutatiile MMR din HNNPC, 7-10% implica afectarea genei MSH6, iar <2% sunt mutatii in gena PMS2.

Anomaliile genetice aparute in genele PMS1, MSH3, EXO1, TGFβR2 nu se testeaza, semnificatia lor clinica nefiind inca determinata.

Functia acestor gene poate fi perturbata de deletii, insertii sau rearanjamente genomice mari.

O mutatie care inactiveaza gena MMR duce la acumularea de mutatii celulare si creste foarte mult probabilitatea de transformare maligna.

Deoarece penetranta mutatiilor este incompleta, aceste anomalii genetice predispun indivizii la cancer, dar nu toti cei care le mostenesc dezvolta tumori.

Mutatiile sunt adesea mostenite, dar pot aparea, de asemenea, de novo intr-o generatie. Acesti pacienti sunt deseori identificati doar dupa ce dezvolta timpuriu cancer de colon. Transmiterea este autozomal dominanta, ceea ce inseamna ca 50% din copiii unei persoane afectate mostenesc o alela mutanta.

Nu exista corelatii genotip-fenotip bine definite, desi mutatiile MSH2 par a fi asociate mai frecvent cu manifestarile extracolonice decat mutatiile MLH1. De asemenea mutatiile MSH6 implica cel mai adesea un debut tardiv, o incidenta crescuta a cancerelor endometriale si un grad mai redus de instabilitate a microsatelitilor1;3;5:6;7.

Persoanele cu sindrom Muir-Torre prezinta mai des mutatii in gena MSH2, iar mutatiile in gena PMS2 sunt mai frecvent prezente in familiile cu sindrom Turcot.

Gena MLH1 este formata din 19 exoni, care codifica o proteina de 756 aminoacizi. Peste 200 mutatii diferite au fost raportate la acest nivel.

Produsul genei MLH1, proteina Mlh, formeaza heterodimeri cu proteinele hMLH3, hPMS2 sau hPMS1, complexele astfel alcatuite avand rol in coordonarea atasarii altor polipeptide implicate in procesul de reparare a ADN-ului, care includ helicazele, proteina codificata de EXO1, antigenul nuclear de proliferare celulara (PCNA), proteina care leaga ADN-ul monocatenar (RPA) si ADN-polimeraza.

La nivelul genei MSH2, care are in componenta 16 exoni si codifica o proteina de 934 aminoacizi, au fost descrise peste 170 mutatii. Proportia mare a regiunilor Alu repetitive poate contribui la o rata mai mare de rearanjamente genomice in MSH2 decat in MLH1.

Pentru recunoasterea erorilor proteina MSH2 formeaza un heterodimer cu MSH6 (in cazul imperecherilor gresite baza-baza) sau cu MSH3 (in situatia aparitiei unor bucle de insertie-deletie). Aceste complexe de proteine recunosc si se leaga de orice secventa nucleotidica gresita care ar putea aparea in timpul replicarii ADN-ului. Atasarea complexului determina recrutarea altor proteine care vor taia secventa fiica incorecta si a vor inlocui cu una corecta, folosind componenta parentala ca sablon.

Gena MSH6 este alcatuita din 10 exoni si codifica o proteina de 1360 aminoacizi. Peste 30 mutatii au fost identificate in MSH6. Proteina Msh6 este de asemenea implicata in repararea greselilor aparute in replicarea ADN-ului, dar nu este absolut necesara procesului de corectare a materialului genetic. In lipsa Msh6, proteina Msh3 poate inlocui partial functia acesteia si poate reprezenta un factor de protectie impotriva acumularii de erori de replicare.

Mutatiile la nivelul genei PMS2, alcatuita din 15 exoni, sunt rare. Acestea sunt reprezentate de mutatii punctiforme sau  rearanjamente mari. Produsul genei PMS2, o proteina de 862 aminoacizi, dimerizeaza cu proteina Mlh1 formand un complex ce are rol in atasarea altor proteine implicate in procesul de reparare a ADN-ului1;3;5:6;7.

Diagnosticul clinic al cancerului nonpolipozic ereditar al colonului se poate face pe baza criteriilor clinice Amsterdam sau prin testare genetica. 

In 1990, in urma unei conferinte la Amsterdam, International Collaborative Group (ICG) au elaborat criterii clinice pentru identificarea pacientiilor cu risc de a dezvolta HNPCC. Aceste criterii, cunoscute acum drept criteriile Amsterdam, au la baza identificarea unui istoric familial exact de cancer colorectal.

