int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Mutații BRCA1 și BRCA2 – cancer ereditar sân/ovar

Pret 12520.00 MDL

Синдром наследственного рака молочной железы (ЯНБ) основан на генетической предрасположенности к развитию рака и характеризуется:
наличие в семье нескольких случаев рака молочной железы, яичников или обеих форм рака;
объединение обеих форм рака у одного человека;
рак молочной железы с началом
Хотя большинство случаев рака молочной железы и яичников не передаются по наследству, около 3-5% случаев рака молочной железы и 10% случаев рака яичников классифицируются как HBOC. Многочисленные исследования показали, что мутации в генах BRCA1 и BRCA2, которые влияют на зародышевую линию, ответственны за подавляющее большинство наследственного рака молочной железы и яичников1;
BRCA1 (ген рака молочной железы 1) и BRCA2 (ген рака молочной железы 2) представляют собой гены-супрессоры опухолей, которые кодируют белки, участвующие в процессах репарации ДНК. Сообщалось о более 1200 мутациях в гене BRCA1 и более 1300 мутаций в гене BRCA2. Хотя люди с HBOC наследуют дефектный аллель BRCA1 или BRCA2 от одного из родителей, у них есть второй функциональный аллель; Если второй аллель становится дисфункциональным, опухолевый процесс развивается, накапливая дополнительные мутации. Подсчитано, что распространенность мутаций BRCA в общей популяции составляет 1/300 – 1/800. В популяциях, основанных небольшой предковой группой, определенные мутации BRCA1 или BRCA2 могут встречаться чаще и называются «мутациями-основателями». Эти типы мутаций были выявлены преимущественно у ашкеназских (восточноевропейских) евреев, французских канадцев и исландцев1.
Ген BRCA 1, расположенный на хромосоме 17q21, состоит из 22 экзонов и кодирует 1863 аминокислотных белка. Белок BRCA1 является ядерным фосфопротеином, который играет важную роль в поддержании стабильности генома и подавлении опухоли; вместе с другими белками-супрессорами опухолей или с ролью в передаче клеточного сигнала они образуют комплекс с несколькими субъединицами, называемыми BASC (BRCA1-ассоциированный комплекс эпиднадзора за геномом); он также связан с РНК-полимеразой II, таким образом, участвуя в транскрипции, репарации двухцепочечной ДНК, а также в рекомбинантной
Мутации гена BRCA1, которые приводят к ошибкам в репликации ДНК и неконтролируемой пролиферации эпителиальных клеток, являются причиной приблизительно 40% случаев наследственного рака молочной железы и более чем 80% случаев наследственного рака молочной железы и яичников. Альтернативный сплайсинг играет роль в модуляции субклеточной локализации (цитоплазма, ядро) и нормальном функционировании гена BRCA1. Было описано несколько вариантов продуктов транскрипции, некоторые из которых связаны с мутациями.
вызывая болезнь. Также был идентифицирован псевдоген, также расположенный в хромосоме 17. В литературе указывается, что эта область в хромосоме 17 содержит тандемную дупликацию (YBRCA1) размером приблизительно 30 КБ, что приводит к появлению 2 копий экзонов 1 и 2 BRCA1, экзонов 1 и 3 соседнего гена, называемого 1A1-3B, а также межгенной области 295 п.н. Секвенирование показало, что эти дубликаты экзонов являются необработанными псевдогенами.
Эти результаты могут не только осложнить анализ мутаций BRCA1, но также могут иметь значение для нормальной или аномальной регуляции транскрипции, трансляции и функции BRCA13;
Мутации гена BRCA1 характеризуются преждевременным появлением STOP-кодонов в открытой рамке считывания (ORF), в результате чего продукт представляет собой усеченный белок. Наиболее распространенными мутациями являются 185delAG (c.68_69del AG) и 5385insC (c.5266dupC), присутствующие в процентах 1% и 0,15% у евреев-ашкенази, соответственно. Были идентифицированы тысячи носителей делеции 185delAG, что вызывает появление STOP-кодона в аминокислоте 39 в последовательности белка2. Аналогичная мутация – 188del11 (c.71_81del), которая изменяет рамку считывания в экзоне 3 (в кодонах 39 и 36), что также приводит к усеченному белку.
Другим характерным элементом гена BRCA1 являются повторяющиеся последовательности Alu. Было выявлено 45 генетических перестроек, которые включают делеции и дупликации в одном или нескольких экзонах. Геном человека содержит более 1 миллиона копий элементов Alu (по одному элементу каждые 5kb), которые, по-видимому, опосредуют хромосомные перестройки и гомологичную рекомбинацию, что приводит к дупликациям, инверсиям или делециям. Приблизительно 41,5% интронных последовательностей гена BRCA1 состоят из элементов Alu, которые часто рассматриваются как генетические факторы нестабильности4; 8.
