int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Virus herpetic uman (HHV) tip 7 ADN (in sange, LCR)

Pret 2920.00 MDL

В классификации Всемирной организации здравоохранения ВОЗ (2008 г.) по миелоидным новообразованиям и острым лейкозам термин «миелоид» включает все клетки, принадлежащие к линиям гранулоцитов (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы), моноцито-макрофаги, эритроидные, мегакариоциты и тучные клетки. Новая номенклатура миелопролиферативных образований была изменена с «Хронических миелопролиферативных заболеваний» (MPD) на «Миелопролиферативные новообразования» (MPNs) для точного отражения их неопластической природы. Кроме того, подгруппа, ранее обозначенная как «миелодиспластические / миелопролиферативные заболевания», была переименована в «миелодиспластические / миелопролиферативные новообразования» (MDS / MPN, миелодиспластические / миелопролиферативные новообразования) 11.
И MPN, и MDS / MPN представляют собой клональные новообразования с типично повышенной медуллярной клеточностью, созреванием клеточных линий и органомегалией, причем разделение между ними основано на наличии миелодисплазии в конце. Кроме того, они имеют различные степени общего фиброза позвоночника, но обычно различаются по линии миелоидных клеток, которая доминирует в кроветворении. Среди MPNs есть четыре распространенных типа, а именно хронический миелогенный лейкоз (CML), характеризующийся транслокацией 9; 22 и слитым белком BCR / ABL1, и три не-CML типа, вера полицитемии (PV, полицитемия вера), тромбоцитемия Эссенциальная тромбоцитемия (PMF) и первичный миелофиброз (PMF), которые в общем имеют повышенную частоту приобретенной точечной мутации (V617F) в киназе JAK2, важной цитоплазматической тирозинкиназе в гематопоэтической пролиферации2. Другие мутации в пути JAK-STAT также были идентифицированы у некоторых пациентов с MPN JAK2V617F (-), предполагая, что конституциональная активация этого сигнального пути является общей особенностью этих состояний5.
Практически все пути передачи внутриклеточного сигнала связаны киназопосредованным фосфотрансферным каскадом. У людей экспрессируется более 500 киназ, которые фосфорилируют отдельные белки, обычно на уровне остатков тирозина, серина или треонина. JAK2 (Janus-ассоциированная киназа 2) является членом семейства четырех цитоплазматических тирозинкиназ, которое также включает в себя JAK1, JAK3 и TYK212. JAK-тирозинкиназы являются критическими компонентами, которые интегрируют компоненты различных внутриклеточных сигнальных путей, включая Src-киназу, Ras-MAP-киназу, PI3K-AKT и STAT, после взаимодействия цитокиновых / интерфероновых рецепторов с их лигандами. Таким образом, оптимальная активность JAK-киназ является критической для нормальной передачи сигналов цитокинов и факторов роста. Гиперактивность JAK-киназы была вовлечена в онкогенез, связанный с различными лейкозными синдромами, активация мутаций в JAK1 была недавно обнаружена при остром лимфобластном лейкозе с предшественником Т-клеток, тогда как дефицит JAK3 был связан с тяжелым комбинированным иммунодефицитом и селективным ингибитором JAK3 был разработан для формирования нового класса иммунодепрессантов. Дефицит JAK2 у мышей смертелен на эмбриональной стадии из-за недостаточности эритропоэза 7,12,13.
Трехмерная структура JAK-киназ в настоящее время неизвестна из-за того, что они представляют собой относительно большие белки, более 1100 аминокислот, с видимой молекулярной массой 120-140 кДа. Каждая из JAK-киназ имеет 7 хорошо законсервированных доменов кросс-видов, «JAK гомология» JH1-JH7, которая не имеет сходства с какой-либо известной белковой моделью (см. Рисунок 1). Домен JH1 на С-конце содержит каталитический домен. Валин в положении 617 находится в домене JH2, домене псевдокиназы, который имеет значительную гомологию с доменом JH1, но не обладает каталитической активностью, в нем отсутствуют некоторые критические аминокислоты, необходимые для функциональной