int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Polyomavirus JC ADN

Pret 3070.00 MDL

Человеческие полиомавирусы – вирус JC (JCV) и вирус BK (BKV) – распространены повсеместно и не вызывают заболевания у иммунокомпетентных людей. Описана распространенность 86 и 90% специфических антител к JCV и BKV среди взрослого населения.
JCV – это небольшой ДНК-вирус без оболочки, который является этиологическим агентом прогрессирующего мультифокального лейкоэнцефалита (ПМЛ), демиелинизирующего заболевания центральной нервной системы, которое встречается у пациентов с тяжелой иммуносупрессией.
Первичная инфекция возникает в раннем детстве и протекает бессимптомно, после чего JCV сохраняется в организме в латентном состоянии. JCV-ДНК выявляется методом ПЦР в ткани миндалины у 39% здоровых людей, что свидетельствует о возможной оральной или респираторной передаче инфекции. Обнаружение вируса в моче здоровых людей свидетельствует о том, что в почках находится сайт скрытого вируса. Обнаружение JCV-ДНК в костном мозге и мозге людей без ПМЛ также предполагает наличие двух других сайтов вирусной латентности1. Через несколько лет вирус может быть реактивирован у людей с ослабленным иммунитетом, особенно у больных СПИДом; ПМЛ возникает в результате реактивации JCV и характеризуется типичными гистологическими и нейрорадиологическими изменениями1; 2; 4.
У пациентов с ПМЛ JCV инфицирует олигодендроциты и астроциты в головном мозге и, реже, в спинном мозге и вызывает их лизис, что приводит к разрушению миелиновой оболочки1.
ПМЛ была первоначально описана как осложнение у пациентов с иммунодефицитом с первичными лимфомами ЦНС, лейкемией, иммуносупрессивной терапией при ревматоидном артрите, саркоидозе или после трансплантации органов. В настоящее время иммуносупрессия, вызванная ВИЧ-инфекцией, является наиболее распространенной причиной ПМЛ, частота которой в 50 раз выше по сравнению с другими заболеваниями, вызывающими иммуносупрессию2. Так, у 80% пациентов с ПМЛ есть СПИД, у 13% – злокачественные гематологические заболевания, у 5% – трансплантация костного мозга или твердых органов, у 2% – хронические воспалительные заболевания. Недавно сообщалось о новой группе пациентов с ПМЛ; они получали иммуномодулирующее лечение при различных злокачественных новообразованиях или аутоиммунных заболеваниях, таких как натализумаб при рассеянном склерозе или болезни Крона, ритуксимаб при лимфоме или СКВ и эфализумаб при псориазе.
Распространенность ПМЛ составляет 0,7-8% от показательных для СПИДа заболеваний и остается неизменной после широкого внедрения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) по сравнению с другими оппортунистическими инфекциями и энцефалопатией ВИЧ, частота которых сократилась вдвое после введения HAART.
Повреждения PML являются демиелинизирующими, обычно в нескольких очагах, расположенных в белом веществе. Клиническая картина соответствует топографии пораженных участков, преобладающим двигательным дефицитом, таким как гемипарез.
Предполагаемый диагноз устанавливается на основе исследования с помощью ядерного магнитного резонанса и может быть подтвержден обнаружением вируса JC в спинномозговой жидкости с использованием методов ПЦР. Определенный диагноз является гистологическим: аспект многоочаговой демиелинизации, олигодендроциты с крупными ядрами и крупными причудливыми астроцитами с лопастными ядрами, гиперхроматический2. Тем не менее, биопсия головного мозга может быть недоступна в определенных местах поражений и из-за плохого состояния пациентов. Кроме того, эта инвазивная процедура связана с повышенным риском заболеваемости и смертности. Обнаружение JCV-ДНК в CSF является быстрой неинвазивной альтернативой биопсии мозга. Целевая последовательность специфична для JCV; перекрестные реакции с BKV невозможны.
До широкого применения ВААРТ тест имел чувствительность 72-92% и специфичность 92-100%. После введения ВААРТ аналитическая чувствительность значительно снизилась до 58% без изменения специфичности
Рекомендации по определению JCV – ДНК – подозрение на PML3; 4.
Обучение пациентов – не требуется3.
Собранный образец – спинномозговая жидкость, собранная при люмбальной пункции3.
Урожайный контейнер – стерильный контейнер3.
Собранное количество – минимум 2 мл3.
Обработка требуется после сбора – образцы не будут центрифугированы3.
Стабильность образца – образцы CSF стабильны в течение 48 часов при 2-4 ° C до экстракции нуклеиновой кислоты3.
Метод – ПЦР Light-Cycler в режиме реального времени: реакция цепной полимеризации с детекцией накопленного продукта ПЦР в режиме реального времени путем измерения испускаемой флуоресценции (качественный тест) 3.
Контрольные значения – JCV – необнаружимая ДНК3.
Предел обнаружения – 10 копий / образец3.
Интерпретация результатов
Обнаружение JCV-ДНК в CSF подтверждает клинический диагноз ПМЛ, вызванного этим вирусом4.
Пределы и помехи
Отрицательный результат не исключает диагноз ПМЛ
Список используемой литературы
1. С. Сабрина Тан, Игорь Яковлевич Коральник. JC, BK и другие полиомавирусы: прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия. В Mandell, Douglas, and Bennett, Принципы и практика инфекционных заболеваний, 7-е издание, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 2051-2054.
2. Дэн Дуйкулеску, Люминита Эне. Прогрессирующий мультифокальный лейкоэнцефалит (ПМЛ). В Румынском журнале инфекционных заболеваний, том IX, № 1-2, 2006.
3. Синевская лаборатория. Конкретные ссылки на рабочую технологию, использованную в 2010 году. Тип ссылки: Каталог.
4. Клиника Майо. Медицинские лаборатории Майо. Каталог испытаний: JC Virus, Molecular Detection, PCR, Spinal Fluid. www.mayomedicallaboratories.com. Тип ссылки: Интернет-связь.

