int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Chlamydia (Chlamydophila) pneumoniae ADN

Pret 3300.00 MDL

Хламидия – это небольшой внутриклеточный прокариотический паразит, небольшой по размеру (0,2-1 мкм), который обладает как бактериальными характеристиками (синтезирует РНК и ДНК, имеет грамотрицательную бактериальную стенку и клеточную мембрану, чувствителен к антибиотикам циклинового типа), так и вирус (он размножается только в живых эукариотических клетках, он не может синтезировать свою АТФ, он обеспечивается клетками-хозяевами).
Но он отличается от всех микроорганизмов особым циклом роста, который характеризуется двумя различными формами:
• элементарная корпускула (ЕС), приспособленная к внеклеточному существованию;
• сетчатая тельца (CR), адаптированная к внутриклеточной среде (внутрицитоплазматическая).
Элементарные тельца очень заразны, и, попадая в организм, они прикрепляются к клеточной мембране и подвергаются эндоцитозу. Внутриклеточно эндосома не сливается с лизосомами, как это обычно происходит с любым интернализованным материалом, при этом хламидиоз остается в фагоцитозированном пузырьке в течение всего его жизненного цикла. Вскоре после входа в клетку ЕС превращается в CR, который больше и не может заразить другие клетки, а бинарный делится внутри вакуолей («внутрицитоплазматические хламидийные включения»). Примерно через 36 часов CR реорганизуется в EC, так что через 48-72 часа вся цитоплазма клетки может быть заменена включениями, содержащими сотни / тысячи EC. Несмотря на то, что цитоплазма клетки почти полностью занята ЭК, функция клетки подвергается минимальному воздействию. Высвобождение элементарных корпускул может происходить путем экзоцитоза включений или лизиса клеток-хозяев. ЭК способны заражать новые клетки либо внутри того же организма, либо у нового хозяина. Таким образом, жизненный цикл C. pneumoniae разделен между элементарными тельцами, которые способны заражать новых хозяев, но не могут размножаться, и сетчатыми тельцами, которые размножаются, но не способны вызвать новую инфекцию.
Последние классификации делят хламидиоз на 4 семьи, из которых наиболее важной в человеческой патологии является семейство. Chlamydiaceae, который содержит два рода:
• род Chlamydia – наиболее важным представителем является C. trachomatis;
• род Chlamydophila – C. pneumoniae, C. psittaci, C. pecorum, C. abortus и т. Д.
Пневмония и бронхит являются наиболее распространенными заболеваниями, связанными с C. pneumoniae. В серии клинических испытаний 10% пневмонии и приблизительно 5% бронхита и синусита у взрослых были отнесены к микроорганизму.
Симптомы инфекции C. pneumoniae неотличимы от других причин пневмонии и включают заложенность носа, кашель, лихорадку и одышку. Большинство случаев пневмонии относительно легкие и не требуют госпитализации. Однако даже в легких случаях полное выздоровление происходит медленно, несмотря на адекватную терапию антибиотиками, а кашель и недомогание могут сохраняться в течение нескольких недель после начала заболевания.
Несколько хронических заболеваний также были связаны с инфекцией C. pneumoniae. У пациентов с респираторными инфекциями C. pneumoniae в анамнезе чаще развивается астматический бронхит, что позволяет предположить, что эти микроорганизмы могут быть важным фактором развития астмы или обострений астмы.
Культуральные методы выделения микроорганизмов трудоемки и требуют много времени; Молекулярное тестирование – это быстрый способ выявления ДНК C. pneumoniae в различных дыхательных путях, что способствует раннему установлению соответствующей антибактериальной терапии3. В недавнем исследовании у детей с респираторными инфекциями чувствительность и специфичность теста ПЦР к диагнозу острой инфекции составили 63,6% и 100%, соответственно.
Рекомендации по определению хламидий – ДНК – обнаружение легочных инфекций3.
Обучение пациентов – не требуется2.
Собранный образец – а) глоточный или носоглоточный экссудат; б) жидкость, полученная в результате бронхиального лаважа или бронхо-альвеолярного лаважа, трахеальной или бронхиальной аспирации, мокрота2.
Урожайный контейнер – а) сухой буфер (без транспортной среды); б) стерильный контейнер2.
Собранное количество – б) минимум 2 мл2.
Обработка требуется после сбора урожая – не требуется2.
Причины отклонения образца – недостаточное количество для анализа; загрязнение образца; образцы слишком старые2.
Стабильность образца – образцы стабильны в течение 48 часов при 2-4 ° C до экстракции нуклеиновой кислоты2.
Метод – ПЦР Light-Cycler в реальном времени: цепная реакция полимеризации с детекцией накопленного продукта ПЦР в реальном времени путем измерения испускаемой флуоресценции (качественный тест)
Контрольные значения – хламидии – неопределяемая ДНК2.
Предел обнаружения – 200 копий / мл2.
Интерпретация результатов
Обнаружение Chlamydia – ДНК в дыхательных секретах предполагает клинический диагноз инфекции Chlamydia pneumoniae3.
Пределы и помехи
Хотя ПЦР является методом, который обеспечивает быструю и надежную диагностику, ложноотрицательные результаты могут наблюдаться в образцах, которые содержат очень мало микроорганизмов3.
Список используемой литературы
1. Чо-Чоу Куо, Лиза А. Джексон, Ли Энн Кэмпбелл, Дж. Томас Грейстоун, Chlamydia pneumoniae (TWAR), обзоры клинической микробиологии, том 8, № 4, 451–461, 1995.
2. Сыневская лаборатория. Конкретные ссылки на рабочую технологию, использованную в 2010 году. Тип ссылки: Каталог.
3. Маргарет Р. Хаммершлаг, Стефан А. Кольхофф, Петра М. Апфальтер. Chlamydophila (Chlamydia) pneumoniae In Mandell, Douglas, and Bennett, Принципы и практика инфекционных заболеваний, 7-е издание, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 2467-2474.
4. Синобу Отомо и соавт. Анализ детей с респираторными инфекциями Chlamydophila (Chlamydia) pneumoniae и Mycoplasma pneumoniae с помощью ПЦР-анализа в реальном времени и серологических тестов. In Acta Pathologica, Microbiologica, Immunologica Scandinavica (APMIS), том 116, 477-483, 2008.