Хотя присутствует много повторяющихся элементов, перестройки встречаются реже в гене BRCA2, расположенном на хромосоме 13q12-q13; рамка считывания начинается с нуклеотида 229 и кодирует белок 390 кДа. Ген имеет 27 экзонов, самый большой из которых, как и в случае гена BRCA1, имеет экзон 11. Инициирование трансляции происходит в экзоне 2, поскольку ген очень богат нуклеотидами АТ. BRCA2 также функционирует как белок репарации ДНК, взаимодействуя с RAD 51 (опухолевым супрессором) 3; 8. Изучив посттрансляционные изменения в BRCA2, было установлено, что белок гиперфосфорилируется Polo-подобной киназой 1 (PLK1) в метафазе и дефосфорилируется, когда клетка выходит из метафазы и входит в интерфазу. RAD 51 взаимодействует с C-концевым доменом BRCA (BRCT), уникальной аминокислотной последовательностью, которая повторяется 8 раз в центральной области BRCA2. Удаление этой области приводит к ингибированию апоптоза (BRCT участвует в апоптозе через каспазу). Большинство мутаций представляют собой изменения рамки считывания и бессмысленные мутации, расположенные в экзоне 11, наиболее распространенной из которых является мутация 6174delT, встречающаяся с частотой приблизительно 1% в ашкеназской еврейской популяции6.
Клетки, которые не имеют нормальных белков BRCA1 и BRCA2, накапливают хромосомные аномалии: разрывы, тяжелые анеуплоидии, амплификация центросомы; генерируемая хромосомная нестабильность может быть патогенной основой развития опухолей молочной железы. У женщин, которые наследуют инактивирующую мутацию, дефицит белка
BRCA имеет решающее значение для начала заболевания, будучи генерированным как унаследованным инактивированным аллелем, так и соматической потерей дикого аллеля в клетках эпителия молочной железы или яичников. Кроме того, было обнаружено, что экспрессия генов повышается во время полового созревания и беременности, что связано с повышенной секрецией эстрогена; это наблюдение предполагает, что эстрогены могут стимулировать экспрессию BRCA1 и / или BRCA2. Модель онкогенеза была также предложена у женщин с BRCA мутациями зародышевой линии: в период полового созревания, из-за повышенного уровня эстрогена, эпителиальные клетки молочной железы быстро размножаются; Присутствие инактивирующей мутации BRCA в контексте повышенной репликации значительно снижает способность репарации ДНК и увеличивает частоту соматических геномных изменений в повторяющихся элементах генов BRCA1 и BRCA2. Большинство клеток с обоими типами мутаций не выживают в следующем клеточном цикле из-за невозможности репарации ДНК, но если возникают дополнительные мутации на уровнях генов контрольных точек, некоторые клетки BRCA – все они увековечены и могут стать отправной точкой в ​​развитии опухолей9.
Проникновение мутаций BRCA1 и BRCA2, определяемых как вероятность развития рака при наличии мутации, является переменным, и, вероятно, зависит от этнической принадлежности, возраста и типа рака.
В приведенной ниже таблице показан совокупный риск развития рака молочной железы по десятилетиям жизни у женщин с мутациями BRCA1 или BRCA2 из семей высокого риска:
Мужской рак молочной железы наблюдается в семьях с мутациями BRCA2, некоторые из которых поражают исключительно мужчин. В исследовании 26 семей с по крайней мере одним случаем рака молочной железы у мужчин 77% показали связь с мутациями BRCA2 (Ford, 1998). Однако, если семейный анамнез не был принят во внимание, распространенность мутаций зародышевой линии BRCA2 у пациентов с раком молочной железы составляла только 4-14% (Couch, Friedman, 1994). Для мужчин с мутациями BRCA2 совокупный риск рака молочной железы в возрасте до 80 лет оценивался в 6,9% 7.
У женщин с мутациями BRCA1 или BRCA2 риск развития рака яичников составляет 39-46% и 12-20% соответственно. Рак яичников имеет отчетливый гистологический фенотип у этой категории пациентов, регистрируя в основном серозные опухоли или эндометриоиды высокого уровня1.
В дополнение к наследственному раку молочной железы и яичников, мутации BRCA1 и BRCA2 могут быть связаны с другими формами рака. Таким образом, было подсчитано, что риск рака простаты в 3 раза выше у мужчин с мутациями BRCA1 по сравнению с общей популяцией. Кроме того, раковые заболевания поджелудочной железы, предстательной железы, пищевода, гортани, желудка, толстой кишки, желчного пузыря, желчного протока, меланомы были зарегистрированы в семьях с мутациями BRCA2, которые предрасполагают к раку. Биалелевая инактивация BRCA27 была также обнаружена при анемии Фанкони.