киназы. Эта тандемная архитектура является торговой маркой киназ JAK и дает им имя после римского бога Януса (Ianus) с двумя лицами, что означает начало и конец. На основании наблюдения, что делеция домена JH2 приводит к увеличению активности киназы JAK2, было высказано предположение, что домен JH2 отрицательно регулирует активность киназы JH15; 7; 10; 13. N-конец содержит SH2-подобные домены (JH3-JH4) и гомологичный домен FERM (4-point-1, Erzin, Radixin, Moesin) (JH6-JH7), участвующий во взаимодействии с трансмембранными белками, такими как рецепторы для цитокины и, кроме того, связывает киназный домен, положительно регулируя его каталитическую активность13
Тирозинкиназы JAK являются конститутивно неактивными, связанными с юкстамембранозной областью рецепторов цитокинов, в некоторых случаях взаимодействие между JAK и рецептором усиливается после связывания лиганда. Было высказано предположение, что связывание лиганда способствует конформационной модификации рецептора, которая способствует активации JAK взаимодействием двух расположенных рядом JAK киназ и само- и / или транс-фосфорилированием остатков тирозина в петле активации киназного домена13. Вместо этого фосфорилированный JAK опосредует фосфорилирование остатков тирозина в цитоплазматическом домене рецептора и создает док-сайт для рекрутирования нескольких белков, что в конечном итоге приводит к активации STAT (сигнального преобразователя и активатора транскрипции), MAP (митоген-активируемого белка) киназы и путей. PI3K-AKT. Активированные STAT димеризуются и транслоцируются в ядро, где они регулируют транскрипцию после связывания со специфическими консенсусными последовательностями в промоторных областях нескольких генов-мишеней. JAK2 также участвует в экспрессии рецепторов EpoR (рецептор эритропоэтина) и MPL (рецептор тромбопоэтина) на поверхности клетки, выступая в качестве стабилизатора белка. Эти сложные сигналы автономно активируются в отсутствие связывания цитокинов с рецептором или в случае мутаций JAK2 или рецепторов (таких как мутация W515L / K в MPL) 10.
Большинство цитокинов могут быть связаны с более чем одной JAK-киназой, но JAK2 необходим для гормоноподобных цитокинов, таких как гормон роста, пролактин, эритропоэтин, тромбопоэтин и семейство цитокинов, которые передают сигналы через рецептор IL-3 (IL- 3, IL-5 и GM-CSF), которые также важны для цитокинов, использующих рецептор gp130, и для некоторых интерферонов. JAK2 является преобладающей JAK-киназой, участвующей в пролиферации и дифференцировке миелоидных клеток5; 13.
Ген JAK2 картируется в хромосоме 9p24, кодируемой двумя продуктами транскрипции, 5,3 и 5 т.п.н., и белок экспрессируется повсеместно, как и JAK1 и TYK2, в отличие от JAK3, который преимущественно экспрессируется в гемопоэтических клетках.
Мутация JAK2V617F представляет собой замену гуанина тимидином в положении 1849 в экзоне 14, что приводит к замене валина фенилаланином в кодоне 617, что, как полагают, приводит к потере самоингибирующего контроля псевдокиназного домена JH2. Введение этой мутации в клеточные линии увеличивает их цитокиновую независимость и гиперчувствительность к цитокинам, имитируя рост гемопоэтических предшественников in vitro у пациентов с MPN и предоставляя объяснение механизма образования эндогенной колонии эритроидных клеток в отсутствие эритропоэтина PV. , Мутация отсутствует в зародышевой линии, которая приобретается как соматическая мутация в гематопоэтическом компартменте, обнаруживается более чем у 95% пациентов с PV, до 50% пациентов с TE и PMF, у 40-50% пациентов с рефрактерной анемией с кольцевыми сидеробластами и тромбоцитозом (RARS-T), редкими пациентами с атипичным ХМЛ BCR-ABL1 (-), CMML (хронический миеломоноцитарный лейкоз), ОМЛ (острый миелоидный лейкоз) и даже у некоторых пациентов с наследственным тромбоцитозом или гематологически нормальными пациентами с вены porta1; 3; 5; 9; 10; 11. На этом уровне до настоящего времени не было описано никаких других альтернативных мутаций, другие активирующие JAK2 мутации, включая T875N в киназном домене, делецию IREED или мутации по экзону 12, были намного реже по сравнению с JAK2V617F. С другой стороны, хотя сигнальный путь JAK2 конститутивно активируется различными генетическими и эпигенетическими механизмами в новообразованиях человека, в том числе лимфомой и миеломой, аллель JAK2V617F является эксклюзивным для миелоидных новообразований, что предполагает различные механизмы, которые активируют JAK25.