Informatii generale

Polyomavirusurile umane – virusul JC (JCV) si virusul BK (BKV) – sunt ubicuitare si nu produc boli la persoanele imunocompetente. Se descrie o prevalenta de 86 si 90% a anticorpilor specifici fata de JCV si respectiv BKV in populatia de varsta adulta.

JCV este un virus ADN de dimensiuni mici, lipsit de anvelopa, care constituie agentul etiologic al leucoencefalitei multifocale progresive (PML), o boala demielinizanta a sistemului nervos central care apare la pacientii cu imunodepresie severa.

Infectia primara se produce in prima copilarie si este asimptomatica, dupa care JCV persista in organism intr-o stare latenta. JCV-ADN este detectat prin tehnica PCR in tesutul amigdalian la 39% din indivizii sanatosi, ceea ce sugereaza o posibila transmitere a infectiei pe cale orala sau respiratorie. Depistarea virusului in urina la persoanele sanatoase indica faptul ca rinichiul este un sediu de cantonare a virusului latent. De asemenea detectarea JCV-ADN in maduva osoasa si creierul persoanelor fara PML sugereaza alte doua situsuri ale latentei virale1. Dupa mai multi ani virusul poate fi reactivat la persoanele imunodeprimate, in special la cei cu SIDA; PML se produce ca urmare a reactivarii JCV si se caracterizeaza prin modificari histologice si neuroradiologice tipice1;2;4.

La pacientii cu PML JCV infecteaza oligodendrocitele si astrocitele din creier si, mai rar, din maduva spinarii si induce liza acestora, avand drept rezultat distrugerea tecii de mielina1.