Informatii generale

Chlamydia este un parazit procariot obligatoriu intracelular, de dimensiuni mici (0.2-1µm), ce prezinta atat caracteristici de bacterie (sintetizeaza ARN si ADN, au perete si membrana celulara asemanatoare bacteriilor Gram negative, este sensibil la antibiotice de tipul ciclinelor), cat si de virus (se multiplica doar in celulele vii eucariote, nu–si poate sintetiza ATP-ul, acesta fiind furnizat de celulele gazda).

Difera insa de toate microorganismele prin ciclul particular de crestere, caracterizat prin 2 forme distincte:

• corpusculul elementar (CE), adaptat existentei extracelulare;

• corpusculul reticulat (CR), adaptat mediului intracelular (intracitoplasmatic).

Corpusculii elementari sunt foarte infectiosi si o data patrunsi in organism, se ataseaza de membrana celulara, fiind endocitati. Intracelular  endosomul nu fuzioneza cu lizozomii, asa cum se intampla in mod obisnuit cu orice material internalizat, Chlamydia ramanand in vezicula fagocitata pe toata perioada ciclului de viata. La scurt timp de la patrunderea in celula, CE se transforma in CR, care au dimensiuni mai mari, nu pot infecta alte celule si se divid binar in interiorul vacuolelor (“incluziile chlamydiene intracitoplasmatice”). Dupa aproximativ 36 ore CR se reorganizeaza in CE, astfel incat dupa 48-72 ore intreaga citoplasma a celulei poate fi inlocuita de incluzii care contin sute/mii de CE. Cu toate ca citoplasma celulei este ocupata aproape in intregime de CE, functia celulara este afectata minim. Eliberarea corpusculilor elementari se poate produce prin exocitoza incluziilor sau prin liza celulelor gazda. CE sunt in masura de a infecta noi celule, fie in cadrul aceluiasi organism, fie intr-o gazda noua. Astfel ciclul de viata al C. pneumoniae este impartit intre corpusculii elementari, care sunt capabili sa infecteze gazde noi, dar nu se pot reproduce si corpusculii reticulati care se reproduce, dar nu sunt in masura sa provoace o infectie noua.

