int(0)

Teste de laborator

Pachete de analize medicale

Planșa anatomică

Teste de la A la Z A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z
Teste Laborator
Product categories
Pachete analize Plansa anatomica
< inapoi la lista

Mycoplasma pneumoniae ADN (LCR, exsudat faringian sau nazofaringian, lavaj bronhoalveolar)

Pret 2239.00 MDL

Mycoplasma pneumoniae является патогеном, часто участвующим в внебольничной пневмонии, для которой в большинстве случаев характерно коварное атипичное начало4.
M. pneumoniae – прокариотический микроорганизм с очень маленьким геномом. В отличие от других бактерий, он не имеет клеточной стенки, которая ограничена триламеллярной мембраной, содержащей стерины. Он делится бесполым образом на бинарное деление, причем время удвоения популяции составляет> 6 часов; По этой причине культивирование возбудителя требует длительного времени (5-20 дней) 5.
М. pneumoniae колонизирует слизистую оболочку дыхательных путей; прикрепление к клеткам слизистой оболочки, уклонение от процесса фагоцитоза и модуляция иммунной системы являются важными элементами для начала заболевания1. Патогенность микоплазмы была связана с активацией медиаторов воспаления, таких как цитокины4.
Наиболее распространенным клиническим проявлением является трахеобронхит; Пневмония, которая развивается примерно у трети инфицированных людей, начинается медленно в течение 2-3 недель после воздействия, с лихорадкой, головной болью, фарингитом, постоянным непродуктивным кашлем. Пневмония проходит в большинстве случаев через 2-3 недели, хотя кашель может длиться в течение месяца1; 4.
Часто описываются внелегочные проявления инфекции Mycoplasma pneumoniae, которые могут поражать любой орган. Тем не менее, из-за высокой распространенности инфекции среди населения, возможно, что многие из зарегистрированных случаев являются лишь случайной ассоциацией с пневмонией. Внелегочные проявления включают: преходящую сыпь, синдром Стивенса-Джонсона, синдром Рейно, сердечные осложнения (аритмии, изменения ЭКГ – нарушения вождения, застойную сердечную недостаточность), неврологические (энцефалит, асептический менингит, менингоэнцефалит, миелит) стволовой, синдром Гийена-Барре, периферическая невропатия, ЦНС васкулит), опорно-двигательного аппарата (polytralgia, артрит), почек, гематологические (редкие случаи апластической анемии) 5.
Выращивание микроорганизмов из дыхательных секретов или биологических жидкостей должно быть «золотым стандартом» для диагностики. Тем не менее, культура требует трудоемкой процедуры и специализированных средств массовой информации, которые недоступны в большинстве микробиологических лабораторий.
Высокая чувствительность и специфичность молекулярно-биологических тестов (например, метод ПЦР в реальном времени), которые выявляют специфическую ДНК M. pneumoniae в мокроте, носоглоточном экссудате, аспирате трахеи, жидкости бронхоальвеолярного лаважа или бронхиальном лаваже, показывают, что они может быть основой для быстрого и конкретного диагноза. Наибольшая чувствительность достигается в случае образцов мокроты. ПЦР-тесты можно использовать на любой стадии инфекции, включая ранние стадии, когда серологические реакции отрицательны4; 5.
У некоторых пациентов с неврологическими расстройствами (энцефалит, ишемический инсульт), с или без респираторных проявлений, было возможно выделить ДНК М. pneumoniae в CSF, демонстрируя, что патоген способен проникать через гематоэнцефалический барьер и непосредственно проникать в ЦНС; в других случаях с серологией, свидетельствующей о недавней инфекции M. pneumoniae и неврологических расстройствах, не было обнаружено специфической ДНК, что доказывает участие иммунологических, постинфекционных механизмов в возникновении неврологических осложнений2.
Выделение ДНК M. pneumoniae из крови ограничивается случаями инфекции со значительными системными проявлениями3.
Рекомендации по определению Mycoplasma pneumoniae – ДНК – выявление инфекций легких и возможных других внелегочных осложнений3; 4; 5.
Обучение пациентов – не требуется3.
Собранный образец – а) глоточный или носоглоточный экссудат; б) жидкость, полученная в результате бронхиального лаважа или бронхоальвеолярного лаважа, трахеальной или бронхиальной аспирации, мокроты; в) кровь ЭДТА; г) спинномозговой жидкости, собранной с помощью люмбальной пункции3.
Урожайный контейнер – а) сухой буфер (без транспортной среды); б), г) стерильный контейнер; в) вакутейнер, содержащий ЭДТА в качестве антикоагулянта3.
Собранное количество – б), г) минимум 2 мл; в) столько, сколько позволяет вакуум.
Обработка требуется после сбора урожая – не требуется.
Причины отклонения образца – недостаточное количество для анализа; загрязнение образца; образцы слишком старые3.
Стабильность образца – образцы стабильны в течение 48 часов при 2-4 ° C до экстракции нуклеиновой кислоты3.
Метод – ПЦР в реальном времени Light-Cycler: цепная реакция полимеризации с детекцией накопленного продукта ПЦР в режиме реального времени путем измерения испускаемой флуоресценции (качественный тест) 3.
Контрольные значения – Mycoplasma pneumoniae – неопределяемая ДНК3.
Предел обнаружения – 200 копий / мл3.
Интерпретация результатов
Обнаружение микоплазм – ДНК в различных патологических продуктах предполагает клинический диагноз инфекции Mycoplasma pneumoniae3.
Пределы и помехи
Хотя ПЦР является методом, который обеспечивает быструю и надежную диагностику, ложноотрицательные результаты могут возникать в образцах, которые содержат очень мало микроорганизмов. По этой причине для диагностики острой инфекции необходимо провести ПЦР-тест вместе с серологией.
Список используемой литературы
1. Гейл Л. Вудс, Дэвид Х. Уокер. Хламидийные, рикциальные и микоплазменные инфекции. В Генри Клиническая диагностика и управление лабораторными методами – Sauders Elsevier 21-Ed 2007, 1010, 1011
2. Джон Гринли, Ричард Т Джонсон. Неврологические осложнения инфекции Mycoplasma pneumoniae. www.medlink.com. Тип ссылки: Интернет-связь.
3. Синевская лаборатория. Конкретные ссылки на рабочую технологию, использованную в 2010 году. Тип ссылки: Каталог.
4. Майкл Дж. Боно. Пневмония, микоплазма. emedicine.medscape.com, 2010. Тип ссылки: Интернет-коммуникации.
5. Стивен Г. Баум. Mycoplasma pneumoniae и атипичная пневмония. В Mandell, Douglas, and Bennett, Принципы и практика инфекционных заболеваний, 7-е издание, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 2481-2487.