Генетическое тестирование важно в клинической практике для выявления людей со значительным риском рака молочной железы или яичников и применения соответствующих стратегий скрининга и профилактики.
Рекомендации по анализу мутаций генов BRCA1 и BRCA2
Генетическое тестирование рекомендуется людям с риском ≥20-25% наследственной предрасположенности к раку молочной железы или яичников:
-женщины с личным анамнезом как рака молочной железы, так и рака яичников;
– женщины с раком яичников, у которых есть близкие родственники с раком яичников, или с раком молочной железы в пременопаузе, или с обоими;
– женщины с раком яичников, принадлежащие к этнической группе евреев-ашкенази;
– женщины с раком яичников, обнаруженным в возрасте 50 лет или ранее, которые имеют близкого родственника с раком яичников или раком молочной железы у мужчин, развившихся в любом возрасте;
– женщины, принадлежащие к этнической группе евреев-ашкенази, с раком молочной железы, диагностированным в возрасте ≤40 лет;
женщины с близким родственником, у которого есть известная мутация BRCA1 или BRCA2.
Генетическое тестирование не является обязательным для людей с ≥5-10% риска наследственной предрасположенности к раку молочной железы или яичников:
– женщины с раком молочной железы, диагностированным в возрасте ≤40 лет;
– женщины с раком яичников, первичным раком брюшной полости или маточной трубы, гистологически высокой степени и серозностью, развившимся в любом возрасте;
– женщины с двусторонним раком молочной железы (особенно, если первая опухоль была диагностирована в возрасте ≤50);
женщины с раком молочной железы, диагностированным в возрасте ≤50 лет, имеющие близкого родственника с развитым раком молочной железы ≤50 лет;
– женщины, принадлежащие к этнической группе евреев-ашкенази, с раком молочной железы, диагностированным в возрасте ≤50 лет;
– женщины с раком молочной железы развились в любом возрасте, имея как минимум 2 близких родственника с раком молочной железы, независимо от возраста, в котором он был обнаружен (особенно, если хотя бы один из случаев был диагностирован в возрасте ≤50 лет);
– здоровые женщины с близким родственником, который соответствует одному из вышеуказанных критериев.
Сроки:
первичный рак шейки матки или рак брюшины являются частью спектра характерных проявлений HBOC;
близкий родственник определяется как любой родственник первой степени (мать, сестра, дочь) или родственник второй степени (бабушка, племянница, тетя).
По возможности, генетическое тестирование должно быть начато у пострадавшего лица; поскольку количество мутаций BRCA1 и BRCA2 очень велико, будет выполнено полное секвенирование обоих генов. Как только определенная мутация идентифицирована, она будет нацелена на родственников с высоким риском (диагностическое тестирование).
Если невозможно протестировать пострадавших людей, полная последовательность генов BRCA1 и BRCA2 будет использоваться в членах семьи высокого риска.
Перед рекомендацией выполнить тест рекомендуется, чтобы пациент консультировался с лечащим врачом в том смысле, что человек должен быть проинформирован о значимости и последствиях положительного, отрицательного или неизвестного результата1.
Собранный образец – венозная кровь5.
Контейнер для сбора урожая – вакутейнер, содержащий ЭДТА в качестве антикоагулянта5.
Собранная сумма – 5 мл крови5.
Причины отторжения образца – использование гепарина в качестве антикоагулянта; коагулированные или гемолизированные образцы5.
Стабильность образца – 7 дней при 2-8ºC5.
Метод – секвенирование всех экзонов гена BRCA1 и BRCA2 + анализ биоинформатики делеций / дупликаций (CNV), 90-95% известных мутаций могут быть идентифицированы, а новые могут быть обнаружены5.
Отчетность и интерпретация результатов
Отрицательный результат определяется отсутствием мутаций зародышевой линии в генах BRCA1 и BRCA2. В случае больного человека это указывает на то, что опухолевый процесс произошел спонтанно, а не в результате мутаций зародышевой линии. В случае человека с высоким риском отрицательный результат может иметь следующие значения:
семейная мутация не была унаследована;
-присутствует мутация BRCA1 или BRCA2, которая не может быть обнаружена или еще не идентифицирована; в этом случае предрасположенность заинтересованного лица к наследственному раку молочной железы или яичников остается неизвестной;
-нет семейной предрасположенности к наследственному раку молочной железы или яичников.