Criteriile Amsterdam (Amsterdam I)

-3 sau mai multi membri ai unei familii cu diagnostic de certitudine de HNPCC, dintre care unul este ruda de gradul I cu ceilalti doi;

-2 generatii succesive afectate;

-1 sau mai multe persoane diagnosticate cu tumori maligne de colon inainte de varsta de 50 ani.

In 1999, criteriile Amsterdam I au fost revizuite pentru a include forme de cancer extracolonic si acestea sunt cunoscute sub numele de criteriile Amsterdam II.

Criteriile Amsterdam modificate (Amsterdam II)

-3 sau mai multi membri ai unei familii diagnosticati cu cancere asociate cu HNPCC (colorectale, endometriale, de intestin subtire, ureter sau pelvis renal, gastric, ovarian, tumori cerebrale – sindromul Turcot – si adenoame ale glandei sebacee sau keratoacantoame – sindromul Muir-Torre), dintre care unul este ruda de gradul I cu ceilalti doi;

-afectarea trebuie sa includa cel putin doua generatii;

-1 sau mai multe persoane diagnosticate cu tumori maligne de colon inainte de varsta 50 ani;

-polipoza adenomatoasa familiala trebuie exclusa3;5;7.

Acuratetetea diagnosticului bazat pe criteriile clinice depinde de acuratetea datelor furnizate de anamneza familiala; verificarea buletinelor de rezultate histopatologice si a biletelor de externare din sectiile de chirurgie sunt esentiale pentru documentarea cazurilor. Au fost raportate o sensibilitate de 61% si o specificitate de 67% a criteriilor Amsterdam in ceea ce priveste identificarea unei mutatii MMR in genele MSH2 si MLH1.

Studii mai recente care au comparat riscul de cancer in familiile care intrunesc criteriile Amsterdam si ale caror tumori exprima instabilitate a microsatelitilor cu cel din familiie care intrunesc criteriile Amsterdam dar care nu prezinta MSI sugereaza faptul ca aceste criterii identifica mai degraba familiile cu o varietate de etiologii genetice si nu doar HNPCC. Astfel, criteriile bazate numai pe istoricul familial ar putea sa nu faca distinctia intre cazurile induse de mutatii MMR si cele rezultate ca urmare a unor gene predispozante neidentificate inca. Din acest motiv, includerea datelor de examen molecular (testarea MSI in tesut tumoral si identificarea mutatiilor MMR) este necesara pentru stabilirea unui diagnostic corect de HNPCC.

Ca strategie de diagnostic, se recomanda mai intai testarea MSI in tumori, dupa care in cazul unui rezultat pozitiv se va recurge la identificarea unei mutatii MMR la nivelul liniei germinative.

Criteriile Bethesda au fost dezvoltate (1997) pentru a identifica persoanele ale caror tumori sunt candidate la testarea MSI. S-a raportat ca aceste criterii au o sensibilitate de 94%, insa  specificitatea lor este redusa (25%); modificarea acestor criterii prin includerea pacientilor diagnosticati cu cancer de colon inainte de 50 ani poate creste specificitatea, conform studiilor efectuate.

Criteriile Bethesda revizuite (2004) sunt urmatoarele:

  • Cancer colorectal diagnosticat la un pacient mai tanar de 50 ani;
  • Prezenta cancerului colorectal sincron sau metacron sau alte tumori asociate cu HNPCC, indiferent de varsta;
  • Cancerul colorectal cu o histologie MSI pozitiva diagnosticat la un pacient inainte de varsta de 60 ani;
  • Cancer colorectal diagnosticat la una sau mai multe rude de gradul I afectate de tumori asociate cu HNPCC, avand un cancer diagnosticat inainte de varsta de 50 ani;
  • Cancer colorectal diagnosticat la 2 sau mai multe rude de gradul unu sau doi, indiferent de varsta3;5;7.

Cancerele de colon care se dezvolta in cadrul HNPCC difera de cele sporadice prin mai multe caracteristici: debutul este mai precoce (varsta medie fiind mai mica de 45 ani), localizarea predominanta la nivelul hemicolonului drept (60-70% din cazuri), risc crescut de dezvoltare a unor cancere de colon multiple sincrone (tumori primare diagnosticate in termen de 6 luni una fata de cealalta) sau metacrone (tumori primare care apar la mai mult de 6 luni diferenta), frecventa crescuta a unor cancere coloide, cu infiltrat abundent limfocitar, prognostic mai bun.

Un individ cu o mutatie HNPCC care nu sufera colectomie partiala sau totala, dupa prima formatiune tumorala diagnosticata ca maligna are un risc de aproximativ 30-40% de a dezvolta o tumora metacrona in termen de 10 ani si un risc de 50% la 15 ani. In populatia generala, riscul este de 3% in 10 ani si 5% la 15 de ani3;7.