Существует несколько гипотез относительно вклада одного аллеля болезни в развитие трех связанных миелоидных заболеваний, но клинически-патологических.
▪ В первой гипотезе фенотип зависит от клетки-мишени мутации JAK2V617F. Различные исследования показали, что гранулоцитарные, эритробластические, мегакариоцитарные и лимфоидные линии содержат клетки JAK2V617F (+) как в PV, так и в PMF, что не исключает того, что JAK2V617F нацелен на разные подгруппы гемопоэтических стволовых клеток с различными транскрипционными свойствами и свойствами. другой. Действительно, есть группы, которые показали различия в компартменте стволовых клеток между PV и PMF
▪ Во второй гипотезе JAK2V617F является единственным событием, ответственным за MPN, и фенотип зависит от генетического фона пациента. Из сравнительного анализа данных четырех исследований, в которых разные генетические типы мышей были трансплантированы гемопоэтическими стволовыми клетками, трансдуцированными JAK2V617F, было обнаружено, что они воспроизводят фенотипы TE, PV или пост-PV, предполагая, что мутация JAK2 достаточна для индукции MPN3. ,
Второй аргумент относительно модуляции фенотипа унаследованных генетических факторов исходит от Pardanani и коллег, которые обнаружили, что существуют SNP (однонуклеотидные полиморфизмы), специфичные для JAK2 и EpoR, связанные с PV или TE3; 5.
▪ В третьей гипотезе фенотип зависит от уровня киназной активности JAK2V617F. Мутация JAK2V617F может быть обнаружена в гетерозиготном или гомозиготном состоянии у пациентов с MPN, причем механизм, приводящий к гомозигизму, является в большинстве случаев митотической рекомбинацией хромосомы 93. Таким образом, колонии гомозиготных мутаций JAK2V617F гомозиготных мутантов даже у PV наблюдаются у большинства пациентов. те с небольшой аллельной нагрузкой, но редко встречаются у TE. Данные исследований показывают, что существуют качественные и / или количественные различия в конститутивной передаче сигналов в генах, зависящих от дозы, мутантных клеток JAK2V617F, которые влияют на фенотип, что позволяет предположить, что уровень передачи сигналов JAK2-STAT5 функционирует как реостат, определяющий преобладающий эритроидный или мегакариоцитарный фенотип. Когда он присутствует в гетерозиготном состоянии, мутация преимущественно стимулирует мегакариопоэз, а в гомозиготном состоянии мегакариопоэз уменьшается в пользу повышенного эритропоэза9. В зависимости от уровня и продолжительности воздействия устойчивая активность киназы в конечном итоге приведет к миелофиброзу3.
В целом, наибольшая нагрузка на аллель V617F, соответственно уровень мутантного аллеля по сравнению с нормальным аллелем, обнаруживается у пациентов с PV, за которыми следуют пациенты с PMF и TE.
Объяснение того, как различия в количестве одного мутантного белка могут приводить к различным фенотипам, может объясняться различной экспрессией EpoR, MPL и G-CSFR в предшественниках. MPL экспрессируется на повышенных уровнях в предшественниках мегакариоцитов, что позволяет предположить, что небольшого количества JAK2V617F будет достаточно для индукции передачи сигналов MPL, пролиферации мегакариоцитов и продукции тромбоцитов, как видно из TE. Вместо этого EpoR экспрессируется на низких уровнях в предшественниках эритроида, поэтому для индукции передачи сигналов EpoR и гиперплазии эритроида, что приводит к фенотипу PV, потребуются более высокие количества JAK2V617F. Было показано, что избыточная передача сигналов MPL путем чрезмерной стимуляции Tpo (тромбопоэтином) приводит к миелофиброзу, что позволяет предположить, что повышенное количество JAK2V617F, приводящее к сильной передаче сигналов MPL в мегакариоцитах, будет отвечать за миелофиброз 3.