Если мутация не обнаружена у людей с высоким риском, вероятность развития рака молочной железы и рака яичников, соответственно, сопоставима с вероятностью развития среди населения в целом.
Наличие мутации зародышевой линии у больного человека повышает риск развития в будущем новой опухоли (связанной с BRCA1 и BRCA2).
В случае положительного результата для мутаций BRCA1 и BRCA2 зародышевой линии у человека с высоким риском, отправляющий врач должен предоставить всю информацию, касающуюся доступных вариантов мониторинга, скрининга, химиопрофилактики или профилактической хирургии; психологические и семейные последствия должны быть приняты во внимание.
Вот некоторые из рекомендаций Ассоциации гинекологов и акушеров США:
Скрининг и профилактика рака молочной железы: рекомендуется, чтобы в случае носителей мутации BRCA1 или BRCA2 проводилось двухгодичное клиническое обследование молочных желез вместе с маммографией и МРТ молочной железы ежегодно, начиная с возраста 25 лет. Магнитно-резонансная томография является более чувствительным методом, чем маммография при раке молочной железы.
Предварительные исследования показали, что химиопрофилактика с тамоксифеном может снизить на ~ 62% риск рака молочной железы у женщин с мутациями BRCA2, но не у женщин с мутациями BRCA1 (поскольку частота возникновения эстроген-позитивных опухолей молочной железы низкая, когда ассоциирован BRCA1).
Профилактическая операция с двусторонней мастэктомией снижает риск рака молочной железы более чем на 90-95% в зависимости от применяемой процедуры.
Профилактическая сальпингоовариэктомия снижает риск рака молочной железы на 40-70% при применении у женщин в пременопаузе. Защита от рака молочной железы выше у женщин с мутациями BRCA2.
Скрининг и профилактика рака яичников: хотя он имеет ограниченное значение в раннем выявлении опухолей яичников, рекомендуется периодически проводить маркер CA125 (через 6 месяцев) в сочетании с трансвагинальным ультразвуком у людей с мутациями BRCA1 или BRCA2, начиная с возраста на 30-35 лет.
Профилактическая сальпингоовариэктомия в возрасте около 40 лет может снизить риск рака яичников у этой категории людей на ~ 85-90% 1.
Пределы и помехи
Отрицательный результат у человека с высоким риском не исключает полностью HBOC, потому что текущее генетическое тестирование не в состоянии идентифицировать все мутации, связанные с этим синдромом.
В очень редких случаях может быть обнаружен генетический вариант BRCA1 или BRCA2, значение которого в развитии рака не может быть определено1; 5; 7.
Список используемой литературы
Практический бюллетень ACOG. Клиническое руководство для акушеров-гинекологов. Наследственный рак молочной железы и яичников, № 103, апрель
Buisson M, Anczukow O, Zetoune AB, Ware MD, Mazoyer S. Мутация 185delAG (c.68_69del AG) в гене BRCA1 вызывает повторную инициацию трансляции в нижестоящем кодоне AUG. In Human Mutation, 2006, 27 (10): 1024-1029.
Ген BRCA1, ген BRCA2. Генные карты. genecards.org. Тип ссылки: Интернет-связь.
Эвальд И.П., Рибейро Изетти П.Л., Пламеро Е.И., Коссио С.Л., Джулиани Р., Эштон-Пролла П. Геномные перестройки в BRCA1 и BRCA 2: обзор литературы. В генетике и молекулярной биологии, 2009, 32, 3: 437-446.
Сыневская лаборатория. Конкретные ссылки на рабочую технологию, использованную в 2010 году. Тип ссылки:
Лин Х.Р., Тинг Нью-Йорк, Цинь Дж, Ли У. М-фазовое специфическое фосфорилирование BRCA2 с помощью Polo-подобной киназы 1 коррелирует с диссоциацией комплекса BRCA2-P / CAF. В Журнале биологической химии, 2003, 278.13: 35979-35978.
Нэнси Петручелли, Мэри Б. Дейли, Джули О Барс Калвер, Джеральд Л. Фельдман. BRCA1 и BRCA2 Наследственный рак молочной железы / яичников. Джин Обзоры, www.ncbi.nlm.nih.gov. ReferenceType: Интернет-общение.
OMIM (онлайн менделевское наследование в человеке). Ген рака молочной железы 1 (BRCA1), ген рака молочной железы 2 (BRCA2).
Welcsh PL, King BRCA1 и BRCA2 и генетика рака молочной железы и яичников. В