Femeile cu HNPCC au risc de 20-60% de a dezvolta cancer endometrial, varsta medie de diagnostic al bolii fiind intre 46-62 ani. La fel ca si in cazul cancerului de colon, supravietuirea femeilor cu tumori endometriale este buna. Dintre femeile cu HNPCC care dezvolta atat cancer de colon cat si cancer endometrial, aproximativ 50% sunt diagnosticate intai cu tumori endometriale.

In cadrul HNPCC, varsta medie de diagnosticare a cancerului gastric este de 56 ani, adenocarcinomul de tip intestinal fiind forma histopatologica cea mai frecvent raportata.

Pentru cancerul ovarian asociat cu HNPCC varsta medie de diagnostic este de 42.5 ani, aproximativ 30% din cazuri fiind confirmate inainte de varsta de 40 ani.

Tumorile tractului urinar asociate in mod specific cu HNPCC sunt carcinoamele de tranzitie ale ureterului si pelvisului renal.

Cel mai comun tip de afectiune maligna a sistemului nervos central este glioblastomul.

Cancerul mamar, laringian sau hematologic au fost de asemenea raportate in familiile cu HNPCC, dar nu au fost demonstrate asociatii clare intre aceste tipuri de tumori.

Sindromul Turcot este considerat o tulburare caracterizata clinic prin multiple adenoame colorectale si tumori cerebrale primare. In 1995, Hamilton et al au demonstrat ca aceasta asociere ar putea rezulta din cel putin doua tipuri distincte de mutatii: o mutatie in gena APC (care reprezinta doua treimi din cazuri si este responsabila pentru polipoza adenomatoasa familiala) si o mutatie in gena PMS2 sau MLH1 (care reprezinta o treime din cazuri). Meduloblastomul este mai frecvent asociat cu mutatii APC, in timp ce glioblastomul este asociat cu mutatiile genei MMR.

Sindromul Muir-Torre, o varianta a HNPCC, este determinat de o mutatie in genele MSH2 si MLH1. Reprezinta mai putin de 1% din toate cazurile de cancer colorectal ereditar si se caracterizeaza prin manifestari tipice de HNPCC asociate cu tumori ale glandelor sebacee (adenoame sebacee, epiteliome sebacee, carcinoame sebacee) si keratoacantoame.

Persoanele homozigote pentru mutatii in genele MLH1, MSH2, si PMS2 prezinta forme precoce de cancer de colon, aparute inainte de al doilea deceniu de viata si dezvolta de asemenea tumori hematologice sau cerebrale3;7.

In general, testarea genetica ar trebui efectuata atunci cand criteriile clinice de cancer ereditar colorectal nonpolipozic au fost indeplinite. Este general acceptat faptul ca pacientii care indeplinesc criteriile Amsterdam sau criteriile Bethesda sunt candidati ideali pentru testarea moleculara. Cu toate acestea, 30% din potentialii purtatori ai anomaliilor genetice care indeplinesc criteriile Amsterdam nu sunt identificati cu mutatii.

Deoarece 95% dintre cancerele de colon dezvoltate in cadrul HNPCC prezinta instabilitatea microsatelitilor, testarea acestui fenotip trebuie efectuata inaintea testelor genetice pentru identificarea unor mutatii ale genelor MMR la toti pacientii care intrunesc criteriile clinice de diagnostic3;7.

Daca istoricul clinic si familial nu poate identifica de la care parinte a fost mostenita mutatia in gena MMR, testarea moleculara ar trebui efectuata ambilor parinti.

Pentru testarea adultilor asimptomatici cu risc sunt disponibile in laboratorul nostru teste pentru identificarea mutatiilor la nivelul genelor MLH1, MSH2, MSH6 si PMS2. Astfel de teste nu sunt utile pentru estimarea varstei de debut, severitatii, tipului de simptome sau modalitatii de progresie a  bolii.

Testarea persoanelor asimptomatice cu risc se efectueaza doar la indivizii care au un membru al familiei afectat de o mutatie cauzatoare de boala si implica, de obicei, interviuri pre-test, in care sunt solicitate motivele testarii, sunt discutate cunostintele individuale ale pacientului despre forma cu debut precoce, posibilul impact al rezultatelor testelor pozitive sau negative. Cei care doresc testarea ar trebui sa fie consiliati cu privire la eventualele probleme pe care le pot intampina legate de sanatate, invaliditate, educatie, discriminare, interactiune sociala si familiala.

