Лактатный дегидрогенез (ЛДГ) - изоферменты

ЛДГ является оксидоредуктазой, которая участвует в анаэробном гликолизе, катализируя обратимую реакцию превращения молочной кислоты в пировиноградную кислоту. Это тетрамерный цитоплазматический фермент, состоящий из субъединиц Н (Сердце) и М (Мышца), широко распространенных в организме и обнаруживаемых главным образом в почках, миокарде, скелетных мышцах, мозге, эритроцитах, печени и легких.
ЛДГ является неспецифическим показателем повреждения тканей. Чтобы определить источник повышения уровня ферментов, необходимо выделить и количественно определить 5 различных фракций ЛДГ, полученных в результате объединения в разных пропорциях двух типов мономеров Н и М: ЛДГ-1 (Н4), ЛДГ-2 (Н3М), LDH-3 (H2M2), LDH-4 (HM3) и LDH-5 (M4).
Специфичность ткани обусловлена ​​тем, что в определенных тканях происходит специфический синтез различных субъединиц в четко определенных соотношениях. Таким образом, сердечные клетки, эритроциты и почки преимущественно синтезируют субъединицы H (LDH-1-H4), в то время как гепатоциты синтезируют почти исключительно субъединицы M. Скелетная поперечно-полосатая мышца также в основном продуцирует M субъединицы, поэтому LDH-5 увеличивается. при заболеваниях печени и мышц. ЛДГ-1 и ЛДГ-5 чаще всего используются для обозначения патологии сердца или печени. ЛДГ-2 обнаруживается в эритроцитах, сердце, почках, ретикулоэндотелиальной системе, ЛДГ-3 обнаруживается преимущественно в легких, лимфоцитах и ​​поджелудочной железе, а ЛДГ-4 - в поперечно-полосатых мышцах, печени, почках или поджелудочной железе 2; 3.
Рекомендации по определению изоферментов ЛДГ
Диагностика заболеваний сердца, печени, мышц, почек, легких или гематологических заболеваний;
Дифференциальная диагностика заболеваний сердца, печени, мышц, почек, легких или гематологических заболеваний;
Диагностика ОИМ в сочетании с общей креатинкиназой (СК) и СК-МВ;
Расследование необъяснимых причин увеличения ЛДГ;
Обнаружение форм макро-LDH3.
Подготовка пациента - натощак или после приема пищи 1.
Материал - венозная кровь 1 .
Транспортная среда, пробирка - вакуумный без антикоагулянта с / без гелевого сепаратора 1.
Необходимая обработка после сбора материала - отделение сыворотки центрифугированием 4.
Объем образца - 2 мл сыворотки 4.
Причины отказа от пробы
- гемолизированного образца 4.

Стабильность образца - отделенная сыворотка стабильна в течение 7 дней при 4-8 ° С; 2 недели при -20 ° С 4.
Метод - электрофорез 1.
Референтные значения 1

LDH-1: 0,66-1,29 мкмоль / сл

ЛДГ-2: 1,2-1,71 мкмоль / сл

ЛДГ-3: 0,7-1,07 мкмоль / сл

ЛДГ-4: 0,24-0,5 мкмоль / сл

LDH-5: 0,13-0,71 мкмоль / сл.