SKU: BM218

Sindromul cancerului ereditar de sân și de ovar (HBOC = hereditary breast-ovarian cancer syndrome) are la bază o predispoziție genetică de a dezvolta cancer și se caracterizează prin:

  • existența într-o familie a mai multor cazuri de cancer mamar, ovarian sau a ambelor forme;
  • asocierea la aceeași persoană a ambelor forme de cancer;
  • cancer mamar cu debut

Deși cele mai multe cazuri de cancer mamar și ovarian nu sunt moștenite, aproximativ 3-5% dintre cancerele de sân și 10% dintre cancerele de ovar sunt încadrate în HBOC. Numeroasele studii efectuate au arătat că mutațiile genelor BRCA1 și BRCA2 care afectează linia germinală sunt responsabile de marea majoritate a cancerelor ereditare de sân și ovar1;7.

BRCA1 (Breast Cancer 1 Gene) și BRCA2 (Breast Cancer 2 Gene) sunt gene supresoare ale tumorilor care codifică proteine cu rol în procesele de reparare a ADN-ului. Au fost comunicate peste 1200 mutații ale genei BRCA1 și peste 1300 mutații ale genei BRCA2. Deși persoanele cu HBOC moștenesc o alelă BRCA1 sau BRCA2 defectuoasă de la unul dintre părinți, aceștia prezintă o a doua alelă funcțională; în cazul în care și cea de-a doua alelă devine nefuncțională se dezvoltă procesul neoplazic, prin acumularea de mutații adiționale. Se estimează că prevalența mutațiilor BRCA în populația generală este de 1/300 – 1/800. În populațiile întemeiate de un grup ancestral mic, anumite mutații BRCA1 sau BRCA2 se pot întâlni mai frecvent și sunt denumite „mutații fondatoare”. Aceste tipuri de mutații au fost identificate predominant la evreii Ashkenazi (din Europa de Est), canadienii francezi și la islandezi1.

Gena BRCA 1 localizată la nivelul cromozomului 17q21 este formată din 22 de exoni și codifică o proteină de 1863 de aminoacizi. Proteina BRCA1 este o fosfoproteină nucleară cu rol important în menținerea stabilității genomice și în supresia tumorală; împreună cu alte proteine supresoare ale tumorilor sau cu rol în transmiterea semnalului celular, formează un complex cu subunități multiple denumit BASC (BRCA1-asociated genome surveillance complex); de asemenea se asociază cu ARN polimeraza II intervenind astfel în transcriptie, repararea ADN-lui dublu catenar, precum și în recombinare.

Mutațiile genei BRCA1, ce conduc la erori în replicarea ADN-ului și proliferarea necontrolată a celulelor epiteliale, sunt răspunzătoare de aproximativ 40% din cazurile de cancer mamar ereditar și mai mult de 80% din cazurile de cancer mamar și ovarian ereditare. Splicing-ul alternativ deține rol în modularea localizării subcelulare (citoplasmă, nucleu) și funcționarea normală a genei BRCA1. Au fost descrise mai multe variante de produși de transcripție unele fiind asociate cu mutații

cauzatoare de boală. A fost identificată și o pseudogenă, localizată tot pe cromozomul 17. În literatura de specialitate este specificat că această regiune de pe cromozomul 17 conține o duplicație în tandem (YBRCA1), de aproximativ 30kb, care duce la apariția a 2 copii ale exonilor 1 și 2 ai BRCA1, ale exonilor 1 și 3 ai genei adiacente denumită 1A1-3B, precum și a unei regiuni intergenice de 295 bp3. Prin secvențiere s-a demonstrat că acești exoni duplicați constituie pseudogene neprocesate.

Aceste constatări pot nu numai să îngreuneze analiza mutațiilor BRCA1, ci să aibă și implicații asupra reglării normale sau anormale a transcripției, translației și funcției BRCA13;4.

Mutațiile genei BRCA1 se caracterizează prin apariția prematură a codonilor STOP la nivelul cadrului de citire (open reading frame, ORF), produsul rezultat fiind o proteină trunchiată. Cele mai frecvente mutații sunt 185delAG (c.68_69del AG) și 5385insC (c.5266dupC) prezente în procent de 1%, respectiv, 0.15% la evreii Ashkenazi. Au fost identificați mii de purtători ai deleției 185delAG, care determină apariția codonului STOP la aminoacidul 39 din secvența proteică2. O mutație asemănătoare este 188del11 (c.71_81del) care schimbă cadrul de citire în exonul 3 (la nivelul codonilor 39 și 36), rezultând de asemenea o proteina trunchiată.

Un alt element caracteristic al genei BRCA1 îl constituie secvențele Alu repetitive.  Au fost identificate 45 de rearanjări genetice, care includ deleții și duplicații într-unul sau mai mulți exoni. Genomul uman conține peste 1 milion de cópii de elemente Alu (un element la fiecare 5kb), care aparent mediază rearanjările cromozomiale și recombinarea omoloagă, rezultând duplicații, inversii sau deleții. Aproximativ 41.5% din secvențele intronice ale genei BRCA1 sunt constituite din elemente Alu, privite de multe ori ca factori genetici de instabilitate4;8.

