int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Epstein-Barr-Virus (EBV) ADN in sange (cantitativ)

Pret 1876.00 MDL

Общая информация

Вирус Эпштейна-Барр

Этиология. Вирус герпеса человека 4 типа (ВГЧ-IV), или вирус Эпштейна-Барр, – лимфотропный вирус, его этиологическая роль известна при инфекционном мононуклеозе, лимфоме Беркитта, назофарингеальной карциноме, лимфопролиферативном синдроме, связанным с X-хромосомой, и синдроме хронической усталости. Это ДНК-геномный вирус рода Lymphocryptovirus подсемейства Gammaherpesvirinae семейства Herpesviridae, имеет 4 основных антигена: ранний антиген (early antigen – ЕА), капсидный антиген (viral capcide antigen – VCA), мембранный антиген (membrane antigen – MA); ядерный антиген (Epstain-Barr Nuclea antigen – EBNA). Каждый из них образуется в определённой последовательности и индуцирует синтез соответствующих антител.

Эпидемиология. Источник заражения – инфицированный человек (с манифестной или стёртой формой болезни, а также вирусоноситель). Первичная инфекция чаще возникает в детском или молодом возрасте. Пути передачи вируса: воздушно-капельный, контактно-бытовой, трансфузионный, половой, трансплацентарный. После заражения репликация вируса в организме человека и формирование иммунного ответа могут протекать бессимптомно, либо проявляться в виде незначительных признаков ОРВИ. В некоторых случаях, чаще при наличии в данный период значимого ослабления иммунной системы, у пациента может развиться картина инфекционного мононуклеоза. Около 90% взрослого населения мира заражены вирусом Эпштейна-Барр и после первичной инфекции остаются пожизненными носителями вируса.

Патогенез. Входными воротами при инфекционном мононуклеозе является слизистая оболочка ротовой полости и верхних дыхательных путей. Вирус Эпштейна-Барр проникает через интактные эпителиальные слои путем трансцитоза в нижележащую лимфоидную ткань миндалин, в частности В-лимфоциты. После инфицирования число пораженных клеток увеличивается посредством вирус-зависимой клеточной пролиферации. Инфицированные В-лимфоциты могут значительное время находиться в тонзиллярных криптах, что позволяет вирусу выделяться во внешнюю среду со слюной. С инфицированными клетками вирус распространяется по другим лимфоидным тканям и периферической крови. В инфицированных вирусом клетках возможно два вида размножения: литический, то есть приводящий к гибели, лизису клетки-хозяина, и латентный, когда число вирусных копий небольшое и клетка не разрушается. При острой или активной инфекции преобладает литическая репликация вируса. Вирус может длительно находиться в В-лимфоцитах и эпителиоцитах назофарингеальной области и слюнных желез. Кроме того, он способен инфицировать другие клетки: Т-лимфоциты, NK-клетки, макрофаги, нейтрофилы, эпителиоциты сосудов. В ядре клетки-хозяина ДНК вируса может встраиваться в геном, вызывая хромосомные нарушения. Активное размножение вируса может происходить в результате ослабления иммунологического контроля, а также стимуляции размножения клеток, инфицированных вирусом под действием ряда факторов: острой бактериальной или вирусной инфекции, вакцинации, стрессов и т.д.

Клинические проявления. Инфекционный мононуклеоз – острое антропонозное вирусное инфекционное заболевание, характеризующееся лихорадкой, поражением ротоглотки, лимфатических узлов, печени и селезёнки и специфическими изменениями гемограммы. Инкубационный период заболевания – 4-6 недель. В продромальный период инфекция проявляется болями в мышцах, утомляемостью, общим недомоганием. Затем к ним присоединяется лихорадка, боль в горле, увеличение лимфатических узлов, селезёнки и иногда печени. В некоторых случаях появляется сыпь на руках и туловище. Симптомы сохраняются 2-4 недели. У детей инфекция часто протекает бессимптомно. Возможно несколько вариантов исхода острого инфекционного процесса:

  1. Выздоровление.
  2. Бессимптомное вирусоносительство или латентная инфекция.
  3. Хроническая рецидивирующая инфекция:

а) хроническая активная инфекция (сохранение симптомов инфекционного мононуклеоза более 6 месяцев);

б) генерализованная форма (возможно поражение нервной системы (энцефалит, полинейропатии, менингит), других внутренних органов (миокардит, гломерулонефрит, лимфоцитарная интерстициальная пневмония, гепатит);

в) гемофагоцитарный синдром, ассоциированный с ВЭБ инфекцией;

г) стертые или атипичные формы (длительный субфебрилитет неясного генеза, клиника вторичного иммунодефицита – рецидивирующие бактериальные, грибковые, часто — микст-инфекции респираторного и желудочно-кишечного тракта, фурункулез и т.д.);

д) развитие онкологического (лимфопролиферативного) процесса (множественные поликлональные лимфомы, назофарингеальная карцинома, лейкоплакии языка и слизистых ротовой полости, рак желудка и кишечника и др.);

е) развитие аутоиммунных процессов (СКВ, ревматоидного артрита, синдрома Шегрена и др.);

ж) вирус Эпшейна-Барр может играть важную роль в возникновении синдрома хронической усталости.