TE JAK2V617F (+) был предложен в качестве «взбитой формы» PV, основываясь на наблюдении, что эти пациенты имеют более низкие уровни тромбоцитов, более высокие уровни гемоглобина, лейкоциты, более низкие уровни эритропоэтина и более высокие показатели венозного тромбоза. по сравнению с теми с TE с нормальным JAK21; 3; 9. Кроме того, пациенты с PV с высокой нагрузкой JAK2V617F (> 50%) имеют значительно повышенные уровни гемоглобина и повышенную скорость фиброзной трансформации по сравнению с гетерозиготными пациентами, и прогрессирование до миелофиброза после PV связано с повышенной нагрузкой в ​​JAK2V617F3. Учитывая, что миелофибротическую трансформацию PV и TE нельзя отличить от PMF, пациенты с диагнозом PMF могут быть людьми, которые присутствуют в ускоренной фазе ранее существовавшего MPN1. Таким образом, некоторые рассматривают MPN JAK2V617F (+) как отдельное заболевание с различными стадиями / фенотипами3; 10.
С другой стороны, пациенты с TE JAK2V617F (+) почти никогда не прогрессируют до гомозигизма, в то время как пациенты с PV JAK2V617F (+) почти всегда имеют гомозиготный субклон, который можно обнаружить только при анализе отдельных колоний. Таким образом, считается, что существует фундаментальное молекулярное различие между пациентами с PV и TE, а не «континуум», как предполагает модель «хлыст» 9.
Дополнительные соматические мутации могут также способствовать патогенезу PV, TE и PMF JAK2V617F (+)
▪ В четвертой гипотезе мутация JAK2V617F может не быть начальным клоногенным событием в развитии MPN, и может существовать мутантная клетка до JAK2, которая определяет фенотип. +) развитие острой лейкемии часто отрицательно для этой мутации3; 10 или тот факт, что пациенты с MPN JAK2V617F (+) производят эритропоэтин-независимые эритроидные колонии, отрицательные для мутации JAK21. Многие группы описали пациентов, у которых есть другая молекулярная аномалия, связанная с JAK2V617F, такая как BCR-ABL, мутации MPL или другая мутация JAK23. Недавно сообщалось о пациентах, у которых приобретению мутации JAK2 предшествовала делеция хромосомы 20q или мутация в TET2. Кроме того, у части пациентов с хронической фазой MPN было выявлено биклональное заболевание, при котором в отдельных клональных экспансиях могут быть обнаружены два генетических события (мутации в JAK2 или MPL или делеции хромосомы 20q) 1.
Наконец, наличие семейных случаев MPN, в основном с аутосомно-доминантной передачей с неполным проникновением, является самым сильным аргументом в пользу наличия события до JAK2 у некоторых пациентов. Во всех случаях JAK2V617F приобретается как соматический аллель. Различные клинические объекты и формы JAK2V617F (+) и JAK2V617F (-) могут сосуществовать в одном и том же семействе, что свидетельствует о наличии неизвестного события зародышевой линии, которое будет предрасполагающим фактором для MPN3; 5.
Существуют исследования, показывающие, что приобретение мутации JAK2V617F тесно связано с наследованием гаплотипа, который включает ген JAK2. У гетерозигот по этому гаплотипу мутация JAK2 наблюдалась гораздо чаще в цис, чем в предрасполагающем аллеле. Были предложены две модели: модель гипермутируемости, в которой предрасполагающий аллель особенно склонен к приобретению мутаций из-за неизвестных механизмов, и модель «плодородного основания», в которой мутации JAK2 могут происходить одинаково в любом аллеле, но с гораздо большей вероятностью это приведет к клональной экспансии с явным заболеванием, если он приобретен в цис-положении с предрасполагающим гаплотипом, возможно, в результате различия в экспрессии или функции белка JAK2, кодируемого этим аллелем1 (см. рис. 2).
