Жидкостно-пункционное исследование (Антибиотикограмма по необходимости)

Экссудаты и трансудаты закрытых полостей представляют собой воспалительную или невоспалительную реакцию соответствующих сывороток на определенные возбудители, что приводит к избыточному накоплению жидкости между висцеральной и теменной мембранами.

Воспалительные процессы лежат в основе различных этиологических состояний. В подавляющем большинстве случаев это местные инфекции, возникающие в результате воспалительных процессов соответствующего органа или соседних органов, инфекционных травм или могут представлять собой локализацию некоторых общих заболеваний септицемического типа. Обычно это стерильные ареалы с микробиологической точки зрения, но они могут быть инфицированы всеми четырьмя категориями микроорганизмов: бактериями, грибками, вирусами и паразитами.1.

Результат микробиологических исследований зависит от качества сбора материала и транспортировки проб2. В лаборатории Synevo пункционные жидкости могут обрабатываться как в классической системе, так и в автоматической системе.

Для автоматической системы сбор материала производится у постели больного непосредственно во флаконы, обеспечивающих аэробные и анаэробные условия, и немедленно транспортируется в лабораторию 1.

Классический метод требует концентрации пункционной жидкости путем центрифугирования в стерильной пробирке, 15 минут при 3500 оборотах / минута3.

В случае настоящего коагула в собранной жидкости он гомогенизируется с выделением бактерии1.

После центрифугирования супернатант собирается в стерильной пробирке, а осадок используется для мазков и бактериальных культур.

Для изготовления мазков используются чистые обезжиренные лезвия, предпочтительно новые, чтобы убедиться, что у них нет выдающихся бактерий из предыдущих обследований. Осадок простирается от центра лезвия к периферии с помощью ansa или пипетки Пастера, чтобы получить непрерывный слой клеток. Готовится 4 мазка, из которых 2 будут зафиксированы и окрашены в Грам и метиленовый синий соответственно, мазок будет окрашен в Гимзу, а один останется зарезервированным 3.

На окрашенном по Граму мазке видно наличие микробов, их морфологию, наинкториальность, частоту и локализацию (внутри-или экстралейкоцитарные).

Цветные пластинки Гимсы и метиленового синего используются для цитологического исследования. В процентах оценивается тип элементов: ПМН, лимфоциты, отмечая при этом их внешний вид.

Культивирование является специфическим средством диагностики, но требует от 24 до 48 часов и может быть отрицательным в случае нежизнеспособных микробов или если пациент начал лечение антибиотиками.

Можно использовать: Колумбийский агар с 5% крови овцы, шоколадный агар, лактозную гелозу и тиогликолатный бульон. В зависимости от бактериоскопического исследования могут быть добавлены другие среды (Sabouraud).

Окружающая среда инкубируется при 37°C, возможно, в атмосфере с 5% CO2 для таких сред, как колумбийский агар с 5% крови овцы и шоколадный агар.

Возникновение культуры отслеживается ежедневно в течение 3 дней на твердой среде и 5 дней в пробирке с тиогликолатным бульоном1;3.

В случае положительных культур продолжается идентификация на уровне видов и проводится антибиотикограмма.

В случае положительной, исключительно тиогликолатного бульона, отмечается день инкубации и уровень, на котором произошел рост (поверхность, глубина), мазки и проходы делаются на твердых средах с инкубацией как в аэробных, так и в анаэробных условиях.

В случае подозрения на анаэробную инфекцию необходимо собирать материал в специальных контейнерах, поддерживающих условия анаэробиоза. Посев выполняется как аэробно (рутинно), так и анаэробно1.

Интерпретация культур

Помимо патогенных и комменсальных бактерий, они ответственны за инфекции (у пациентов с хроническими изнурительными, иммунодепрессивными заболеваниями из-за инвазивных методов, протезов и т. д.). Правильная оценка предполагает, что сбор, транспортировка и обработка соответствуют стандартам, чтобы изолированные организмы происходили из места заражения и не были загрязнителями.

Встречающаяся бактериальная флора разнообразна. Таким образом, в инфицированных плевральных жидкостях преобладают грамположительные кокки: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Enterobacteriaceae, Pseudomonas, но также часто встречаются анаэробные микробы родов Fusobacterium или Bacteroides отдельно или в ассоциации.

В этиологии перитонита часто встречается ассоциация аэробных и анаэробных грамположительных и грамотрицательных микробов; независимо от причины перитонита преобладают микробы кишечного типа: E. coli, Bacteroides, Enterococcus, Staphylococcus, Pseudomonas3.

Инфекция суставных жидкостей обычно монобактерий и обычно представлена стафилококками, стрептококками, неиссерами и грамотрицательными бациллами.

Этиологическими агентами перикардита чаще всего являются вирусы: энтеровирусы, аденовирусы, а с ними обычно связаны бактериальные и грибковые инфекции 1.

Особое место в этиологии плевритов занимает род Mycobacterium, но в лабораториях Synevo не проводятся посевы для бациллы Кох2.