SKU: BM137 Durata 10 zile produse diverse: LCR, spută, secreții recoltate prin spălătură bronșică sau aspirație traheală

Informatii generale

Mycoplasma pneumoniae constituie un agent patogen implicat frecvent in pneumonia comunitara caracterizata, in majoritatea cazurilor, printr-un debut insidios, atipic4.

M. pneumoniae este un microoorganism procariot, cu un genom foarte mic. Spre deosebire de celelalte bacterii, nu detine perete celular, fiind delimitat de o membrana trilamelara ce contine steroli. Se divide asexuat prin fisiune binara, timpul de dublare al populatiei fiind >6 ore; din acest motiv cultivarea patogenului necesita un timp indelungat (5-20 zile)5.

M. pneumoniae colonizeaza mucoasa tractului respirator; atasarea de celulele mucoasei, sustragerea de la procesul de fagocitoza si modularea sistemului imun sunt elemente esentiale pentru initierea bolii1. Patogenicitatea mycoplasmei a fost asociata cu activarea mediatorilor inflamatiei, cum ar fi citokinele4.

Cea mai frecventa manifestare clinica este traheobronsita; pneumonia, care se dezvolta la aproximativ o treime din persoanele infectate, debuteaza lent in 2-3 saptamani de la expunere, cu febra, cefalee, faringita, tuse persistenta neproductiva. Pneumonia se remite in majoritatea cazurilor dupa 2-3 saptamani, desi tusea se poate mentine o luna de zile1;4.

Au fost descrise frecvent  manifestari extrapulmonare ale infectiei cu Mycoplasma pneumoniae, ce pot afecta orice organ. Totusi, datorita prevalentei mari a infectiei in populatie, este posibil ca multe din evenimentele raportate sa constituie doar o asociere intamplatoare cu pneumonia. Printre manifestarile extrapulmonare se numara: eruptii cutanate tranzitorii, sindrom Stevens-Johnson, sindrom Raynaud, complicatii cardiace (aritmii, modificari EKG – tulburari de conducere, insuficienta cardiaca congestiva), neurologice (encefalita, meningita aseptica, meningo-encefalita, mielita transversa, disfunctie de trunchi cerebral, sindrom Guillain-Barré, neuropatii periferice, vasculita SNC), musculo-scheletale (poliatralgii, artrita), renale, hematologice (cazuri rare de anemie aplastica)5.