Роль мутации JAK2V617F (+) в осложнениях MPN, включая тромбоз, миелофиброз и лейкозную трансформацию, остается неизвестной5. Сообщалось, что у пациентов с TE JAK2V617F (+) частота общих тромбозов и венозных тромбозов увеличилась по сравнению с пациентами без мутации, но прямая связь между TE JAK2V617F (+) и артериальными событиями не была точно установлена1. Недавние исследования предполагают, что лейкоцитоз является важным фактором риска тромбоза в MPN, при этом одно исследование показало повышенную экспрессию генов, указывающую на нейтрофильную активацию у пациентов с ET JAK2V617F (+), предполагая, что существует связь между активацией нейтрофилов, тромбозом и сигнализация JAK2 в MPN5. Что касается прогрессирования до острого лейкоза, это включает в себя приобретение других генетических событий. Исследования клеточных линий показывают, что экспрессия JAK2V617F связана с повышенным повреждением ДНК и аберрантным восстановлением. Кроме того, клетки JAK2V617F (+) от пациентов с PV или PMF не подвергаются апоптозу в ответ на повреждение ДНК, обеспечивая механизм накопления генетических повреждений. Однако в половине случаев лейкемия, развившаяся в контексте предыдущей MPN JAK2V617F (+), является негативной для мутации JAK2, есть две альтернативные модели, объясняющие это явление: 1. две фазы заболевания являются филогенетически связанными, возникающими из общего клона-основателя. (pre-JAK2) и 2. MPN и AML клонально не связаны и отражают трансформацию независимых стволовых клеток1.
Идентификация активирующих мутаций в JAK2 привела к разработке целевой молекулярной терапии для этих пациентов. Исследования фазы I с ингибиторами JAK2 были начаты при PMF и после миелофиброза после PV / TE.
Сообщалось, что у пациентов с PV JAK2V617F (+) применение интерферона снижает нагрузку на мутантный аллель со случайной молекулярной ремиссией1.
В отличие от JAK2V617F, в котором был идентифицирован только один аллель, по меньшей мере, 8 различных мутаций были зарегистрированы в 12 экзоне JAK2, включая миссенс-мутации, делеции и вставки, включающие остатки 537-543 (N542-E543del, F537-K539delinsL, E543). -D544del, K539L6). Как и в случае JAK2V617F, экспрессия мутаций экзона 12 приводит к цитокин-независимому росту гемопоэтических клеток, активации сигнальных путей STAT5, AKT и MAP киназы. Мутации активации экзона 12, вероятно, составляют менее 2% пациентов с PV, и до настоящего времени были выявлены только у пациентов с эритроцитозом JAK2V617F (-) и, в большинстве случаев, у пациентов с идиопатическим эритроцитозом без ассоциированного лейкоцитоза и тромбоцитоза. Это говорит о том, что разные активирующие мутации в JAK2 связаны с разными клиническими фенотипами5; 10. Мутации экзона 12 JAK2 достаточны для того, чтобы вызвать гетерозиготный эритроцитоз, что приводит к более сильной лиганд-независимой передаче сигналов через JAK2, и целевые белки, такие как Stat5, ERK1 и ERK2, по-видимому, более сильно фосфорилированы, чем в случае JAK2V617F8; , Отсутствие мутаций экзона 12 у пациентов с TE согласуется с концепцией, согласно которой низкие уровни передачи сигналов JAK2 способствуют тромбоцитозу, тогда как более активная передача сигналов способствует эритроцитозу8.
Пациенты с мутациями в экзоне 12 JAK2 имеют эритроцитоз, низкий уровень эритропоэтина в сыворотке и характерную медуллярную гистологию (гиперплазия эритроида без морфологических отклонений мегакариоцитов и линии гранулоцитов). Как и в случае других MPN, эритропоэтин-независимые эритроидные культуры могут быть получены из клеток периферической крови, и у некоторых пациентов наблюдаются цитогенетические аномалии, спленомегалия или миелофибротическая трансформация8.
Рекомендации по мутации JAK2V617F и интерпретации результатов
● Первичная диагностическая оценка пациентов с клиническим подозрением на MPN и BCR-ABL1 (-).
● Оценка полицитемий вместе с уровнями эритропоэтина в сыворотке.