Deși sunt prezente numeroase elemente repetitive, rearanjările sunt mai puțin frecvente la nivelul genei BRCA2, situată pe cromozomul 13q12-q13; cadrul de citire începe la nucleotidul 229 și codifică o proteină de 390 kDa. Gena are 27 exoni, cel mai mare exon fiind, ca și în cazul genei BRCA1, exonul 11. Inițierea translației are loc în exonul 2, gena fiind foarte bogată în nucleotide AT. BRCA2 funcționează tot  ca o proteină de reparare a ADN-ului prin interacțiunea cu RAD 51 (supresor tumoral)3;8. Prin examinarea modificărilor posttranslaționale ale BRCA2, s-a stabilit că proteina este hiperfosforilată de Polo-like kinaza 1 (PLK1) în metafază și defosforilată când celula iese din metafază și intră în interfază. RAD 51 interacționează cu domeniul C-terminal al BRCA (BRCT), o secvență unică de aminoacizi care se repetă de 8 ori în regiunea centrală a BRCA2. Îndepărtarea acestei regiuni duce la inhibarea apoptozei (BRCT fiind implicată în apoptoză pe calea caspazei). Majoritatea mutațiilor sunt alterări ale cadrului de citire și mutații non-sens localizate în exonul 11, cea mai frecventă fiind mutația 6174delT întâlnită cu o frecvență de aproximativ 1% în populația evreilor Ashkenazi6.

Celulele care nu au proteinele normale BRCA1 și BRCA2 acumulează anomalii cromozomiale: rupturi, aneuploidii severe, amplificarea centrozomului; instabilitatea cromozomială generată poate constitui baza patogenică a dezvoltării tumorilor mamare. La femeile care moștenesc o mutație inactivatoare, deficitul unei proteine

BRCA este critic pentru apariția bolii, fiind generat atât de alela inactivată moștenită, cât și de pierderea somatică a alelei sălbatice în celulele epiteliale mamare sau ovariene. În plus s-a constatat că expresia genelor este suprareglată în timpul pubertății și sarcinii, fiind asociată cu creșterea secreției de estrogeni; această observație sugerează că estrogenii ar putea stimula expresia BRCA1 și/sau BRCA2. A fost propus și un model de tumorigeneză la femeile purtătoare de mutații BRCA  ale liniei germinale: la pubertate, ca urmare a nivelului crescut de estrogeni, celulele epiteliale ale glandei mamare proliferează rapid; prezența unei mutații BRCA inactivatoare în contextul unei replicări crescute reduce mult capacitatea de  reparare a ADN-ului și crește frecvența alterărilor genomice somatice la nivelul elementelor repetitive din genele BRCA1 și BRCA2. Majoritatea celulelor care prezintă ambele tipuri de mutații nu supraviețuiesc în ciclul celular următor datorită incapacității de reparare a ADN-ului, însă în cazul în care se produc mutații adiționale la nivelelor unor gene care controlează ciclul celular („checkpoint genes”), unele celule BRCA-nule se imortalizează și pot constitui punctul de plecare în dezvoltarea tumorilor9.

Penetranța mutațiilor BRCA1 și BRCA2, definită ca probabilitatea de a dezvolta cancer atunci când este prezentă o mutație, este variabilă, fiind influențată probabil de etnicitate, vârstă, tipul de cancer.

În tabelul de mai jos este prezentat riscul cumulat de cancer de sân, în funcție de decada de viață, la femeile purtătoare de mutații BRCA1 sau BRCA2, provenite din familiile cu risc crescut :

Vârstă Risc cumulat
BRCA1 BRCA2
30 ani 3.2% 4.6%
40 ani 19.1% 12%
50 ani 50.8% 46%
60 ani 54.2% 61%
70 ani 85% 86%

Cancerul mamar la bărbați a fost observat în familiile cu mutații BRCA2, unele dintre acestea prezentând în exclusivitate afectarea persoanelor de sex masculin. Într-un studiu efectuat pe 26 familii care au prezentat cel puțin un caz de cancer de sân la bărbați, 77% au demonstrat o asociere cu mutații BRCA2 (Ford, 1998). Dacă însă nu s-a luat în considerare istoricul familial, prevalența mutațiilor BRCA2 ale liniei germinale la pacienții cu cancer mamar a fost de numai 4-14% (Couch, Friedman, 1994). Pentru bărbații cu mutații BRCA2 riscul cumulat de cancer mamar până la vârsta de 80 ani a fost estimat la 6.9%7.

La femeile cu mutații BRCA1 sau BRCA2 riscul de cancer ovarian este de 39-46% și, respectiv, de 12-20%. Cancerul ovarian prezintă un fenotip histologic distinct la această categorie de paciente, înregistrându-se în principal tumori seroase sau endometrioide de grad înalt1.

În afara cancerului ereditar de sân și ovar mutațiile BRCA1 și BRCA2 pot fi asociate și cu alte forme de cancer. Astfel, s-a estimat că riscul de cancer de prostată este  de 3 ori mai mare la bărbații purtători de mutații BRCA1 în comparație cu populația generală. Mai mult, cazuri de cancer de pancreas, prostată, esofag, laringe, stomac, colon, vezică biliară, duct biliar, melanom au fost raportate în familiile cu mutații BRCA2 ce predispun la cancer. De asemenea în anemia Fanconi s-a constatat inactivarea bialelică BRCA27.