Прогноз для больного с острой инфекцией, вызванной вирусом Эпштейна-Барр, зависит от наличия и степени выраженности иммунной дисфункции, генетической предрасположенности к ВЭБ-ассоциированным заболеваниям, а также от влияния внешних факторов (стресс, инфекции, операционные вмешательства, неблагоприятное воздействие окружающей среды), повреждающих иммунную систему.

У иммунокомпетентных пациентов инфицированные В-лимфоциты находятся под контролем Т-лимфоцитов, поэтому, в большинстве случаев, при реактивации инфекции протекание заболевания остается в субклинической форме. У пациентов со СПИДом клонирование непогибающих В-лифоцитов может вызывать развитие лимфомы.

Лабораторная диагностика основывается на определении серологических маркеров инфекции и выявлении методом ПЦР вируса в различных биологических жидкостях.

Гематологические изменения, напоминающие картину инфекционного мононуклеоза, могут наблюдаться и при цитомегаловирусной инфекции, токсоплазмозе, острых респираторных вирусных заболеваниях, ветряной оспе, кори, инфекционных гепатитах и других заболеваниях. Поэтому для дифференциальной диагностики целесообразно проведение ряда тестов. Специфическая серологическая диагностика инфекции основана на использовании комбинации тестов, выявляющих наличие IgG и IgM антител к различным белкам-антигенам вируса, что, в большинстве случаев, позволяет дифференцировать инфекцию и уточнить стадию патологического процесса.

Молекулярные методы диагностики

Выявление вируса Эпштейна-Барр методом ПЦР

Материал Правила подготовки пациента Транспортная среда, пробирка  
Кровь Общеклинические и биохимические

исследования крови

Вакутайнер с антикоагулянтом КЗ-ЭДТА
Метод тестирования ПЦР количественный анализ
Показания к назначению
· Выявление и количественное определение ДНК вируса Эпштейна-Барр;

· оценка вирусной нагрузки для решения вопросов лечения и контроля за ее эффективностью;

· контроль персистенции и выделения вируса

Интерпретация результатов
Обнаружено Не обнаружено
· Инфицирование ЭБВ;

· бессимптомное носительство вируса;

· реактивация ЭБВ инфекции

· Отсутствие инфицирования;

· низкое количество ДНК вируса в данном материале, которое

выходит за пределы аналитической чувствительности анализатора

SKU: BM58 Durata 10 zile sânge venos

Informatii generale

Virusul Epstein-Barr (EBV) este asociat cu un spectru larg de afectiuni benigne si maligne ce include: mononucleoza infectioasa, limfomul, sindromul limfoproliferativ posttransplant si carcinomul nazofaringian.

Determinarea genomului viral EBV-ADN este din ce in ce mai mult utilizata in laboratoarele clinice in diagnosticul si monitorizarea afectiunilor induse de aceasta infectie6.

Infectiile EBV sunt larg raspandite astfel ca pana la virsta de 35-40 ani 95% dintre persoanele  adulte au venit in contact cu acest virus. Multi copii dobandesc infectia in primii de viata, insa in majoritatea cazurilor aceasta este asimptomatica sau evolueaza ca o infectie usoara de tract respirator superior7. La adolescent si adultul tanar infectia EBV primara poate determina, in 35-50% din cazuri, mononucleoza infectioasa – o afectiune limfoproliferativa benigna caracterizata prin febra, astenie fizica, faringita si poliadenopatii.

Infectiile primare se caracterizeaza  prin viremii crescute care inregistreaza scaderi pana la valori nedetectabile pe masura ce sistemul imun recunoaste si controleaza infectia. Ca si alte virusuri herpetice, EBV poate sa ramana in organism intr-o stare dormanta ani de zile (infectie latenta). Reactivarile periodice sunt insotite de viremii tranzitorii. Unii pacienti dezvolta ulterior neoplazii asociate infectiei EBV, iar acestia prezinta ca trasatura definitorie valori foarte ridicate ale viremiei. Astfel, determinarea cantitativa EBV-ADN nu detecteaza numai infectia activa ci constituie si un “marker tumoral” pentru anumite tipuri de procese maligne2;3;4;9.

Tumorile asociate cu EBV sunt sindroamele limfoproliferative postransplant, carcinomul nazofaringian, limfoamele asociate sindromului imunodeficientei dobandite (SIDA) si limfomul Burkitt3.

Celula tinta pentru infectia EBV este limfocitul B. Pacientii imunodeprimati, care nu prezinta anticorpi anti-EBV (adesea copii), prezinta riscul de a dezvolta infectie EBV acuta care poate cauza sindroame limfoproliferative; acestea includ sindroamele limfoproliferative posttransplant si limfoamele asociate sindromului imunodeficientei dobandite (SIDA)5. Incidenta sindroamelor limfoproliferative posttransplant variaza de la 1% la pacientii cu transplant renal pana la 9% la pacientii cu transplant de cord/plaman si 12% la cei cu transplant de pancreas7.