Молекулярное генотипирование является частью диагностических критериев ВОЗ для MPN 2008 года, соответственно тестирование мутаций JAK2, MPL и KIT становится стандартным инструментом в диагностическом протоколе MPN, обнаружение одной из этих мутаций с уверенностью устанавливает наличие клонального заболевания и исключает гранулоцитоз, эритроцитоз , тромбоцитоз или реактивный миелофиброз11.
Напротив, они не могут различить различные формы MPN, хотя мутации в экзоне 12 JAK2 до сих пор сообщались только при PV, и ни у одного пациента с PV не было мутации MPL10. Для точного диагноза результат должен быть соотнесен с клиническими данными и другими лабораторными данными, а также с гистопатологическими изменениями, характерными для каждого подтипа11
Semnificatia prognostica a detectiei mutatiei JAK2V617F in MPN nu a fost inca clar stabilita.
Un rezultat negativ pentru mutatia JAK2V617F nu exclude prezenta unei MPN sau altei neoplazii. In cazurile rare de PV la care aceasta este absenta poate fi gasita o mutatie a exonului 12 JAK2, iar un procent redus dintre pacientii cu PMF si TE la care lipseste o mutatie JAK2 poate demonstra mutatii activatoare MPL, cum ar fi MPL W515K sau MPL W515L11. Este insa in dezbatere daca diagnosticul de PV poate fi sustinut in absenta unei mutatii JAK210.
Datorita implicatiilor terapeutice testarea pentru BCR-ABL1 trebuie considerata la pacientii fara mutatii JAK2 sau MPL1.
Specimen recoltat – sange venos4.
Recipient de recoltare – vacutainer ce contine EDTA ca anticoagulant4.
Cantitate recoltata– cat permite vacuumul4.
Cauze de respingere a probei– folosirea heparinei ca anticoagulant4.
Stabilitate proba – 7 zile la 2-8ºC4.
Metoda– secventierea exonului 14. La pacientii negativi pentru mutatia JAK2V617F se va efectua secventierea exonului 12 JAK24.
Limite si interferente
Pentru diagnosticul molecular al mutatiilor exonului 12 este de preferat sa se foloseasca ADN din celulele medulare sau din colonii hematopoietice clonogene decat ADN din leucocitele periferice, deoarece implicarea granulocitara la acesti pacienti este de obicei scazuta8.
Metoda folosita poate sa nu identifice mutatiile la pacientii cu incarcatura clonala mica6.
Список используемой литературы
1. Beer A P, Green R A. «Патогенез и лечение эссенциальной тромбоцитемии». Гематология 2009 (1): 621.
2. Георгий I Т. «Патология миелопролиферативных заболеваний». В Wintrobe`s Clinical Hematology, Greer J, Foerster J, Lukens J, Rodgers G, Pareskevas F, Glader B, 11-е издание, Lippincott Williams & Wilkins, 2004, 2054-66. 1988.
3. Джеймс С. «Мутация JAK2V617F при полицитемии и других миелопролиферативных заболеваниях: одна мутация при трех заболеваниях?». Гематология 2008 (1): 69.
4. Синевская лаборатория. Конкретные ссылки на используемую технологию работы, 2010 год. Тип ссылки: Каталог.
5. Левин Р., Гиллиланд Д. Г. «Миелопролиферативные расстройства». Кровь 2008; 112 (6): 2190-98.
6. Ohyashiki HJ, Hisatomi H, Shimizu S, Sugaya M, Ohyashiki K. «Обнаружение низкоаллельного бремени Jak2 Exon 12 с использованием TA-клонирования у пациентов с эритроцитозом». Японский журнал клинической онкологии 2009; 39 (8): 509-513.
7. Рэйн С., Редди Э. П. «Янус-киназы: компоненты множественных сигнальных путей». Онкоген 2000; 19 (49): 5662-79.
8. Скотт М.Л. и соавт. «Мутации JAK2 Exon 12 при полицитемии и идиопатическом эритроцитозе». NEJM 2007; 356 (5): 459-468.
9. Шкода Р. «Тромбоцитоз». Гематология 2009 (1): 159.
10. Ваннуччи М. А., Гуглиелмелли П., Теффери А. «Прогресс в понимании и управлении миелопролиферативными новообразованиями». CA Cancer J Clin 2009; 59: 171-191.
11. Vardiman W J, et al. «Пересмотр 2008 года классификации миелоидных новообразований и острых лейкозов Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ): рациональные и важные изменения». Кровь 2009; 114 (5): 937-951.
12. Верстовсек С. «Терапевтический потенциал ингибиторов Jak2». Гематология 2009 (1): 636.
13. Ямаока К., Сахаринен П., Песу М., Холт Е. Т. V III, Сильвенноинен О., О`Ши Дж. J. Janus kinases (Jaks). Genome Biol. 2004; 5 (12): 253.