Интерпретация результатов
Заметное увеличение общей активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ) или изоморфного паттерна (значительно более высокая общая ЛДГ, без процентного увеличения доли) можно наблюдать при мегалобластной анемии, нелеченной пернициозной анемии, болезни Ходжкина, новообразованиях, кардиореспираторном заболевании, гипотиреозе , инфекционный мононуклеоз или другие воспалительные состояния, уремия, гипоксия или тяжелый шок.
При остром инфаркте миокарда ЛДГ-1 появляется в сыворотке крови примерно через 10-12 часов, достигает максимальных значений через 48-72 часа, а затем возвращается к норме через 10-14 дней. Поскольку этот тест неспецифичен, его можно заменить определением тропонина Т или креатинкиназы-MB (CK-MB), если только IMA не произошел по крайней мере за 24 часа до тестирования.
Обычно отношение LDH-1 / LDH-2 является субъединицей (<0,81). Значения между 0,82-0,99 указывают на подозрение на повреждение миокарда, а соотношение> 1 (или, по крайней мере,> 0,9) является диагностическим для ОИМ, если клинические критерии также выполнены. Нестабильная стенокардия связана с увеличением LDH-1 / LDH-2, но с нормальными значениями общего LDH. Тем не менее, прогрессивное увеличение LDH-1 / LDH-2 без полного изменения имеет важное значение для диагностики ОИМ.
Постоянство изменения отношения LDH-1 / LDH-2 в дни после острого инфаркта миокарда может быть маркером повторного инфаркта. Когда IMA осложняется шоком, изоморфная модель предшествует изменению отношения LDH-1 / LDH-2.
Увеличение соотношения ЛДГ-1 / ЛДГ-4 оказалось лучшим показателем ОИМ.
Повышенные значения ЛДГ-1, связанные с обращением отношения ЛДГ-1 / ЛДГ-2, характеризуют мегалобластную анемию (дефицит фолиевой кислоты, пернициозная анемия), гемолитическую болезнь или другие формы гемолиза in vivo, рабдомиолиз, избыточную и случайную физическую нагрузку, инфаркт почки ,
Повышенные концентрации LDH-1 в плазме могут быть обнаружены у пациентов с семиномой яичка, несеминоматозными опухолями яичка или дисгерминомой.
Повышенное соотношение LDH-5 / LDH-1 может свидетельствовать о раке простаты или других опухолях.
Увеличение форм ЛДГ-2, ЛДГ-3, ЛДГ-4 неспецифично и связано с септическим шоком, легочной тромбоэмболией, обширной пневмонией, острым лейкозом, лимфоцитозом, острым панкреатитом, новообразованиями.
Повышенные уровни LDH-5 в сыворотке вызваны полосатыми мышечными травмами (травмой), заболеваниями печени (застойные явления в печени, застойная сердечная недостаточность, гепатит, цирроз печени, алкоголизм, хлорпромазин-индуцированный гепатит, отравление тетрахлорметаном) и кожные заболевания (ожоги). Некоторые исследования показали, что соотношение ЛДГ-4 / ЛДГ-5 <1 подтверждает диагноз гепатоцеллюлярной карциномы, в то время как значение этого показателя выше метастазов в печени> 90% случаев.
Увеличение LDH-5 является более значительным, если оно также связано с увеличением соотношения LDH-5 / LDH-4. Тем не менее, дополнительные тесты, такие как: АЛТ, ГГТ, электрофорез сывороточного белка и время протромбина могут быть полезны для установления точного диагноза.
Макроферменты представляют собой высокомолекулярные комплексы фермента и иммуноглобулинов A или G, которые можно обнаружить в сыворотке крови. Эти комплексы характеризуются аномальной миграцией изоферментных электрофоретических полос или аномальным расширением полосы. Хотя это не вызывает или не связано с какими-либо симптомами или заболеванием, присутствие макро-ЛДГ может вызвать увеличение общего ЛДГ.
Недавно был обнаружен шестой изофермент, расположенный рядом с катодом и названный LDH-6. Это не комплекс иммуноглобулина, который был описан у пациентов с заболеваниями печени и имеет неблагоприятный прогноз 2; 3.
Пределы и интерференция
Гемолизированный образец неприемлем, потому что эритроциты содержат больше ЛДГ, чем сыворотка, и вызывают ложно повышенные значения. Активность ЛДГ является одним из наиболее чувствительных показателей гемолиза in vitro.
Длительное замораживание или хранение при 40 ° C (> 12 часов) может вызвать изменения во фракции LDH-5 1;
• наркотики
Увеличивает: ацебутолол, вальпроевая кислота, амиодарон, анестетики, аспирин, азитромицин, азлоциллин, каптоприл, цефалоспорины, циметидин, хлорпромазин, дикумарол, этанол, этретинат, флуфеназин, фоскарнет, фуросемид, лабазин, лабиринт, фуросемид, лаб. нитрофурантоин, нестероидные противовоспалительные препараты (например, дифлунизал, кетопрофен, пироксикам), пеницилламин, пиперациллин, пликамицин, пропоксифен,
симвастатин, сульфонамиды, тикарциклин.
Уменьшает: аскорбиновая кислота, амикацин, противосудорожные препараты, клофибрат, эналаприл, гидроксимочевина, метронидазол.
Библиография
1Лаборатория Synevo. Конкретные ссылки на технологии работы использованы 2010. Ref Type: Catalog.
2. Laboratory Corporation of America. Directory of Services and Interpretive Guide. Lactate Dehydrogenase (LD) Isoenzymes. www.labcorp.com . 2010. Ref Type: Internet Communication.
3. Mayo Clinic, Mayo Medical Laboratories. Test Catalog. Lactate Dehydrogenase (LD) Isoenzymes, Serum. www.mayomedicallaboratories.com.Ref Type: Internet Communication.