Testarea genetica pentru HNPCC nu este recomandata de rutina in cazul persoanelor cu risc inaintea varstei de 18 ani, decat in cazul in care varsta unui membru al familiei diagnosticat cu cancer a fost  mai mica de 28 ani. Deoarece exista indivizi cu HNPCC diagnosticati la varste foarte mici se recomanda ca screening-ul sa inceapa cu 10 ani inainte de cea mai frageda varsta de debut a cancerului in familia respectiva. Astfel, in unele familii screening-ul ar putea incepe inainte de varsta de 18 ani.

Diagnosticul prenatal la gravidele cu risc crescut pentru mutatii in genele MLH1, MSH2, MSH6 si PMS2 este posibil prin analiza ADN-ul extras din celule fetale obtinute prin amniocenteza, de obicei efectuata la aproximativ 15-18 saptamani de gestatie sau biopsia vilozitatilor coriale, la aproximativ 10-12 saptamani de gestatie. Mutatiile cauzatoare de boala trebuie sa fie identificate inainte de testarea prenatala la un membru afectat al familiei7.

Specimen recoltat – sange venos4.

Recipient de recoltare – vacutainer ce contine EDTA ca anticoagulant4.

Cantitate recoltata –  5 mL sange4.

Cauze de respingere a probei – folosirea heparinei ca anticoagulant; probe coagulate sau hemolizate4.

Stabilitate proba7 zile la 2-8ºC4.

Metodasecventierea genelor MSH24. 

Raportarea si interpretarea rezultatelor

Vor fi comunicate mutatiile depistate in genele MLH1, MSH2, MSH6 si PMS2 si genotipul respectiv4.

HNPCC este transmis autozomal dominant. Fiecare copil al unei persoane afectate de cancer colonic are un risc de 50% de a mosteni mutatia.

La majoritatea persoanelor o mutatie predispozanta la cancer colonic nonpolipozic ereditar este mostenita de la unul dintre parinti.

Datorita penetrantei crescute a mutatiilor cauzatoare de boala, persoanele asimptomatice purtatoare ale acestor mutatii vor fi incluse obligatoriu intr-un program de preventie primara sau de monitorizare periodica4.

Se recomanda ca persoanele din aceste familii sa beneficieze de screening pentru diverse variante de cancer. Astfel, colonoscopia trebuie inceputa la 20-25 ani si efectuata la fiecare 1-3 ani. Screening-ul pentru cancerul endometrial consta in analiza citologica a aspiratelor endometriale sau ultrasonografia transvaginala si trebuie inceput la 25-35 ani, cu repetare la fiecare 1-2 ani. Screening-ul pentru cancerele gastrice sau de tract urinar trebuie recomandat numai in familiile care au avut asemenea cazuri si consta in gastroscopie, ecografie si analize urinare efectuate la fiecare 1-2 ani incepand cu varsta de 30-35 ani. Optiunea colectomiei profilactice trebuie avuta in vedere atunci cand sunt identificate adenoame colonice sau la diagnosticul primului cancer de colon. De asemenea histero-salpingo-ooforectomia bilaterala poate fi efectuata profilactic, mai ales ca riscul de dezvoltare a cancerelor endometriale depaseste la aceste femei chiar pe cel al dezvoltarii cancerelor de colon7.

 

Bibliografie

1. Fay Kastrinos, and Sapna Syngal. Recently Identified Colon Cancer Predisposition: MYH and MSH6 Mutations. In Semin Oncol. 2007 October; 34(5): 418–424.

2. I. Rogoz, Suzana Rogoz, Amelia Dobrescu, F.Burada Rolul mutatiilor dinamice in patogeneza unor boli ereditare, In Craiova Medicala, vol 8, nr 1, 2006.

3. Juan Carlos Munoz, Louis R Lambiase, Hereditary Colorectal Cancer, www.emedicine.medscape.com, Ref Type: Internet Communication.

4. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog.

5. Quest Diagnostics. Colorectal Cancer. Laboratory Support of Diagnosis and Manangement. Clinical Focus. www.questdiagnostics.com. Reference Type: Internet Communication.

6. R. J. Mitchell, S. M. Farrington, M. G. Dunlop, and H. Campbell. Mismatch Repair Genes hMLH1 and hMSH2 and Colorectal Cancer: A HuGE Review. In Am J Epidemiol; 156:885–902, 2002.

7. Wendy Kohlmann, Stephen B Gruber, Hereditary Non-Polyposis Colon Cancer, Gene Reviews, 2006. www.ncbi.nlm.nih.gov. Reference Type: Internet Communication.

< inapoi la lista

Pret 29720.00 MDL