SKU: BM54 Durata 10 zile produse divrese: LCR, sânge venos

Informatii generale

Virusul herpetic uman tip 7 – Human herpesvirus 7 (HHV-7) – a fost izolat in 1990 de catre Frenkel si colaboratorii in limfocitele CD4 ale unui adult sanatos cu exanthema subitum. Face parte din subfamilia β-herpesvirusurilor, genul Roseolovirus, prezentand omologie cu HHV-6 in proportie de 20 – 75%.

Avand in vedere caracterul ubicuitar al HHV-7, peste 80% din populatie prezinta anticorpi anti-HHV-7 in ser. Infectia cu HHV-7 apare mai tarziu decat cea cu HHV-6; 18% dintre copii sunt infectati in primul an de viata, procentul atingand 53% pana la varsta de 2 ani. Multi copii dezvolta boala intre 2 si 5 ani, transmisia virusului realizandu-se, in general, prin intermediul salivei persoanelor infectate.

HHV-7 are tropism pentru limfocitele T CD4 pozitive, celulele epiteliale de la nivelul glandelor salivare, precum si celulele din plamani si tegument. De asemenea virusul a fost detectat in laptele matern. HHV-7 ramane cantonat in concentratii crescute in saliva, atat la adulti, cat si la copii, pe toata durata vietii. Virusul induce degradarea moleculelor din clasa I a complexului major de histocompatibilitate.

Infectia primara poate fi asimptomatica sau se caracterizeaza prin aparitia febrei (400C), convulsiilor febrile, mai rar a vomei, diareei si a manifestarilor de tract respirator superior.

HHV-7 este implicat de asemenea si in aparitia exantemului subit (identic cu cel indus de HHV6), desi majoritatea cazurilor sunt induse de HHV-6. HHV-7 a fost asociat mai rar cu boala SNC decat HHV-6.

HHV-7 poate determina encefalita atat la persoanele imunocompetente cat si la cei imunosupresati. Conform unui studiu, 10% din copiii spitalizati in Marea Britanie cu encefalita sau febra si convulsii au fost diagnosticati ca avand infectie acuta cu HHV-7.

Diagnosticul pozitiv al unei infectii cu HHV-7 se bazeaza pe seroconversia IgG de la negativ la pozitiv sau prin prezenta anticorpilor IgM. In absenta anticorpilor, o metoda alternativa de diagnostic este detectarea ADN-ului viral in ser sau plasma, prezenta acestuia indicand o infectie acuta2.

Recomandari pentru determinarea HHV-7ADN – utilitate in diagnosticul rapid al infectiilor cu HHV-72;3.

Pregatire pacient – nu este necesara3.

Specimen recoltata) sange venos; b) lichid cefalorahidian recoltat prin punctie lombara3.

Recipient de recoltare – a) vacutainer ce contine EDTA ca anticoagulant; b) recipient steril pentru LCR3.

Cantitate recoltata – a) cat permite vacuumul; b) minimum 2 mL3.

Prelucrare necesara dupa recoltare – a), b) probele nu vor fi centrifugate3.

Cauze de respingere a probei – a) probe vechi, coagulate, hemolizate; folosirea heparinei ca anticoagulant3.

Stabilitate proba – probele de sange sau de LCR sunt stabile 1 saptamana la 2-4°C3.

MetodaReal-time PCR Light-Cycler: reactie de polimerizare in lant cu detectie in timp real a produsului PCR  acumulat, prin masurarea fluorescentei emise (testul va fi efectuat din plasma sau LCR)3.

Valori de referinta – HHV-7 ADN nedetectabil3.

Limita de detectie – 10 copii/proba3.

Interpretarea rezultatelor

Obtinerea unui rezultat pozitiv pentru HHV-7 ADN in plasma, in prezenta tabloului clinic, reprezinta un indicator de infectie activa2.

Detectarea ADN-ului HHV-7 la nivelul lichidului cefalorahidian este sugestiva pentru o infectie la nivelul sistemului nervos central, dar nu are valoare diagnostica absoluta (poate exista HHV-7 ADN in LCR si la pacienti fara sindroame neurologice)1.

Limite si interferente

Un rezultat negativ nu exclude infectia cu HHV-73.

 

Bibliografie

1. Guy Boivin. Diagnosis of Herpesvirus Infections of the Central Nervous System. In HERPES 11, Supplement, 2004.

2. Jeffrey I. Cohen Human Herpes Types 6 and 7. In Mandell, Douglas,and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 7th edition, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 2011-2014.

3. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2015. Ref Type: Catalog.

< inapoi la lista

Pret 2920.00 MDL