PML a fost descrisa initial ca o complicatie la pacien¡ii imunosupresati cu limfoame primitive ale SNC, cu leucemie, la pacienti cu tratament imunosupresor pentru artrita reumatoida, sarcoidoza sau dupa transplante de organ. In prezent imunodepresia determinata de infectia HIV este cea mai frecventa cauza de PML cu o incidenta de 50 de ori mai mare comparativ cu alte afectiuni care determina imunosupresie2. Astfel, 80% din pacientii cu PML au SIDA, 13% prezinta boli hematologice maligne, 5% au suferit un transplant de maduva sau de organe solide, iar 2% au boli inflamatorii cronice. Recent a fost raportat un nou grup de pacienti cu PML; acestia au primit tratamente imunomodulatoare pentru diverse afectiuni maligne sau autoimune, cum ar fi: natalizumab pentru scleroza multipla sau boala Crohn, rituximab pentru limfoame sau LES si efalizumab pentru psoriazis1.

Prevalenta PML este de 0.7-8% din bolile indicatoare SIDA si a ramas neschimbata dupa introducerea pe scara larga a terapiei antiretrovirale inalt active (HAART), comparativ cu celelalte infectii oportuniste si cu encefalopatia HIV ale caror incidente s-au redus la jumatate dupa introducerea HAART.

Leziunile din PML sunt de demielinizare, de obicei in focare multiple, localizate in substanta alba. Tabloul clinic corespunde topografiei zonelor lezate, predominand deficitele motorii de tipul hemiparezelor.

Diagnosticul de prezumtie se stabileste pe baza examinarii prin rezonanta magnetica nucleara si poate fi confirmat prin detectia virusului JC in lichidul cefalorahidian prin utilizarea tehnicilor PCR. Diagnosticul de certitudine este histologic: aspect de demielinizare multifocala, oligodendrocite cu nuclei mariti si astrocite mari, bizare, cu nuclei lobulati, hipercromatici2. Cu toate acestea biopsia cerebrala poate sa nu fie disponibila in cazul anumitor localizari ale leziunilor si datorita starii precare a pacientilor. In plus, acest procedeu invaziv este asociat cu un risc crescut de morbiditate si mortalitate. Detectia JCV-ADN in LCR constituie o alternativa non-invaziva rapida la biopsia cerebrala. Secventa tinta este specifica pentru JCV; nu sunt posibile reactii incrucisate cu BKV.

Inainte de aplicarea pe scara larga a HAART testul avea o sensibilitate de 72-92% si o specificitate de 92-100%. Dupa introducerea HAART sensibilitatea analitica a scazut semnificativ la 58% fara a se modifica insa specificitatea1.

Recomandari pentru determinarea JCV – ADN – suspiciune de PML3;4.

Pregatire pacient – nu este necesara3.

Specimen recoltat – lichid cefalorahidian recoltat prin punctie lombara3.

Recipient de recoltare – recipient steril3.

Cantitate recoltata – minimum 2 mL3.

Prelucrare necesara dupa recoltare – probele nu vor fi centrifugate3.

Stabilitate proba – probele de LCR sunt stabile 1 saptamana la 2-4°C3.

MetodaReal-time PCR Light-Cycler: reactie de polimerizare in lant cu detectie in timp real a produsului PCR  acumulat, prin masurarea fluorescentei emise (test calitativ)3.

Valori de referinta – JCV – ADN nedetectabil3.

Limita de detectie – 10 copii/proba3.

Interpretarea rezultatelor

Detectia JCV-ADN in LCR sustine diagnosticul clinic de PML cauzat de acest virus4.

Limite si interferente

Un rezultat negativ nu exclude diagnosticul de PML4.

 

Bibliografie

1. C. Sabrina Tan, Igor J. Koralnik. JC, BK and Other Polyomaviruses: Progresive Multifocal Leukoencephalopathy. In Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 7th edition, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 2051-2054.

2. Dan Duiculescu, Luminita Ene. Leucoencefalita multifocala progresiva (PML). In Revista romana de boli infectioase, vol IX, nr.1-2, 2006.

3. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2015. Ref Type: Catalog.

4. Mayo Clinic. Mayo Medical Laboratories. Test Catalog: JC Virus, Molecular Detection, PCR, Spinal Fluid. www.mayomedicallaboratories.com. Ref Type: Internet Communication.

< inapoi la lista

Pret 3070.00 MDL