Recomandari pentru determinarea cantitativa EBV-ADN

Diagnosticul serologic este rareori util in evaluarea infectiei la pacientii imunodeprimati si in monitorizarea tumorilor induse de EBV, in special post-transplant. Deoarece cultivarea virusului nu este accesibila laboratorului clinic, se considera ca ADN-EBV poate servi ca “marker tumoral” in evaluarea bolilor limfoproliferative si a carcinomului nasofaringian2. Nivelul ADN in sange (cuantificat prin PCR cantitativ) incepe sa creasca cu cateva luni inainte de debutul bolii limfoproliferative si scade dupa initierea terapiei. Din acest motiv determinarea EBV-ADN in sange poate constitui un marker predictiv la pacientii susceptibili, fiind posibila estimarea riscului de dezvoltare in urmatoarele 3-4 luni a sindroamelor limfoproliferative postransplant in functie de valorile viremiei. De asemenea determinarile seriate de EBV-ADN sunt utile in evaluarea raspunsului la tratament al pacientilor cu boli limfoproliferative6.

In carcinomul nasofaringian viremia este mare la debut, scade in cursul radioterapiei, devine nedetectabila dupa obtinerii remisiunii, dar persista in cazul recidivelor1;4.

Pregatire pacient – nu este necesara6.

Specimen recoltatsange venos6.

Recipient de recoltare – vacutainer ce contine EDTA ca anticoagulant6.

Cantitate recoltata – cat permite vacuumul6.

Prelucrare necesara dupa recoltare – proba nu va fi centrifugata6.

Cauze de respingere a probei – probe vechi, coagulate, hemolizate; folosirea heparinei ca anticoagulant6.

Stabilitate proba – probele de sange sunt stabile 3 zile  la 2-8°C. Probele nu se congeleaza!6.

MetodaReal-time PCR: reactie de polimerizare in lant cu detectie in timp real a produsului PCR  acumulat, prin masurarea fluorescentei emise6.

Limita de detectie – Limita de detectie a metodei de lucru in domeniul de linearitate (masurabil) este 2415 UI/mL. Sensibilitatea analitica este de 1800 UI/mL.  1 UI/mL = 0.61 copii/mL6.

Interpretarea rezultatelor

Valori ale viremiei care cresc progresiv la determinari seriate sunt sugestive pentru sindroamele limfoproliferative posttransplant.

Pacientii imunodeprimati care prezinta reactivari ale infectiei, fara a dezvolta insa sindroame limfoproliferative, au de regula valori scazute ale viremiei.

In anumite situatii analizorul poate indica valori sub limita de detectie a metodei. Acestea vor fi comunicate cu mentiunea: “Rezultatul poate sa nu fie reproductibil datorita numarului redus de copii ale genomului viral”8.

Limite si interferente

Determinarile seriate EBV-ADN sunt mult mai utile in evaluarea riscului de sindrom limfoproliferativ posttransplant decat o viremie izolata8.

 

Bibliografie

1. Chan AT, Lo YM, Zee B, Chan LY, Ma BB, Leung SF, Mo F, Lai M, Ho S, Huang DP,Johnson PJ. Plasma Epstein-Barr virus DNA and residual disease after radiotherapy for undifferentiated nasopharyngeal carcinoma. In J Natl Cancer Inst, 2002; 94:1614-1619.

2. De David H. Persing, Thomas F. Smith, Fred C. Tenover. PCR Detection and Typing of Epstein-Barr Virus. In Diagnostic molecular microbiology. 1993. 344-355

3. Fan H, Gulley ML. Epstein-Barr viral load measurement as a marker of EBV-related disease. In Mol Diagn. 2001; 6:279–289.

4. Gulley ML, Tang W. Laboratory Assays for Epstein-Barr Virus-Related Disease. In J Molec Diagn, 2008; 10:279-292.

5. Guy Boivin. Diagnosis of herpesvirus Infection of the Central Nervous System. In Herpes 11. Supplement 2004; 2, 49-54.

6. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate. 2015. Ref Type: Catalog.

7. Luderer Rianne et al. Real Time Epstein-Barr Virus PCR for diagnosis of primary EBV infections and EB reactivation. In Molecular Diagnosis, 2005; 9 ( 4): 195-200.

8. Mayo Clinic/Mayo Medical LaboratoriesTest Catalogs and Guides. Epstein-Barr Virus (EBV) DNA Detection by PCR, Quantitative, Blood. www.mayomedicallaboratories.com. Ref Type: Internet Communication.

9. Ryan JL, Fan H, Swinnen LJ, Schichman SA, Raab-Traub N, Covington M, Elmore S, Gulley ML. Epstein- Barr Virus (EBV) DNA in plasma is not encapsidated in patients with EBV-related malignancies. In Diagn Mol Pathol. 2004;13:61–68.

< inapoi la lista

Pret 1876.00 MDL