Активность плазминогена

Основная информация

Плазминоген является неактивным предшественником плазмина, первичного катализатора деградации фибрина. Плазминоген синтезируется в печени и присутствует в различных тканях и жидкостях, включая слюну, слезную секрецию, сперму, секрет простаты. Период полураспада в кровотоке составляет ~ 2 дня, что может быть резко сокращено в условиях, связанных с активацией фибринолитической системы. Молекула плазминогена представляет собой гликопротеин, состоящий из одной полипептидной цепи из 791 аминокислоты с относительной молекулярной массой 88 кДа с содержанием углеводов 2%. В зависимости от содержания углеводов в плазме циркулирует 2 основных варианта плазминогена в почти равных количествах, отличающихся функционально. Существует также неоднородность в первичной последовательности плазминогена, что отражает существование двух полиморфизмов с высокой заболеваемостью и нескольких других с низкой заболеваемостью в человеческой популяции. Плазминоген, выделяемый в кровь, содержит глутаминовую кислоту на N-конце, называемую Glu-плазминогеном; После протеолиза плазмином образуется деградированная форма плазминогена, наиболее распространенным из которых является лиз-плазминоген. Основным местом образования Lys-плазминогена является фибриновый сгусток, а период его полураспада короче (0,8 дня); эта конформационно модифицированная форма зимогена связывает фибрин быстрее, имеет в 2–3 раза большую авидность к клеточным рецепторам и активируется в 10–20 раз быстрее.
Глу-плазминоген преобразуется активаторами плазминогена, u-PA или t-PA, либо в плазме, либо в фибриновом сгустке, в Glu-плазмин, который содержит каталитическую триаду, специфичную для сериновых протеаз (His-Asp-Ser), и который разлагается фибриноген, фибрин и другие молекулы-мишени. Глу-плазмин может самостоятельно перевариваться, чаще всего лиз-плазмин. Плазмин ингибируется α2-антиплазмином, который обладает более эффективным действием вне фибринового сгустка.
Описан врожденный дефицит плазминогена, который может быть типом I или гипоплазминогенемией, соответственно дефицит антигена и активности, или тип II или дисплазминогенемия, с нормальным антигеном и сниженной активностью. Количественные дефекты наследуются как аутосомно-доминантное заболевание, тогда как качественные дефекты обычно наследуются аутосомно-рецессивно. Дисплазминогенемия чаще встречается у японцев, при этом единственная мутация присутствует в более чем 90% случаев. Клиническими проявлениями, связанными с гомозиготным дефицитом, являются тромбофилия и конъюнктивит, но по сравнению с другими тромбофильными состояниями риск тромбоза не так высок. Оба типа дефицита были описаны у пациентов с венозным тромбозом (особенно в Японии), но другие исследования не смогли определить, что изолированный дефицит плазминогена является фактором риска венозного тромбоза. Риск усугубляется в сочетании с другими наследственными или приобретенными причинами тромбофилии. Тяжелый дефицит плазминогена с уровнями 5-6% от нормы является редким явлением, которое проявляется как псевдомембранозное заболевание, поражающее слизистые оболочки (например, древесный конъюнктивит в глазу), но, что удивительно, не при венозном тромбозе. Значение гетерозиготного дефицита остается спорным.
Приобретенный дефицит плазминогена, который может возникать при заболеваниях печени, сепсисе, тромболитической терапии (с t-PA, u-PA или стрептокиназой), CID / системный фибринолиз, аргентинская геморрагическая лихорадка, лейкемия, возникающая в результате снижения синтеза или увеличения катаболизма, был связанные с тромботической окклюзией сосудов.

Рекомендации по тестированию: оценка пациентов с тромбозом в анамнезе и отрицательных тестов на общие факторы риска тромбоза ,оценка пациентов с древесным конъюнктивитом; оценка фибринолиза (в сочетании с другими компонентами фибринолитической системы: фибриноген, PAI-1, D-димеры); мониторинг тромболитической терапии.

Подготовка пациента - натощак. Следует избегать лечения пероральными антикоагулянтами за 2 недели до и гепарином за два дня до тестирования.

Собранный образец - венозная кровь.

Контейнер для сбора материала - вакутейнер с 0,105 М цитратом Na (цитрат натрия - соотношение крови = 1/9). Давление, оказываемое жгутом, должно находиться между значением систолического давления и диастолического давления и не должно превышать 1 минуты. Если венозная пункция не удалась, новая попытка в том же месте может быть сделана только через 10 минут.

Собранное количество образца: насколько позволяет вакуум.Чтобы предотвратить частичную коагуляцию образца, правильное смешивание крови с антикоагулянтом будет обеспечиваться инверсионными движениями пробирки.

Обработка, необходимая после сбора материала: образец будет центрифугирован в течение 15 минут при 2500, сразу же после отделения плазмы и замораживания; образцы, собранные вне лаборатории, будут транспортироваться в контейнер, предназначенный для замороженных образцов.

Причины отбраковывания образца : вакутейнер, который не заполнен; образец гемолизированной или коагулированной крови; плазма, которая не была заморожена в лаборатории.

Стабильность образца - отдельная плазма стабильна в течение 4 недель при - 20ºC.

Метод - хромогенный тест (плазма пациента смешивается с избытком стрептокиназы в присутствии фибриногена с образованием комплекса плазминоген-стрептокиназа, который превращает хромогенный субстрат; ферментативная активность комплекса не ингибируется ингибиторами плазмы) .

Контрольные значения - 80,2-132,5% 4.

Интерпретация результатов
Этот тест идентифицирует оба типа I и II дефицита плазминогена.
Наследственный дефицит очень редок. Снижение активности плазминогена может представлять врожденный дефицит, если можно исключить приобретенный дефицит, который встречается гораздо чаще.

Пределы и ограничения
Уровень плазминогена низок при рождении, ~ 50% от уровня взрослого, даже ниже у недоношенных детей и достигает уровня взрослого через 6 месяцев. Значения могут заметно возрасти во втором и третьем триместрах беременности.