Clasificari recente impart Chlamydiile in 4 familii, dintre care cea mai importanta in patologia umana este fam. Chlamydiaceae, care contine doua genuri:

• genul Chlamydia – cel mai important reprezentant fiind C. trachomatis;

• genul Chlamydophila – C. pneumoniae, C. psittaci, C. pecorum, C. abortus etc.

Pneumonia si bronsita sunt cele mai frecvente boli asociate cu C.pneumoniae. Intr-o serie de studii clinice 10% din cazurile de pneumonie si aproximativ 5% din cele de bronsita si sinuzita la adulti au fost atribuite microorganismului.

Simptomele infectiei cu C. pneumoniae sunt imposibil de distins de alte cauze de pneumonie si acestea includ congestie nazala, tuse, febra, precum si dispnee. Cele mai multe cazuri de pneumonie sunt relativ usoare si nu necesita spitalizare. Cu toate acestea, chiar si in cazurile usoare, recuperarea completa este lenta, in ciuda antibioticoterapiei adecvate, iar tusea si starea de rau pot persista timp de mai multe saptamani dupa debutul bolii.

Mai multe boli cronice au fost, de asemenea asociate cu infectia cu C. pneumoniae. Pacientii care au avut in antecedente infectii respiratorii cu C. pneumoniae au probabilitate mai mare de a dezvolta bronsite astmatiforme, sugerandu-se ca aceste microorganisme pot fi un factor important in dezvoltarea astmului bronsic sau exacerbarilor astmului bronsic1;3.

Tehnicile de cultura pentru izolarea microorganismului sunt laborioase si consumatoare de timp;  testele moleculare constituie o modalitate de depistare rapida a ADN-ului pentru C. pneumoniae in diverse secretii respiratorii, facilitand astfel instituirea precoce a antibioticoterapiei adecvate3. Intr-un studiu recent efectuat la copii cu infectii respiratorii sensibilitatea si specificitatea testului PCR fata de diagnosticul infectiei acute au fost de 63.6% si, respective, 100%4.

Recomandari pentru determinarea Chlamydia – ADN – detectarea infectiilor pulmonare3.

Pregatire pacient – nu este necesara2.

Specimen recoltat – a) exsudat faringian sau nazofaringian; b) lichid obtinut prin spalatura bronsica sau lavaj bronho-alveolar, aspirat traheal sau bronsic, sputa2.

Recipient de recoltare – a) tampon uscat (fara mediu de transport); b) recipient steril2.

Cantitate recoltata – b) minimum 2 mL2.

Prelucrare necesara dupa recoltare – nu este necesara2.

Cauze de respingere a probei – cantitate insuficienta pentru analiza; contaminarea specimenului; specimene prea vechi2.

Stabilitate proba – probele sunt stabile 1 saptamana la 2-4°C2.

MetodaReal-time PCR Light-Cycler: reactie de polimerizare in lant cu detectie in timp real a produsului PCR  acumulat, prin masurarea fluorescentei emise (test calitativ)2.

Valori de referinta – Chlamydia – ADN nedetectabil2.

Limita de detectie – 200 copii/mL2.

Interpretarea rezultatelor

Detectia Chlamydia – ADN in secretii respiratorii sugereaza un diagnostic clinic de infectie cu Chlamydia pneumoniae3. 

Limite si interferente

Cu toate ca, PCR-ul este o metoda ce ofera un diagnostic rapid si fiabil, rezultate fals negative pot sa apara in probele care contin foarte putine microorganisme3.

 

Bibliografie

1. Cho-Chou Kuo, Lisa A. Jackson, Lee Ann Campbell, J. Thomas Graystone, Chlamydia pneumoniae (TWAR) Clinical Microbiology Reviews, Vol. 8, No. 4, 451–461, 1995.

2. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2015. Ref Type: Catalog.

3. Margaret R. Hammerschlag, Stephan A. kohlhoff, Petra M. Apfalter. Chlamydophila (Chlamydia) pneumoniae In Mandell, Douglas,and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 7th edition, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 2467 -2474.

4. Shinobu Otomo et al. Analysis of children with Chlamydophila (Chlamydia) pneumoniae and Mycoplasma pneumoniae respiratoryinfections by real-time PCR assay and serological tests. In Acta Pathologica, Microbiologica, Immunologica Scandinavica (APMIS), vol. 116, 477-483, 2008.

< inapoi la lista

Pret 3300.00 MDL