Testarea genetică este importantă în practica clinică pentru identificarea persoanelor care prezintă un risc semnificativ de cancer de sân sau de ovar și aplicarea strategiilor adecvate de screening și prevenție1;7.

Recomandări pentru analiza mutațiilor genelor BRCA1 și BRCA2

Se recomandă testarea genetică la persoanele cu un risc ≥20-25% de a avea o predispoziție moștenită pentru cancerul mamar sau ovarian:

  • femei cu antecedente personale atât de cancer mamar, cât și ovarian;
  • femei cu cancer ovarian ce au o rudă apropiată fie cu cancer ovarian, fie mamar cu debut înainte de menopauză sau ambele;
  • femei cu cancer ovarian ce aparțin grupului etnic al evreilor Ashkenazi;
  • femei cu cancer ovarian depistat la vârsta de 50 ani sau mai devreme, ce au o rudă apropiată fie cu cancer ovarian, fie cu cancer mamar la bărbat dezvoltat la orice vârstă;
  • femei ce aparțin grupului etnic al evreilor Ashkenazi cu cancer mamar diagnosticat la o vârstă ≤40 ani;
  • femei având o rudă apropiată ce prezintă o mutație BRCA1 sau BRCA2 cunoscută.

Testarea genetică este opțională la persoanele cu un risc ≥5-10% de a avea o predispoziție moștenită pentru cancerul mamar sau ovarian:

  • femei cu cancer mamar diagnosticat la o vârstă ≤40 ani;
  • femei cu cancer ovarian, peritoneal primar sau de trompă uterină, histologic de grad înalt și de tip seros, dezvoltat la orice vârstă;
  • femei cu cancer mamar bilateral (în special dacă prima tumoră a fost diagnosticată la o vârstă ≤50 ani);
  • femei cu cancer mamar diagnosticat la o vârstă ≤50 ani, având o rudă apropiată cu cancer mamar dezvoltat ≤50 ani;
  • femei ce aparțin grupului etnic al evreilor Ashkenazi cu cancer mamar diagnosticat la o vârstă ≤50 ani;
  • femei cu cancer mamar dezvoltat la orice vârstă, având cel puțin 2 rude apropiate cu cancer mamar, indiferent de vârsta la care a fost depistat (în special dacă cel puțin unul din cazuri a fost diagnosticat la o vârstă ≤50 ani);
  • femei sănătoase având o rudă apropiată care întrunește unul din criteriile mai sus menționate.

Mențiuni:

  • cancerul primar de trompă uterină sau peritoneal primar fac parte din spectrul de manifestări caracteristice HBOC;
  • o rudă apropiată este definită ca orice rudă de gradul I (mamă, soră, fiică) sau de gradul II (bunică, nepoată, mătușă).

Dacă este posibil, testarea genetică trebuie inițiată la persoana afectată; deoarece numărul mutațiilor BRCA1 și BRCA2 este foarte mare se va efectua secvențierea completă a ambelor gene. O dată identificată o mutație specifică aceasta va fi căutată țintit la rudele cu risc crescut (testarea în scop predictiv).

În cazul în care nu este posibilă testarea persoanelor afectate se va recurge la secvențierea completă a genelor BRCA1 și BRCA2 la membrii familiei cu risc crescut.

Înaintea recomandării de efectuare a testării este indicat ca pacientul să fie consiliat de către medicul trimițător, în sensul că persoana trebuie să fie informată asupra semnificației și consecințelor unui rezultat pozitiv, negativ sau de semnificație necunoscută1.

Specimen recoltat – sânge venos5.

Recipient de recoltare – vacutainer ce conține EDTA ca anticoagulant5.

Cantitate recoltată – 5 mL sânge5.

Cauze de respingere a probei – folosirea heparinei ca anticoagulant; probe coagulate sau hemolizate5.

Stabilitate probă 7 zile la 2-8ºC5.

Metodă secventierea tuturor exonilor genei BRCA1 și BRCA2 + analiza bioinformatica delețiilor/duplicațiilor (CNV) se pot identifica 90-95% dintre mutațiile cunoscute și se pot depista altele noi5.

Raportarea și interpretarea rezultatelor

Un rezultat negativ este definit prin absența mutațiilor liniei germinale în genele BRCA1 și BRCA2. În cazul unei persoane afectate acesta indică că procesul neoplazic a apărut spontan și nu ca urmare a mutațiilor pe linie germinală. În cazul unei persoane cu risc crescut un rezultat negativ poate avea următoarele semnificații:

  • nu a fost moștenită mutația specifică familiei;
  • este prezentă o mutație BRCA1 sau BRCA2 care nu poate fi detectată sau nu a fost încă identificată; în acest caz predispoziția persoanei în cauză pentru cancerul mamar sau ovarian ereditar rămâne necunoscută;
  • nu există o predispoziție familială pentru cancerul mamar sau ovarian ereditar.