Cultivarea microorganismului din secretii respiratorii sau fluide biologice ar trebui sa reprezinte metoda “gold-standard” pentru diagnostic. Cu toate acestea, cultura necesita o procedura laborioasa si medii specializate, nefiind disponibila in majoritatea laboratoarele de microbiologie.

Sensibilitatea si specificitatea inalta a testelor de biologie moleculara (de exemplu, metoda real-time PCR) care detecteaza ADN-ul specific M. pneumoniae in sputa, exsudat nazofaringian, aspirat traheal, lichid de lavaj bronho-alveolar sau spalatura bronsica indica faptul ca acestea pot sta la baza unui diagnostic rapid si specific. Sensibilitatea cea mai mare se obtine in cazul probelor de sputa. Testele PCR pot fi utilizate in orice etapa a infectiei, inclusiv in cele precoce cand reactiile serologice sunt negative4;5.

La unii pacienti cu afectiuni neurologice (encefalita, accident vascular ischemic), insotite sau nu de manifestari respiratorii, a fost posibil sa se izoleze M. pneumoniae ADN in LCR demonstrand ca patogenul este capabil sa penetreze bariera hematoencefalica si sa invadeze direct SNC; in alte cazuri cu serologie sugestiva pentru o infectie recenta cu M. pneumoniae si tulburari neurologice nu a fost detectat ADN-ul specific, dovedind implicarea unor mecanisme imunologice, post-infectioase in aparitia complicatiilor neurologice2.

Recomandari pentru determinarea Mycoplasma pneumoniae – ADN – detectarea infectiilor pulmonare si posibil a altor complicatii extrapulmonare3;4;5.

Pregatire pacient – nu este necesara3.

Specimen recoltat – a) exsudat faringian sau nazofaringian; b) lichid obtinut prin spalatura bronsica sau lavaj bronho-alveolar, aspirat traheal sau bronsic, sputa; c)  lichid cefalo-rahidian recoltat prin punctie lombara3.

Recipient de recoltare – a) tampon uscat (fara mediu de transport); b), c) recipient steril3.

Cantitate recoltata – b), c) minimum 2 mL3.

Prelucrare necesara dupa recoltare – nu este necesara3.

Cauze de respingere a probei – cantitate insuficienta pentru analiza; contaminarea specimenului; specimene prea vechi3.

Stabilitate proba – probele sunt stabile 1 saptamana la 2-4°C3.

MetodaReal-time PCR Light-Cycler: reactie de polimerizare in lant cu detectie in timp real a produsului PCR  acumulat, prin masurarea fluorescentei emise (test calitativ)3.

Valori de referinta – Mycoplasma pneumoniae – ADN nedetectabil3.

Limita de detectie – 200 copii/mL3.

Interpretarea rezultatelor

Detectia Mycoplasma – ADN in diverse produse patologice sugereaza un diagnostic clinic de infectie cu Mycoplasma pneumoniae3. 

Limite si interferente

Cu toate ca PCR-ul este o metoda ce ofera un diagnostic rapid si fiabil, rezultate fals negative pot sa apara in probele care contin foarte putine microorganisme. Din acest motiv, pentru diagnosticul unei infectii acute testul PCR trebuie efectuat impreuna cu serologia5.

 

Bibliografie

1. Gail L. Woods, David H. Walker. Chlamydial, Ricketsial, and Mycoplasmal infections. In Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods- Sauders Elsevier 21-Ed 2007, 1010, 1011.
2. John E Greenlee, Richard T Johnson. Neurologic complications of Mycoplasma pneumoniae infection. www.medlink.com. Reference Type: Internet Communication.
3. Laborator Synevo. Referintele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2015. Ref Type: Catalog.
4. Michael J. Bono. Pneumonia, Mycoplasma. emedicine.medscape.com, 2010. Reference Type: Internet Communication.
5. Stephen G. Baum. Mycoplasma pneumoniae and Atypical Pneumonia. In Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 7th edition, Churchill Livingstone, Elsevier, 2010, 2481-2487.
< inapoi la lista

Pret 2239.00 MDL