Dacă nu este detectată o mutație la persoanele cu risc crescut, probabilitatea de apariție a cancerului de sân, respectiv, de ovar este comparabilă cu cea din populația generală.

Prezența unei mutații a liniei germinale la o persoană afectată conferă un risc crescut de dezvoltare în viitor a unei tumori noi (asociate cu BRCA1 și BRCA2).

În cazul unui rezultat pozitiv pentru mutațiile BRCA1 și BRCA2 ale liniei germinale la o persoană cu risc crescut, este necesar ca medicul trimițător să furnizeze toate informațiile cu privire la opțiunile de monitorizare, screening, chimioprofilaxie sau chirurgie profilactică disponibile; trebuie să se ia obligatoriu în considerare  implicațiile psihologice și familiale.

Menționăm câteva din recomandările Asociației Medicilor Ginecologici-Ostetricieni din SUA:

Screening-ul și prevenția cancerului de sân: se recomandă ca în cazul purtătoarelor de mutații BRCA1 sau BRCA2 să se efectueze un examen clinic binual al sânilor împreună cu o mamografie și un RMN al glandei mamare anual,  începând cu  vârsta de 25 ani. Rezonanța magnetică este o metodă mai sensibilă decât mamografia pentru detecția cancerului mamar.

Studii preliminare au arătat că chimioprofilaxia cu Tamoxifen poate reduce cu ~62% riscul de cancer mamar la femeile purtătoare de mutații BRCA2, dar nu și la cele de mutații BRCA1 (deoarece incidența tumorilor mamare estrogen-pozitive este redusă în cazul asocierii mutației BRCA1).

Chirurgia profilactică cu mastectomie bilaterală reduce riscul cancerului mamar cu peste 90-95% în funcție de procedura aplicată.

Salpingo-ovariectomia profilactică reduce riscul de cancer mamar cu 40-70% dacă se aplică femeilor aflate la premenopauză. Protecția față de cancerul mamar este mai mare în cazul femeilor purtătoare de mutații BRCA2.

Screening-ul și prevenția cancerului ovarian: deși are o valoare limitată în depistarea precoce a tumorilor ovariene, se recomandă efectuarea periodică (la 6 luni) a marker-ului CA125 în asociere cu ecografia transvaginală la persoanele cu mutații BRCA1 sau BRCA2, începând cu vârsta de 30-35 ani.

Salpingo-ovariectomia profilactică în jurul vârstei de 40 ani poate reduce riscul de cancer ovarian la această categorie de persoane cu ~ 85-90%1.

Limite și interferențe

Un rezultat negativ la o persoană cu risc crescut nu exclude complet HBOC deoarece testarea genetică actuală nu reușește să identifice toate mutațiile asociate cu acest sindrom.

În cazuri foarte rare poate fi depistată o variantă genetică BRCA1 sau BRCA2 a cărei implicație în dezvoltarea cancerului nu poate fi precizată1;5;7.

Bibliografie

  1. ACOG Practice Bulletin. Clinical Management Guidelines for Obstetrician-Gynecologists. Hereditary Breast and Ovarian Cancer, No.103, April
  2. Buisson M, Anczukow O, Zetoune AB, Ware MD, Mazoyer S. The 185delAG Mutation (c.68_69del AG) in the BRCA1 gene riggers translation reinitation at a downstream AUG codon. In Human Mutation, 2006, 27(10):1024-1029.
  3. BRCA1 Gene, BRCA2 Gene. Gene cards. genecards.org. Reference Type: Internet Communication.
  4. Ewald IP, Ribeiro Izetti PL, Plamero EI, Cossio SL, Giuliani R, Ashton-Prolla P. Genomic rearrangements in BRCA1 and BRCA 2: a literature review. In Genetics and Molecular Biology, 2009, 32, 3: 437-446.
  • Laborator Synevo. Referințele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type:
  • Lin HR, Ting NSY, Qin J, Lee WH. M-Phase- specific phosphorylation of BRCA2 by Polo-like kinase 1 correlates with the dissociation of the BRCA2-P/CAF complex. In The Journal of Biological Chemistry, 2003, 278,13: 35979-35978.
  1. Nancie Petrucelli, Mary B Daly, Julie O Bars Culver, Gerald L Feldman. BRCA1 and BRCA2 Hereditary Breast/Ovarian Cancer. Gene Reviews, www.ncbi.nlm.nih.gov. ReferenceType: Internet Communication.
  2. OMIM (Online Mendelian Inheritance in Man). Breast Cancer 1 Gene (BRCA1), Breast cancer 2 Gene (BRCA2).

http://www.ncbi.nlm.nih.gov. Reference Type: Internet Communication.

  1. Welcsh PL, King BRCA1 and BRCA2 and the genetics of breast and ovarian cancer. In

Human Molecular genetics, 2001, 10 (7): 705-713.

< inapoi la lista

Pret 12520.00 MDL